云南省教育厅科研基金(07Z10035)
- 作品数:2 被引量:5H指数:2
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- 一种新铁炮百合花瓣总RNA的提取方法被引量:2
- 2009年
- 本研究以新铁炮百合花瓣为材料,采用非异硫氰酸胍提取法、一步快速热酚抽提法、Trizol试剂法、天为时代植物RNA抽提试剂盒法、Trizol试剂法与天为时代的植物RNA抽提试剂盒相结合的改良法,提取花瓣总RNA。结果表明:Trizol试剂法与天为时代的植物RNA提试剂盒相结合的改良法是一种经济、有效的新铁炮百合花瓣总RNA的提取方法,能有效地抑制酚类物质、多糖等次生代谢产物对RNA的影响,可从新铁炮百合花瓣中获得质量高、完整性好的总RNA。提取的RNA经紫外光谱分析表明:A260/A280比值为1.722,电泳检测到28SRNA、18SRNA清晰的条带。反转录后双链cDNA的分子量大小分布区间介于0.1~5.0kb之间,符合植物基因cDNA的长度范围,可满足下一步的分子实验。
- 和凤美朱永平王博
- 关键词:新铁炮百合RNA提取方法花瓣
- 东方百合“元帅”查尔酮合酶基因表达载体构建被引量:3
- 2010年
- 利用Genbank中公布的东方百合"元帅"查尔酮合酶cDNA序列,从东方百合"元帅"花瓣中扩增CHS1的cDNA开放阅读框,正向插入植物表达载体pBI121,并采用液氮冻融法将其转化到根癌农杆菌EHA105中。结果表明:经酶切和菌液PCR分析鉴定,获得与预期大小相符的1 200 bp片段,得到含有目的片段表达载体pBI121-CHS1的农杆菌菌株,可用于新铁炮百合的遗传转化。
- 和凤美朱永平
- 关键词:百合CHS基因