国家自然科学基金(30371203)
- 作品数：14 被引量：106H指数：5
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- 程序性坏死阻断剂对铝致神经细胞凋亡的影响及其机制
- 2010年
- 目的 了解程序性坏死阻断剂necrostatin（Nee-1）对铝诱导的神经细胞凋亡的影响,并探讨Nec-1对Caspases凋亡通路的作用机制.方法 用4 mmol/L铝染毒神经母细胞瘤细胞株（SH-SYSY）制备铝致神经细胞死亡模型,在不同浓度铝和（或）Nec-1作用下检测细胞活力的变化,用Heochst 33342/碘丙啶（PI）双染法观察细胞的凋亡和坏死现象,Annexin V/PI双染法定量细胞的凋亡率和坏死率.用Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9酶活力的变化检测凋亡通路,用免疫细胞化学法检测核转录因子（NF-κB）和细胞色素c（Cyt-c）蛋白表达的变化.结果 随着铝染毒剂量的加大,细胞活力明显下降;但加入60 μmol/L Nec-1后,细胞活力明显增强.差异有统计学意义（P〈0.05）. Nec-1浓度的提高使细胞活力明显上升,表现了明显的促进神经细胞生长、抑制细胞死亡的作用.凋亡和坏死的荧光显微镜观察及流式细胞术定量检测结果 表明,随着铝染毒剂量的增加,神经细胞的凋亡率与坏死率明显上升,但在0～90μmol/L Nec-1作用下,Nec-1浓度越高,细胞的坏死率降低越明显,差异均有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）.同时,虽然Nec-1是程序性坏死的阻断剂,但其对凋亡率也有明显的影响,可以使染铝细胞的凋亡率明显下降,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）.对Nec-1作用后细胞的凋亡相关酶Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9活力变化检测结果 表明,Nec-1对Caspase-9活力的影响不明显,且对线粒体通路的凋亡诱导分子Cry-c的作用也不明显;但对Caspase-8活力的影响明显,表现在可以明显降低各染铝细胞的Caspase-8活力,提高NF-κB蛋白表达量和在高剂量染铝细胞中降低Caspase-3的活力.结论 Nec-1可以降低铝诱导的神经细胞凋亡,并通过死亡受体通路Caspase-8上调NF-κB表达,降低细胞凋亡率.
- 张勤丽吉秀亮郭卫力张策刘承芸牛侨
- 关键词：铝脱噬作用CASPASE类
- 细胞色素C在铝致海马神经细胞凋亡中的变化被引量：7
- 2006年
- [目的]研究细胞色素C(cytochromeC,cyt-C)在铝致海马神经细胞凋亡中的变化,为进一步研究铝致神经细胞凋亡的作用机制提供一定的资料。[方法]健康成年雄性SD大鼠40只,用随机数字表法按体重随机分为4组:生理盐水组、2.5mg/kgAl3+组、5.0mg/kgAl3+组、10.0mg/kgAl3+组。腹腔注射AlCl3溶液染毒60d后,处死,①用TUNEL法检测海马神经细胞凋亡;②Western-blot法检测海马神经细胞中cyt-C的表达情况,凝胶成像系统和扫描仪采集图像并对结果进行分析。[结果]①与对照组相比,Al3+5.0、10.0mg/kg组凋亡指数显著升高(P<0.05),Al3+5.0、10.0mg/kg组比Al3+2.5mg/kg组凋亡指数显著升高(P<0.05),Al3+10.0mg/kg组比Al3+5.0mg/kg组凋亡指数显著升高(P<0.05)。②与对照组相比,Al3+5.0、10.0mg/kg组cyt-C表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。海马神经细胞凋亡指数与cyt-C呈正相关(r=0.616,0.574,P<0.01)。[结论]铝诱导大鼠海马神经细胞凋亡可能与cyt-C释放入胞质有关。
- 张红梅王林平牛侨
- 关键词：铝元素海马神经细胞细胞凋亡细胞色素C
- 铝作用下大鼠海马神经细胞凋亡与bcl-2和bax基因转录的关系被引量：4
- 2005年
