国家自然科学基金(20072010)
- 作品数:5 被引量:32H指数:3
- 相关作者:罗贵民牟颖阎岗林任晓君罗元明更多>>
- 相关机构:吉林大学中国科学院遗传与发育生物学研究所解放军军需大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划吉林大学青年教师基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 单链抗体2F3表达条件的优化及其提纯和性质研究被引量:9
- 2002年
- 将构建好的单链抗体 2F3表达载体pTMF2F3ScFv转化到大肠杆菌BL2 1(DE3)。先挑选出表达量高的单克隆 ,然后让其在 37℃进行表达 ,并将表达时的培养条件进行优化。实验结果表明 :最佳诱导条件为开始诱导时的菌体密度OD590nm =1.0~ 1.8,所加异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)的浓度为 0 3~ 0 5mmol L ,诱导时间 7h ,优化后目的蛋白表达量占菌体总蛋白的 2 0 % ,并用发酵罐成功地进行了扩大培养 ,筛选了洗涤包涵体的最佳条件。采用两步法对包涵体复性进行了研究 ,用Westernblotting及ELISA法检测了所表达的单链抗体及其生物活性 。
- 罗元明牟颖魏景艳阎岗林罗贵民
- 关键词:提纯包涵体ELISA抗体酶
- 具有谷胱甘肽过氧化物酶活性的小分子模拟物2-TeCD保护线粒体抵抗氧化损伤被引量:11
- 2002年
- 首次合成了一个新的含碲化合物 2 TeCD(二碲桥联环糊精 ) ,并证实其具有谷胱甘肽过氧化物酶 (GPX)活力 ,能清除氢过氧化物 .与其它GPX模拟物相比 ,2 TeCD具有分子量小 ,水溶性好及良好的化学和生物学稳定性 ,且其GPX活力比另一种被广泛认知的小分子模拟物Ebselen高约 4 6倍 .用Fe2 + Vc诱导的线粒体损伤体系研究了 2 TeCD的抗氧化性质 ,结果发现在相同剂量下 2
- 薛雁任晓君张鲲牟颖刘俊秋曹鹏郭灿辉罗贵民沈家骢
- 关键词:谷胱甘肽过氧化物酶活性线粒体抗氧化损伤
- 一种新颖的谷胱甘肽过氧化物酶的模拟物——含硒多肽的制备及酶学性质和抗氧化实验的研究
- 谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPX,EC 1.1 1.1.9)是机体内一种重要的抗氧化含硒酶,能够通过清除过氧化氢和脂质过氧化物来保护机体免受自由基损伤。当体内谷胱甘肽过氧化物酶活力...
- 孙晔陈华张鲲郑克岩牟颖闫岗林罗贵民
- 关键词:模拟物底物特异性
- 文献传递
- 应用蛋白质工程法制备含硒单链抗体酶被引量:1
- 2001年
- 目的 制备一种具有谷胱甘肽过氧化物酬(GPX)活性的含硒单链抗体酶。方法 利用RT-PCR方 法从杂交瘤细胞株2F3中扩增出单克隆抗体重链可变区和轻链可变区基因。经DNA序列测定后,构建成表达载体 pTMF-scFv,经过金属螯合层析纯化、复性和化学诱变,得到含硒单链抗体酶。结果 将重组质粒pTMF-scFv分别转 化入大肠杆菌JM109(DE3)、BL21(DE3)和 BL21(coden plus),表达目的蛋白分别占菌体总蛋白的5%-10%、15%- 20%和 25%-30%。该重组蛋白以包涵体形式存在,相对分子质量为30000。其 GPX活性为3400U/μmol,接近天 然酌水平。结论 为工业化制备含硒单链抗体酶奠定基础。
- 牟颖高姝娟张岩苏丹苏大明任晓君由德林罗元明闫岗林罗贵民黄华梁刘子
- 关键词:包涵体谷胱甘肽过氧化物酶硒
- 依布硒的药理作用及反应机制的研究进展被引量:2
- 2004年
- 依布硒是一种小分子抗氧化剂 ,易于参加各种氧化还原反应 ,能清除机体内过多的过氧化物 ,阻断产生自由基的链式反应 ,因此可治疗多种疾病 ,维持机体的正常生理功能。长期以来 ,人们普遍认为依布硒在体内主要通过模拟谷胱甘肽过氧化物酶的反应机制发挥作用。然而 ,近来的研究表明依布硒在体内更趋向于通过硫氧还蛋白还原酶和硫氧还蛋白反应系统来发挥作用。
- 龚平生罗贵民
- 关键词:依布硒脂质过氧化谷胱甘肽过氧化物酶硫氧还蛋白还原酶硫氧还蛋白