国家自然科学基金(81171924)
- 作品数：6 被引量：15H指数：2
- 相关作者：温伟红杨安钢席文锦魏铭杨帆更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA下调EZH2基因对肾癌细胞系769-P增殖的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:运用小干扰RNA下调果蝇zeste基因增强子人类同源物(enhancer ofzeste homolog 2,EZH2)在肾癌细胞系769-P中的表达,明确其对肾癌细胞增殖的影响。方法:将处于对数生长期769-P细胞分为实验组(experiment group)、阴性对照组(negative group)、空白对照组(blank group),合成靶向EZH2基因的小干扰RNA片段(EZH2-siRNA)和无效序列片段后,通过脂质体介导分别转染至实理组和阴性对照组,空白对照组未做任何处理。以qRealtime-PCR检测EZH2基因mRNA水平的变化情况,以MTT法检测各组细胞增殖变化;流式细胞术(FCM)检测转染后细胞周期变化情况。结果:实理组中EZH2在mRNA表达水平明显受抑制;MTT实验中第4天始,实验组中769-P细胞的增殖能力开始受抑制,第5天时实验组细胞抑制更明显,与阴性对照组和空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA转染后实验组中G0/G1期细胞比例明显增多(81.32±3.14)%,与阴性对照组(44.13±1.52)%和空白对照组(45.71±2.32)%差异有统计学意义。结论:EZH2-siRNA可有效下调并抑制肾癌细胞769-P的增殖,EZH2在肾癌的发生、发展中发挥了重要作用,为下一步研究肾癌基因治疗提供了理论支持。
- 王国栋党亚正魏铭郑甲温伟红
- 关键词：肾细胞癌RNAIEZH2
- 实验性自身免疫性脑脊髓炎中B7-H1分子在脾脏和中枢神经系统淋巴细胞上的表达变化
- 2012年
- 目的:观察实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病高峰期淋巴细胞表面B7-H1分子的表达变化,探讨B7-H1在EAE发病和病情进展中的作用。方法:以MOG35-55诱导雌性C58BL/6小鼠制备EAE动物模型,并对其行为学变化进行记录与评分。分别于发病前和发病高峰期处死小鼠,分离脾脏与中枢神经系统中的淋巴细胞,用流式细胞术分析淋巴细胞表面B7-H1分子的表达差异。结果:与发病前相比,EAE发病高峰期脾脏分离的淋巴细胞中B7-H1阳性细胞率由(35.1±2.46)%下降至(18.9±2.06)%(P<0.01),其中CD4+T细胞中B7-H1阳性细胞由发病前的(6.4±1.25)%下降至发病后的(2.3±1.04)%(P<0.05)。中枢神经系统浸润的淋巴细胞中有8.7%为B7-H1阳性细胞。结论:在EAE发病过程中,B7-H1分子在外周淋巴细胞的阳性细胞数下降,而中枢神经系统浸润的淋巴细胞中有一定比例的B7-H1阳性细胞,提示B7-H1可能在EAE发病过程中发挥重要作用。
- 史圣甲席文锦王丽娟郭张燕王曦皇甫罗凯王国栋杨安钢温伟红
- 关键词：B7-H1EAECD4+T细胞
- 下调环指蛋白2的表达促进U87脑胶质瘤细胞凋亡并增强其放射敏感性被引量：8
- 2014年