- 目的探讨铝引起大鼠海马神经细胞凋亡与bcl2、baxmRNA表达变化的关系。方法健康雄性SD大鼠40只,按体重随机分为4组:生理盐水组、Al3+2.5、5.0、10.0mgkg组。染毒60天后处死,用TUNEL法检测细胞凋亡,RTPCR法检测bcl2、baxmRNA的表达,用凝胶成像系统进行结果分析。结果与对照组相比,Al3+5.0mgkg、10.0mgkg组大鼠海马神经细胞凋亡率显著升高(P<005),而Al3+2.5mgkg组与对照组相比凋亡率升高,但差异无显著性;3个染毒组bcl2mRNA表达均显著下降(P<0.05);3个染毒组baxmRNA表达显著升高(P<0.05);海马神经细胞凋亡指数与bcl2mRNA表达呈负相关(r=-0.909,P<0.01),与baxmRNA表达呈正相关(r=0.871,P<0.01)。结论铝可以诱导大鼠海马神经细胞凋亡,其机制与bcl2mRNA表达下调,baxmRNA表达上调有关。
- 牛侨王林平陈艺兰张红梅张勤丽张玲刘慧君
- 关键词：铝海马BCL-2BAX神经细胞凋亡
- 铝对体外培养大鼠神经元线粒体的影响被引量：7
- 2005年
- 目的通过体外培养大鼠神经元细胞来探讨铝对大鼠神经元线粒体的影响。方法取新生1～3dSD大鼠脑皮质进行神经元细胞的培养,用透射电镜观察神经细胞线粒体超微结构的变化,用流式细胞仪检测神经细胞的死亡率、活性氧的生成和线粒体膜电位的改变;用MTT[3(4,5dimethylthiazolyl2)2,5diphenyltetrazolium bromide]试验来检测体外培养神经元线粒体酶的活性。结果Al3+10mgkg染铝组大鼠神经元线粒体超微结构发现,线粒体普遍肿胀,内膜嵴断裂,可见空泡形成。严重者线粒体内部结构模糊,只残留线粒体轮廓。不同剂量铝对神经元线粒体的氧化损伤结果显示,与对照组相比,Al3+100μmolL组和Al3+500μmolL组ROS生成量显著增加(P<0.01);Al3+500μmolL组细胞死亡率明显增加(P<0.01);Al3+100μmolL组和Al3+500μmolL组线粒体膜电位(MMP)明显降低(P<0.01);Al3+500μmolL组线粒体酶活力明显降低(P<0.01)。结论神经元线粒体的形态结构和功能的改变可能在铝的神经毒作用机制中发挥了重要作用。
- 张勤丽牛丕业牛侨王林平何淑嫦邬堂春
- 关键词：铝神经元线粒体
- 脂质过氧化损伤及内质网应激在铝致神经细胞凋亡中的作用机制被引量：5
- 2008年
- 目的探讨脂质过氧化损伤及内质网应激在铝致神经细胞凋亡中的作用。方法体外培养新生0～3d的大鼠神经元细胞用不同浓度氯化铝染毒。在荧光显微镜和电子显微镜下观察神经元的凋亡和内质网的形态学改变，并检测内质网的超氧化物歧化酶（SOD）活力和丙二醛（MDA）含量及ATP酶活力。结果光学显微镜和电子显微镜形态学观察发现了凋亡的典型形态学改变，电子显微镜下可观察到内质网的变形肿胀及脱颗粒现象。低剂量染毒组SOD和ATP酶的活力明显升高，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01），随染毒剂量的加大，酶活力逐渐下降；MDA含量则在低剂量染毒组[（16．42±1．50）nmol／ml]明显下降，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01），随染毒剂量的加大，MDA含量逐渐上升。结论铝能诱导神经元凋亡，内质网的脂质过氧化作用在凋亡过程中发挥了重要的调控作用。
- 张勤丽王芳石樱桃王林平张玲张红梅王静李秋营牛侨
- 关键词：铝脂质过氧化作用内质网细胞凋亡
- 细胞凋亡机制概述被引量：42
- 2007年
- 细胞凋亡是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主有序的死亡。它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等作用;它并不是病理条件下自体损伤的一种现象,而是为更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。凋亡是个井然有序的过程,大量的分子和途径参与了细胞凋亡发生。本文旨在对近几年来对细胞凋亡的最新进展中的几个活跃领域作一回顾。
- 张勤丽牛侨
- 关键词：细胞凋亡细胞色素CCASPASEBCL-2家族
- Bcl-2和Bax蛋白及基因在铝致神经细胞毒性作用中的表达被引量：5
- 2006年
