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国家教育部博士点基金(20122325120022)
作品数:
2
被引量:4
H指数:1
相关作者:
梁婉婷
刘丽波
李春
祁昕
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相关机构:
东北农业大学
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发文基金:
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相关领域:
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东北农业大学
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李春
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刘丽波
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梁婉婷
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高效液相色谱法(HPLC)测定保加利亚乳杆菌胞内Acetyl-CoA
被引量:4
2013年
建立了一种快速测定保加利亚乳杆菌胞内Acetyl—CoA含量的HPLC分析方法。以C18(HypersilODS25μm)色谱柱为固定相,以缓冲液A(0.2mol/麟酸钠,pH=5)和缓冲液B(800mL0.25m01/I磷酸钠,pH=5和200mL乙腈的混合物)为流动相,梯度洗脱,流速为1mE]min,柱温25℃,采用紫外检测器(254nm)进行检测。结果表明:该方法可以在17rain内实现EAcetyl—CoA与其他物质完全分离和定量,Acetyl—CoA在0.011-0.359μmol/mL范围内的线性关系良好,回归方程线性相关系数R2=0.9995,检出限(以信噪比(S/N)为3计)为0.28mg/L,定量限(r2S/N为10计)为0.32mg/L。该方法用于保加利亚乳杆菌胞内Acetyl—CoA含量的测定,相对标准偏差(n=6)为0.75%,重现性良好,三个水平的加标回收率为94.8%~103.3%,该方法适用于保加利亚乳杆菌胞内Acetyl—CoA快速、高效分离和定量。
李培照
李春
梁婉婷
刘丽波
关键词:
高效液相色谱
保加利亚乳杆菌
ACETYL-COA
NaCl刺激保加利亚乳杆菌对丙酮酸代谢及相关酶活性的影响
2014年
分析NaCl刺激保加利亚乳杆菌与冻干存活率的关系。高效液相色谱法分析葡萄糖、有机酸、乙酰辅酶A(Acetyl-CoA)以及胞内能量代谢变化;顶空气相色谱法测定乙醛含量;分光光度法和比色法测定关键酶活性。结果显示:NaCl刺激保加利亚乳杆菌对丙酮酸的代谢有显著影响,葡萄糖代谢速率提高48.18%(P<0.01),乳酸生成速率提高8.93%(P<0.01),关键中间代谢产物Acetyl-CoA的含量增加约31.35%(P<0.01);而乙酸含量出现负增长,乙醛生成速率降低22.86%(P<0.05)。胞内ATP代谢变化明显促进糖代谢速率;乳酸脱氢酶、乙酸激酶、磷酸乙酰转移酶的活性均有增加,而乙醛脱氢酶活性减弱。结果表明,NaCl刺激保加利亚乳杆菌对自身糖代谢的加快,丙酮酸代谢碳流向的重新分配以及关键酶活性的改变,可能与提高保加利亚乳杆菌的冻干存活率相关。
李培照
孙金威
刘丽波
梁婉婷
祁昕
李春
关键词:
保加利亚乳杆菌
能量代谢
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