国家自然科学基金(81070499)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：关林波董丽群于萍周淑更多>>
- 相关机构：教育部四川大学更多>>
- 发文基金：四川省科技厅科技支撑计划项目四川省应用基础研究计划项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 原代人绒毛滋养层细胞分离培养及其对巨细胞病毒的易感性研究被引量：2
- 2012年
- 目的通过分离培养原代人绒毛滋养层细胞(HTCs)并检测其对人巨细胞病毒(HCMV)的易感性,探讨胎儿宫内感染HCMV的可能途径。方法将30例健康孕妇经负压真空吸引手术所得的流产早孕绒毛组织充分剪碎,用0.25%胰蛋白酶和0.2%DNA酶混合消化法制备细胞悬液,细胞悬液经200目不锈钢筛网过滤后用Percoll液密度梯度离心对HTCs进行初步纯化,细胞传代中应用反复胰酶消化法对HTC进行3～5次纯化,通过细胞学形态观察和免疫荧光染色方法对HTCs进行鉴定;用HCMV病毒株体外感染HTCs,应用PCR、Westernblot和免疫荧光方法对HCMV基因及蛋白进行检测,从而确定HTCs对HCMV的易感性。结果 Percoll分离联合胰酶、DNA酶消化法对原代HTCs有较好的分离效果,免疫荧光染色结果表明90%以上细胞表达CK-7相关抗原,HTCs体外感染HCMV 72h后形态学发生明显改变,病毒基因及蛋白均呈阳性表达。结论原代HTCs对HCMV易感,通过HTCs感染胎儿可能是HCMV宫内感染的重要传播途径之一。
- 周淑董丽群关林波于萍
- 关键词：人巨细胞病毒