- 目的通过研究Bcl-2和Bax蛋白及基因在铝致神经细胞毒性作用中的表达,以探讨铝对体外培养大鼠神经元细胞的神经毒性作用。方法用不同浓度氯化铝体外培养大鼠神经元细胞染毒,用原位缺口末端标记(TUNEL)法和扫描电镜观察检测细胞凋亡,免疫组化法测定Bcl-2和Bax蛋白含量,RT-PCR法测定Bel-2和Bax基因表达量。结果(1)TUNEL法检测DNA碎片随染铝剂量的加大而增加,扫描电镜观察到了凋亡细胞典型的出芽现象和细胞裂解及凋亡小体的释放。(2)免疫组化和RT-PCR法检测Bcl-2蛋白含量及基因表达量随染铝剂量的加大而减少(P＜0．01,r=-0．695；P＜0．05,r=-0．647),反之,Bax蛋白含量及基因表达量随染铝剂量的加大而增加(P＜0．01,r=0．676；P＜0．01,r=0．794)。Bcl-2/Bax与铝的作用剂量有关(P＜0．01,r=-0．655；P＜0．01,r=-0．777)。结论低剂量铝暴露能够诱导神经元凋亡,Bcl-2和Bax蛋白及基因表达在铝致神经细胞凋亡的过程中发挥了重要的调控作用。
- 张勤丽牛丕业石樱桃张红梅王芳张玲牛侨
- 关键词：铝神经细胞凋亡BCL-2BAX
- 铝染毒大鼠的学习记忆和氨基酸类神经递质的改变被引量：13
- 2005年
- 目的 研究铝染毒对大鼠学习记忆的影响和氨基酸类神经递质的改变。方法 以5mg.kg-1.d-1和10mg.kg-1.d-1的剂量对SD大鼠连续腹腔注射AlCl32个月,对照组给予生理盐水。采用跳台实验观察大鼠神经行为的改变,石墨炉原子吸收光谱法测定大鼠大脑皮层铝含量,采用高效液相色谱-荧光法测定氨基酸类神经递质的含量。结果 5 mg.kg-1.d-1组和10 mg.kg-1.d-1组大鼠脑皮层铝含量分别为(172.87±111.06)ng/g和(289.15±102.55)ng/g均高于生理盐水组(56.22±34.10)ng/g;跳台实验发现5mg.kg-1.d-1组和10mg.kg-1.d-1组的潜伏期分别为(35.000±36.46)s和(37.33±48.46)s比生理盐水组(172.50±107.28)s显著缩短,10 mg.kg-1.d-1组第一次错误的次数和第二次错误的次数均比对照组增多。大脑皮层谷氨酸的含量在10 mg.kg-1.d-1组比生理盐水组明显降低。大脑皮层γ-氨基丁酸的含量在10 mg.kg-1.d-1组比生理盐水组明显增加。结论染铝大鼠的大脑皮层的铝含量升高,学习记忆能力降低。这可能与染铝大鼠大脑皮层的兴奋性氨基酸含量降低,而抑制性氨基酸含量升高有关。
- 何淑嫦邵枫牛侨王生李量
- 关键词：铝染毒学习记忆氨基酸类神经递质石墨炉原子吸收光谱法
- 铝电解工人心血管自主神经系统功能的改变及相关因素分析被引量：3
- 2006年
- 目的本研究旨在评价铝接触对作业工人心血管自主神经功能的影响。方法采用EwingDJ推荐的自主神经功能测试组合对32名铝电解工人和34名正常对照工人进行了测试,测试项目共包括四项内容:ValsalvaManoeuvre心率反应(HR-V)、深呼吸时的心率变化(HR-DB)、即立心率反应(HR-IS)和即立血压反应(BP-IS)。结果铝电解工人的尿铝值(40.08±9.36μg/mg肌酐)明显高于对照组,即立时R-R变化能力Rmax:min(1.21±0.18)、即立血压反应BP-IS(6.56±4.91)均明显低于对照组。多元逐步回归分析表明年龄、接触铝的年数、饮酒、受教育年数从不同方面影响心率和血压变化。结论铝电解作业工人的心血管交感神经和副交感神经调节功能降低,心血管自主神经功能系统也是铝损害的一个靶系统。
- 李哲何淑嫦牛侨
- 关键词：心血管自主神经功能心率血压
- 铝对体外培养大鼠神经细胞凋亡的研究被引量：15
- 2007年
- 目的研究铝对体外培养大鼠神经细胞凋亡的作用。方法体外培养0-3天大鼠单纯神经元、神经胶质细胞及混合培养神经细胞,并用不同浓度AlCl3.6H2O处理,分为对照组、低、中、高剂量组（分别为0、0.5、1.0和2.0mmol/L）,做光镜观察、荧光染色及流式细胞检测。结果①在光镜下和荧光染色法观察,可以见到神经元有凋亡细胞的典型形态学改变,但在神经胶质细胞及混合培养细胞中没有观察到凋亡的典型形态学改变。②神经元的流式检测结果显示,铝可以诱导神经元凋亡,且其早期、晚期及总凋亡率与铝的作用剂量有关;而神经胶质细胞的流式检测结果在染毒剂量组中未发现凋亡率的显著升高,其凋亡率在各组间差异均无显著性;混合培养神经细胞的流式检测结果在染毒剂量组中亦有凋亡率的显著升高,但其凋亡率升高的程度远低于神经元。结论低浓度铝可诱导神经元细胞凋亡。
- 牛侨张勤丽牛丕业石樱桃张玲王芳王林平李秋营
- 关键词：铝神经细胞凋亡细胞凋亡
