河南省医学科技攻关计划项目(200703071)
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
- 相关作者：郭小兵阎志勇张钦宪张志坚高晓群更多>>
- 相关机构：郑州大学郑州大学第一附属医院郑州大学第三附属医院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶原核表达载体的构建及其抗药活性分析被引量：2
- 2009年
- 目的分析头孢噻肟—水解酶-14(CTX-M-14)型超广谱β-内酰胺酶(ESBL)型菌抗药活性,为临床治疗提供参考。方法收集分离产ESBL大肠埃希菌46株,采用PCR克隆目的基因,采用基因重组技术构建pET28a-CTX-M-14质粒,采用BL21大肠埃希菌作为宿主菌进行表达,采用液体稀释法检测其抗药活性。结果PCR扩增条带在约900bp位置处,序列分析结果显示其与目的基因符合;转化子对青霉素类、头孢一、二代及三代中头孢噻肟、头孢曲松耐药,对庆大霉素、四环素、喹诺酮类药物、碳青酶烯类敏感;对头孢他啶体外试验敏感,对加有酶抑制剂的抗生素稳定敏感。结论本研究成功构建了CTX-M-14型ESBL原核表达载体,且具有广泛抗药活性;此为临床合理选择治疗药物提供了理论依据。
- 郭小兵张志坚阎志勇张钦宪
- 关键词：聚合酶链式反应
- 产ESBL大肠埃希菌质粒谱与耐药性分析被引量：2
- 2008年
- 目的：探讨产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）大肠埃希菌质粒谱与耐药性的关系.方法：收集产ESBL大肠埃希菌100株,采用质粒提取试剂盒小量抽提质粒,琼脂糖凝胶电泳观察质粒条带,采用E-test试验检测最小抑菌浓度（MIC）,结果按照美国临床与实验室标准化协会（CLSI）规定标准执行.结果：所有菌株均含有1～5条质粒条带不等,分子质量大小依次约为21000,9000,7000,3000,2500bp.相同质粒条带菌株的质粒在电泳时条带分布一致.不同质粒条带的菌株均对青霉素类、头孢一、二代及三代中头孢噻肟、头孢曲松耐药（MIC≥256mg/L）,对头孢他啶表现为体外试验敏感（MIC≤4mg/L）,对四代头孢菌素头孢吡肟表现不一（MIC值分别为32,48,48,16,64mg/L）.对阿米卡星、亚胺培南对碳青酶烯类抗菌素稳定敏感（MIC分别为≤12,0.25mg/L）.各组间均P〉0.5/0.9,表明对抗菌药物耐药性无差异.结论：产ESBLs大肠埃希菌质粒谱的类别和数量与耐药性相关性不大.
- 张志坚郭小兵张钦宪
- 关键词：内酰胺酶类质粒
- CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶的表达、定位及其抗药活性分析被引量：3
- 2009年
- 目的:体外表达CTX-M-38型超广谱β-内酰胺酶(ESBL),并明确表达产物的分布及其抗药活性。方法:收集2006—2007年分离的产ESBL大肠埃希菌46株,采用PCR技术克隆目的基因,基因重组技术构建pET28a-CTX-M-38质粒,用BL21大肠杆菌作为宿主菌进行表达,测定培养基上清及菌体裂解液酶活性检测所表达ESBL的分布;采用液体稀释法检测所表达ESBL抗药活性。结果:PCR扩增条带约在900bp位置处;测序结果与预测CTX-M-38相一致;菌体裂解液抗药活性较强;转化子对青霉素类、头孢一代、二代及多数三代药物均耐药;对碳青酶烯类药物稳定敏感;对头孢他啶及氨曲南体外敏感;对酶抑制剂除哌拉西林/他唑巴坦敏感外,其余表现为耐药;对庆大霉素、美满霉素、环丙沙星及左氧氟沙星亦具有耐药性。结论:CTX-M-38型ESBL表达成功,表达产物主要分布于表达菌体内,具有广泛抗药活性。
- 郭小兵张志坚阎志勇张钦宪
- 关键词：Β内酰胺酶类临床对照试验
- 郑州地区大肠埃希菌中CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的基因型分布被引量：4
- 2009年
- 目的了解郑州地区CTX-M型ESBLs在大肠埃希菌中的基因型分布。方法收集郑州大学第一、三附属医院2006-2007年临床分离产ESBLs不重复大肠埃希菌138株,小量提取菌株质粒,依据CTX-M型ESBLs基因同源性分析结果,设计4对简并引物,采用各对引物对所提质粒进行PCR扩增,阳性扩增产物纯化后直接测序,测序结果与blaCTX-M比对后明确流行型别。结果138株产ESBLs大肠埃希菌中共检出CTX-M型ESBLs80株,具有单一CTX-M型别者53株,同时具有两种CTX-M型别者25株,3种CTX-M型别者2株;CTX-M型ESBLs中,CTX-M-1(43株)、CTX-M-14(56株)、CTX-M-25(7株)及CTX-M-38(5株)。结论郑州地区大肠埃希菌CTX-M型ESBLs以CTX-M14型为主,且同一菌株可有多种CTX-M酶型。
- 张志坚郭小兵阎志勇张钦宪
- 关键词：CTX-M超广谱Β-内酰胺酶
- 大肠埃希菌中OXA型超广谱β-内酰胺酶基因分布被引量：2
- 2008年
- 目的了解郑州地区OXA型ESBLs在大肠埃希菌中基因分布状况。方法收集郑州大学第一附属医院和河南省人民医院2006年1月至2007年10月临床分离产ESBLs大肠埃希菌108株,采用聚合酶链反应(PCR)扩增0XA型ESBLs基因全长序列,采用DNA脱氧核酸测序确定基因型别。结果108株产ESBLs菌株中8株携带OXA型ESBLs基因,测序结果显示8株均为OXA-1型。结论郑州地区大肠埃希菌OXA型ESBLs以OXA-1型为主。
- 周明莉阎志勇郭小兵
- 关键词：OXAESBLS
- 郑州地区ESBLs基因型分布研究被引量：3
- 2008年
- 目的明确ESBLs在郑州地区的基因型分布。方法收集78株临床分离产ESBLs革兰阴性杆菌,混合后提取总质粒作为模版,用特异性引物进行PCR扩增。结果显示TEM、SHV、OXA1、OXA20、CTX-M1、CTX-M14和CTX-M25的泳道有阳性条带。结论郑州地区目前已有TEM、SHV、OXA和CTX-M四种亚型的ESBLs流行。
- 阎志勇高晓群郭小兵
- 关键词：ESBLSTEMSHVCTX-MOXA基因型
