国家教育部博士点基金(20124404110011)
- 作品数：9 被引量：45H指数：4
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- 象草PAL基因克隆及其蛋白质结构与功能预测被引量：9
- 2016年
- 苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物木质素生物合成途径中的关键酶,参与木质素、类黄酮和花青素等次生代谢产物的形成。本研究以‘N51’象草(Pennisetum purpureum)为材料,通过同源克隆、3′RACE和hi-Tail PCR的方法,对PAL基因进行克隆,得到PpPALcDNA序列2429bp以及DNA序列全长3907bp。PpPAL编码的蛋白包含720个氨基酸,具有典型的GTITASGDLVPLSYIAG苯丙氨酸解氨酶保守活性基序。运用生物信息学进行分析,PpPAL基因cDNA序列与玉米(Zea mays L.)ZmPAL的相似性最高为94%,与其他禾本科植物也有着较高的相似性。在氨基酸序列系统进化分析中,PpPAL与ZmPAL遗传距离最近,并与其他禾本科植物PAL聚为一类。PpPAL蛋白的三维结构模型显示,PpPAL蛋白具有典型的"海马状"结构,表明PpPAL是典型的苯丙氨酸解氨酶家族,对木质素的合成起着重要的作用。
- 陈卫卫唐然吴昱煜李菲张向前解新明
- 关键词：象草木质素苯丙氨酸解氨酶生物信息学
- 禾本科植物原生质体分离研究进展被引量：10
- 2015年
- 利用原生质体可以方便快捷地对植物进行遗传改良和细胞生理生化特性研究。为了给禾本科植物原生质体分离体系的建立提供理论依据,推动禾本科植物原生质体的研究应用,对制备禾本科植物原生质体的材料选择、材料的预处理、分离方法及条件和纯化方式等方面的研究进展进行详细的阐述,分析了影响禾本科植物原生质体分离效果的有关因素,并对禾本科植物原生质体分离所存在的问题提出建议及对其研究应用进行展望。
- 彭小群唐然解新明
- 关键词：禾本科植物原生质体
- 利用观赏植物物候预测草坪杂草发生被引量：4
- 2016年
- 杂草影响草坪美观,还会使草坪丧失功能,防治杂草的关键是要掌握杂草的发生时间,但由于草坪杂草植株矮小,生育期短导致其不易辨认及观察。本研究以探究常见观赏植物物候与杂草爆发之间的对应关系为前提,自2012年11月至2014年4月间,采用样线样方结合的方法调查了广州地区草坪杂草发生情况,以及常见观赏植物的物候特点。结果显示:样地中,杂草群落具有类似的分布模式,以多年生杂草为主,一年生杂草次之,二年生杂草最少;与草坪草具有相似生活型或具有类似的生物学特性的杂草,容易在环境选择过程中被保留下来,成为主要杂草;夏季是杂草爆发的高峰时期。木棉(Bombax malabaricum)初花期可以预测白花蛇舌草的(Hedyotis diffusa)爆发;猫尾木(Dolichandrone cauda-felina)初花期可以预测红花酢浆草(Oxalis corymbosa)、黄花酢浆草(Oxalis pes-caprae)、黄鹌菜(Youngia japonica)爆发;杜英(Elaeocarpus decipiens)盛花期、葱兰(Pouzolzia zeylanica)盛花期可以预测雾水葛(Pouzolzia zeylanica)的2个爆发期等。
- 刘佳琦曾影夏莹陈子雯解新明
- 关键词：草坪观赏植物物候杂草发生
- 华南象草PpCAD基因的亚细胞定位及其在转基因烟草中的异源表达被引量：2
- 2015年
- 该研究根据已克隆的华南象草(Pennisetum purpureum cv.Huanan)肉桂醇脱氢酶(CAD)基因PpCAD的cDNA序列,构建亚细胞定位载体pAN580-PpCAD,用PEG介导法转化象草原生质体,以探究PpCAD蛋白在细胞内的定位;同时构建植物过表达载体pBA002-PpCAD,通过农杆菌介导法在烟草中异源表达,以研究PpCAD基因与植物木质素合成的关系。结果显示:(1)PpCAD定位在象草原生质体的细胞质内;(2)过表达载体pBA002-PpCAD转化烟草后获得27株转基因烟草,其中25株PCR鉴定为阳性;(3)半定量RT-PCR检测6株转基因烟草后发现,PpCAD基因在不同植株的表达量存在差异,通过Southern杂交检测后发现该差异与目的基因插入的拷贝数有关;(4)6株转基因烟草和野生型烟草表型上没有明显差异,除目的基因多拷贝插入的植株OEC6外,木质素含量有不同程度的提高,最高比野生型提高了56.50%。研究表明,PpCAD是一个细胞质蛋白,在烟草中过表达PpCAD能够提高植株木质素含量,表明PpCAD基因参与了植物的木质素合成,可用于象草的木质素调控研究。
- 唐然张博雅彭小群张向前江院解新明
- 关键词：木质素亚细胞定位烟草
- 沟叶结缕草草坪杂草群落的时空动态被引量：4
- 2014年
- 杂草群落结构的异质性是群落动态的主要属性.基于物种频度和幂函数法则,对沟叶结缕草草坪杂草群落在时间维度上的物种结构和空间异质性的变化进行了研究.结果表明:从2007到2009年,沟叶结缕草草坪3年共发生杂草43种,隶属19科,其中,禾本科、菊科、莎草科和茜草科杂草在草坪杂草中占据优势,多年生杂草占杂草比例最大,并呈逐年上升趋势;杂草群落具有比随机分布更高的空间异质性;杂草优势种年内随季节变化明显,表现出"双子叶杂草-单子叶杂草-双子叶杂草"、"多年生杂草-一年生杂草-多年生杂草"交替出现的规律;杂草群落的空间异质性在夏季大于冬季,多样性和均匀性在夏秋季大于冬春季,在夏季表现出高异质性的杂草种类比其他季节多;杂草群落空间异质性、多样性年际间变化不显著,均匀性呈逐年降低趋势.
