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胰蛋白酶诱导人脐静脉内皮细胞分泌内皮素-1: 2014年; 目的:探讨胰蛋白酶对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌内皮素(ET)-1的影响。方法:分离、培养HUVECs,细胞免疫荧光技术检测内皮细胞表达蛋白酶活化受体(PAR)-2。内皮细胞生长添加物和肝素培养体系培养HUVECs,激活剂为胰蛋白酶和丝-亮-异亮-甘-赖-缬(SLIGKV-NH2),ELISA检测细胞上清中ET-1水平。结果:FITC标记的抗人PAR-2抗体染色细胞的荧光主要存在于细胞周边及突起处,说明HUVECs表达PAR-2。随着胰蛋白酶和SLIGKV-NH2浓度升高(与单纯细胞培养液比,P<0.05),HUVECs分泌ET-1的水平也相应升高。两种刺激剂诱导的ET-1水平正相关。α1-抗胰蛋白酶、大豆胰蛋白酶抑制剂和PAR-2抑制肽显著抑制胰蛋白酶或SLIGKV-NH2诱导的ET-1释放。结论:胰蛋白酶很可能通过PAR-2促进内皮细胞分泌ET-1。; 陈少英林洁莲龚文广牛青霞; 关键词：人脐静脉内皮细胞内皮素-1

刀豆蛋白A诱导人脐静脉内皮细胞表达p-ERK1/2: 2014年; 目的：探讨刀豆蛋白A （Concanavalin A，ConA）对CRL2480细胞（人脐静脉内皮细胞系）细胞外调节蛋白激酶（Extracellular signal-regulated kinase，ERK）1/2磷酸化的影响。方法采用MTT法检测ConA对CRL2480细胞活化的影响；采用Western印迹法检测CRL2480细胞磷酸化（p）-ERK1/2的表达；采用细胞免疫荧光技术检测p-ERK1/2在细胞内的分布。结果在5~20μg/ml范围，ConA刺激CRL2480细胞8 h的活化指数具有剂量依赖性；20μg/ml ConA显著增加CRL2480细胞的活化（P〈0.05）。ConA能够增加CRL2480细胞的p-ERK1/2表达水平（P〈0.05），ERK途径抑制剂PD98059和U0126明显抑制p-ERK1/2表达。免疫荧光染色结果显示ConA刺激细胞的荧光信号明显高于对照细胞，荧光分布于细胞浆、细胞核周围和细胞核内。结论 ConA能够激活CRL2480细胞表达p-ERK1/2。; 龚文广王红梅牛青霞; 关键词：刀豆球蛋白A 内皮细胞细胞外调节蛋白激酶

人白细胞介素-36α蛋白的二级结构及其B细胞抗原表位的预测: 2014年; 目的预测并分析人白细胞介素-36α蛋白的二级结构及其潜在的B细胞抗原表位。方法以人IL-36α蛋白的氨基酸序列为基础，采用生物信息软件和互联网服务器预测人IL-36α蛋白的二级结构及其亲水性、可及性和柔韧性，根据预测结果综合分析IL-36α蛋白可能的B细胞抗原表位。结果IL-36α蛋白潜在的B细胞抗原表位位于N端8～12、33～38、111～116和143～149氨基酸区段。结论预测了IL-36α蛋白的二级结构和B细胞抗原表位，为进一步研究IL-36α的生物学活性部位及利用合成肽制备抗IL-36α的多克隆抗体提供了理论依据。; 陈少英郑坚牛青霞; 关键词：生物信息学表位

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国家自然科学基金(81072941)