黑龙江省博士后基金(2009LRB06-294)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:田霖丽刘鸣陈伟刚郑周红任敬远更多>>
- 相关机构:哈尔滨医科大学附属第二医院吉林省肿瘤医院齐齐哈尔市第一医院更多>>
- 发文基金:黑龙江省博士后基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 反义microRNA-21慢病毒表达载体的构建及对喉癌细胞的增殖抑制作用被引量:1
- 2012年
- 目的:克隆反义微小RNA hsa-miR-21并构建其慢病毒表达载体,观察反义寡核苷酸重组慢病毒(ASO-miR-21)对喉癌细胞增殖的调控作用。方法:针对hsa-miR-21核苷酸序列,设计并合成mir-21反义寡核苷酸,将pGCSIL-GFP Vector经双酶切后连接产生pGCSIL-GFP-miR-21慢病毒表达载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。pGC-LV-miR-21、pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒共转染细胞293T,包装慢病毒。以293T细胞绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达水平测定病毒滴度。采用MTT法及克隆形成实验检测反义miR-21(ASO-miR-21)重组慢病毒对喉癌细胞增殖能力的影响。结果:成功构建反义hsa-miR-21的慢病毒表达载体,采用ASO-miR-21抑制喉癌细胞内高水平表达miR-21的活性后,可显著抑制喉癌细胞增殖。结论:成功构建反义miR-21的慢病毒表达载体,ASO-miR-21可以明显抑制喉癌细胞增殖。
- 任敬远赵晓东朱丹陈伟刚郑周红刘鸣田霖丽孙亚男
- 关键词:MIR-21慢病毒喉鳞癌反义寡核苷酸