- 刘佳琦李有涵曾影解新明
- 关键词：沟叶结缕草草坪杂草群落空间异质性
- 牧草化感作用应用的研究进展被引量：6
- 2013年
- 化感作用是植物普遍存在的一种化学防御机制,它对于植物的生长发育以及生存竞争有着重要意义。为了有效解决农业生产和生态平衡中出现的问题,本研究总结了牧草化感作用在杂草控制、混合种植、生物入侵、生态恢复4个方面的应用,归纳了杂草化感作用在各应用中的研究进展、应用方式及当前所存在的问题。对于牧草化感作用今后的研究,提出了将室内探究与田间实验相结合、客观分析环境条件在化感作用中的地位、深入探究化感物质作用机理等建议。
- 曾影夏莹陈子雯郑建花张娇娇解新明
- 关键词：牧草化感作用
- 华南象草原生质体分离及基因瞬时表达研究被引量：4
- 2015年
- 以华南象草(Pennisetum purpureum)幼叶鞘为材料,采用L_(16)(4~5)正交试验设计,对分离原生质体过程中的纤维素酶浓度、离析酶浓度、酶解液pH、甘露醇浓度、酶解时间5个因素进行筛选,建立了高效的象草叶鞘原生质体分离体系,并进行目标基因的瞬时转化,以期为象草基因功能研究奠定基础。结果表明:叶鞘在含有1.5%纤维素酶R-10,0.75%离析酶R-10,0.5 mol·L^(-1)甘露醇,pH为5.8的酶解液中酶解4 h,原生质体产量达5.11×10~6个·g FW^(-1),活力达91.08%,酶解时间对象草原生质体产量和活力的影响最大。用PEG介导法将2个分别带有绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的载体转入原生质体中,转化效率最高可达77.47%,共转化效率为8.79%。所分离的原生质体可用于基因的瞬时表达研究。
- 唐然彭小群解新明
- 关键词：象草原生质体
- 象草PpCCR基因正、反义表达载体的构建及对烟草的转化被引量：3
- 2015年
- 象草(Pennisetum purpureum)是一种广泛种植于热带和亚热带地区的多年生资源植物,但其木质素含量过高,影响了对其的开发与利用。为探讨肉桂酰辅酶A还原酶(Cinnamoyl-Co A Reductase,CCR)基因对木质素合成的影响,本研究以华南象草为材料,构建了CCR基因正反义表达载体,并利用农杆菌侵染法转化烟草。通过Wiesner和Maule染色法对转基因植株进行木质素的组织化学染色。结果发现,转基因植株的木质素单体组成并没有明显改变;但Pp CCR过表达烟草,转基因株系木质化细胞增多;Pp CCR反义表达烟草,转基因株系木质化细胞排列相对松散。同时反义表达CCR,在木质素含量下降最明显的植株中茎秆呈红褐色。上述结果表明,CCR对木质素的合成起重要作用,这为进一步对象草进行遗传改良奠定了基础。
- 彭小群张博雅刘洁雯王亚解新明
- 关键词：象草烟草
- 华南象草Pp4CL基因的克隆及其转基因烟草木质素含量分析被引量：7
- 2015年
- 为探究华南象草(Pennisetum purpureumcv.Huanan)木质素合成关键酶基因的调控机制,通过同源克隆得到华南象草4-香豆酸:CoA连接酶基因(Pp4CL)的cDNA序列,长度为1 943bp,其中编码区序列1 662bp。Pp4CL蛋白由553个氨基酸组成,分子量为59.57kD,等电点为5.2,属于疏水性蛋白。该蛋白含有AMP结合结构域,属于AFD ClassⅠ超家族。在系统进化分析中,Pp4CL与At4CL1、Os4CL1遗传距离最近,聚为一支。Pp4CL氨基酸序列具有SSGTGLPKGV和GEICIRG等2个保守基序,是典型的植物4CL。构建原核表达载体pGEX-4CL,得到约88kD的Pp4CL-GST融合蛋白,为Pp4CL酶活性测定及Western免疫印迹分析奠定了基础。同时构建植物表达载体pBA-4CL,并通过叶盘法对烟草进行了遗传转化,得到3个转基因阳性株系(OX-9、OX-7、OX-4),它们中叶柄木质素总含量分别比非转基因植株(对照)提高了10.0%、16.2%和94.6%,茎秆基部节木质素总含量分别比对照提高了0.9%、4.0%和13.5%。研究结果表明,Pp4CL蛋白与木质素合成有关,过表达Pp4CL基因能够显著提高植株木质素含量。该研究结果为华南象草木质素改良工作打下了基础,同时也为深入开展牧草分子育种提供了依据。
- 钟天秀李有涵李菲彭小群柯善文陈曙解新明
- 关键词：木质素转基因烟草
