广西壮族自治区科技攻关计划(1114012-11)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 相关作者：蔡小辉刘旭佳彭银辉董兰芳游出超更多>>
- 相关机构：广西海洋研究所广东海洋大学广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区科技攻关计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达条件的优化被引量：3
- 2015年
- 旨在优化拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达条件。克隆拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因成熟肽片段,与p ET-28a表达载体连接后,转入到大肠杆菌BL21(DE3)中,通过优化条件进行诱导表达。结果显示,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度0.2 mmol/L、37℃条件下培养4 h后表达量最大,分子大小与预期值相符。融合蛋白主要以包涵体形式高效表达,通过His Trap HP柱子使其得到进一步纯化。Western blot分析表明,该融合蛋白可与鼠抗His-tag单克隆抗体发生特异性结合。说明通过优化表达条件,获得拟穴青蟹抗菌肽hyastatin基因原核表达表达产物。
- 彭银辉蔡小辉熊向英刘旭佳黄国强
- 关键词：拟穴青蟹原核表达
- 青蟹呼肠孤病毒对拟穴青蟹的致病性研究被引量：4
- 2013年
- 2008—2012年广西海洋研究所海水增养殖基地暂养的拟穴青蟹膏蟹出现"嗜睡"等典型的青蟹呼肠孤病毒病症状。采用套式PCR检测濒死膏蟹感染青蟹呼肠孤病毒阳性率为100%,经Blastn比对扩增序列与青蟹呼肠孤病毒基因(HQ414137.1)相似度达98%,属于青蟹呼肠孤病毒(JX213634)。病毒粗提液人工回感后发现,攻毒1h,青蟹血淋巴中即可检测到青蟹呼肠孤病毒;攻毒后第4～6d,出现死亡高峰,第10d,累积死亡率达到100%。血清酶指标中碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活力明显高于对照组,而与免疫相关的过氧化物酶、超氧化物歧化酶活力低于对照组;肝胰腺、鳃和肌肉组织切片均呈现显著病理坏死损伤。青蟹呼肠孤病毒是此次拟穴青蟹膏蟹死亡的主要原因。
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- 关键词：拟穴青蟹组织病理