- 目的在U87脑胶质瘤细胞中下调环指蛋白2(RNF2)的表达,观察对U87细胞生长及放射敏感性的影响。方法用含有针对RNF2基因小发夹RNA(shRNA)的表达载体转染U87细胞,利用荧光实时定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法分别在mRNA及蛋白水平验证RNF2的表达下调,用MTT法检测细胞增殖,用annexin V-FITC/PI标记结合流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期情况;经X射线照射后,用流式细胞术检测对照细胞和RNF2表达下调细胞的凋亡情况。结果 2条针对RNF2的shRNA均可有效抑制U87细胞中RNF2的表达。RNF2表达下调后,U87细胞的增殖受到显著抑制,S期细胞明显减少(shRNA-NC:27.31±1.35;shRNF2-1:16.72±2.90;shRNF2-3:10.35±1.33),G1期细胞显著增加(shRNA-NC:56.13±1.80;shRNF2-1:76.32±3.11;shRNF2-3:80.45±2.83),同时出现细胞凋亡。经X线照射后,RNF2下调的细胞凋亡率明显增加(shRNA-NC:20.88±0.64;shRNF2-1:39.69±0.57;shRNF2-3:47.82±0.45)。结论下调RNF2表达可明显抑制细胞生长,并增强U87细胞对放射的敏感性。
- 周春辉杨帆席文锦魏铭郑国旭王微杨安钢张剑宁温伟红
- 关键词：胶质瘤RNA干扰
- 含B7-H1 shRNA基因的慢病毒表达载体的制备及其抑制效果鉴定
- 2013年
- 目的设计针对B7-H1的shRNA序列,构建慢病毒表达载体,包装成病毒颗粒后检测其对U251细胞中B7-H1基因的沉默效果。方法设计3对针对B7-H1 mRNA的shRNA,化学合成正义链和反义链,退火后与酶切后的pLKO.1载体进行连接。测序正确后包装成病毒并感染U251细胞,分别用qRT-PCR及Western blot法检测干扰效果。结果 qRT-PCR及Westernblot结果证实设计的3条RNA干扰序列中有2条可有效沉默U251细胞中B7-H1的表达。结论所制备的针对B7-H1的shR-NA慢病毒能特异性沉默B7-H1。
- 皇甫罗锴王曦郭张燕席文锦史圣甲杨帆陈晓燕杨安钢张剑宁温伟红
- 关键词：B7-H1SHRNA
- 额底纵裂入路手术对鞍上第三脑室底垂体瘤的疗效分析被引量：1
- 2013年
- 目的：分析经额底纵裂入路治疗鞍上第三脑室底垂体瘤的疗效，探讨其临床适用性。方法：选择从2011年1月~2013年1月与我院行额底纵裂入路手术治疗的30例鞍上第三脑室底垂体瘤的患者，术中行单侧额或双侧额弧形切口，根据术中所见肿瘤位置，由终板、视神经一颈内动脉等存在的生理间隙处切除肿瘤，观察所有患者的手术疗效。结果：所有患者术中可见肿瘤位于鞍内鞍上，部分或全部突入第三脑室底，其中有6例患者伴有脑积水。术中肿瘤全切23例，次全切5例，大部切除2例，无手术死亡病例。术前25例患者视力减退，术后23例患者视力均获得不同程度改善，仅1例暂无明显变化。术后19例出现电解质紊乱，患者经治疗后均已纠正；12例出现不同程度的尿崩症，给予患者药物治疗后，病情得到缓解。术后随访6个月，23例肿瘤全切患者病灶无复发，另外4例次全切者病灶也无明显变化，仅1例次全切和2例大部切除患者于术后行伽马刀再次治疗。结论：经额底纵裂入路治疗鞍上第三脑室底垂体瘤可以达到视野清晰，直观下进行肿瘤切除，手术效果好，并发症较少，适合临床长期推广应用。
- 杜奇勇邓李任林强胡永光刘旭东代天均徐杨贺宇朱日磊
- 关键词：垂体瘤
- 共刺激分子B7-H1参与肿瘤免疫的研究进展被引量：4
- 2013年
- B7-H1是继B7-1和B7-2之后发现的第3个B7家族分子。B7-H1可以抑制T淋巴细胞的增殖分化,促进调节性T细胞(Treg)的分化以及抑制性细胞因子的分泌,从而抑制免疫应答。B7-H1高表达于多种肿瘤细胞表面,它可通过与肿瘤浸润淋巴细胞上的相应受体结合,诱导淋巴细胞凋亡。因此高表达于肿瘤细胞的B7-H1可能参与了肿瘤的免疫逃逸过程。B7-Hl在肿瘤组织中的表达水平和肿瘤患者的临床病理特征及预后紧密相关。此外,B7-H1也参与上皮间质转化过程,提示该分子还可能与肿瘤的发生和转移有关。通过靶向干预B7-H1通路,有望重建肿瘤浸润淋巴细胞对肿瘤的免疫应答,抑制肿瘤的生长和转移,从而达到治疗肿瘤的目的,这一策略在临床实验中也取得了不错的效果。
- 王琪杨安钢温伟红
- 关键词：B7-H1肿瘤免疫逃逸抗体治疗免疫调节
