国家自然科学基金(30960250)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
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- 酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能猪精子上的分布被引量：1
- 2010年
- 为研究猪精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在5%CO2孵箱37℃培养,以考马斯亮蓝染液染色为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布。结果显示,随着获能的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子占总精子的百分比增加,由未获能前35%增至获能1.5 h时的88%,酪氨酸磷酸化的蛋白分布变广,由精子头部扩增至精子头部、鞭毛主段和中段。
- 张旭成袁慧敏金一
- 关键词：精子获能酪氨酸磷酸化
- 猪精子获能期间蛋白质磷酸化时间依赖性的上调被引量：1
- 2010年
- 通过获能猪精子酪氨酸磷酸化蛋白分离和表达,来确定精子获能的最佳状态。将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在体积分数为5%CO2孵箱37℃培养,以考马斯亮蓝染液染色的方法来评价精子获能状态,经过SDS-PAGE分离后,进行Western免疫印迹分析,检测获能猪精子间酪氨酸磷酸化蛋白的分布。有27,47 ku的2种蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中27 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平自精子体外培养后呈递增趋势,而47 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平在精子培养1.5 h时最高,后呈递减趋势,1.5 h时获能状态最佳。
- 张旭成袁慧敏金一
- 关键词：酪氨酸磷酸化精子获能SDS-PAGE电泳
- 获能和冻融猪精子前顶体蛋白活化机制研究被引量：2
- 2012年
- 利用SDS-PAGE和Western Blotting的方法,分析冻融和获能处理中猪精子前顶体蛋白的转化过程。结果表明,显示获能组精子荧光区域大于冻融组精子,而小于新鲜精子组;新鲜组精子出现大约45和35kDa分子量的条带,而冻融和获能组精子都同时出现大约45、35和28kDa分子量的条带。总之,冻融后顶体完整的精子和获能精子Proarosin都能正常活化成α-acrosin、β-acrosin和28kDa,这个途径可作为预测受精的指标。
- 李大吉史文姝金一
- 关键词：猪精子冻融获能
- 温度和保存时间对猪精子顶体酶活性的影响被引量：9
- 2010年
- 为了探讨温度和液相保存时间对猪精子顶体酶活性的影响,采用紫外分光光度计检测猪精子顶体酶活性。结果显示:(1)鲜精、冷休克和热休克每106精子顶体酶活性分别为5.38、5.20和5.16 mIU,差异不显著(P>0.05)。(2)鲜精在4、17、25、30、37和39℃时每106精子顶体酶活性分别为4.29、5.01、5.03、5.17、4.78和4.61 mIU,随着温度的升高精子顶体酶活性逐渐提高,当温度达到30℃时达到最高,且4℃和30℃时差异显著(P<0.05)。(3)液相精液在4℃保存超过1 d时精子顶体蛋白酶活性显著下降(P<0.05);在17、25和39℃保存超过2 d时顶体酶活性显著下降(P<0.05),且在17℃保存效果较好。结论是猪精子顶体蛋白酶活性受温度的影响,在17℃的条件下3 d内保存的猪精子顶体酶活性最佳。
- 朴海仙金一韩明铭
- 关键词：猪精子温度顶体酶活性
