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绵羊重组PrP~c蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定: 本研究将纯化的绵羊重组蛋白PrP(23—256),免疫Balb/c小鼠,经细胞融合和2～3次克隆,用间接ELISA方法筛选出两株能够稳定分泌抗prion蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D11和2G1,Western blo...; 周向梅梁芳王志刚乔俊文赵德明; 关键词：绵羊单克隆抗体 WESTERN-BLOT; 文献传递

大熊猫与牦牛和奶牛朊病毒蛋白全基因序列分析: 朊病毒疾病是人和动物的一系列神经退化性疾病,迄今为止,国内外尚未见大熊猫、牦牛的PRNP及奶牛PRNP多态性报道。从分子水平上研究动物对朊病毒疾病的遗传易感性,进而为采取有效的预防措施提供理论依据十分必要。根据已报道的哺...; 杨建民赵德明李宁马李颖郝永新秦秀慧张磊; 关键词：大熊猫牦牛奶牛朊病毒; 文献传递

实时荧光定量PCR检测PrP基因表达标准品质粒和标准曲线的构建被引量：14: 2005年; 对金黄地鼠PrP基因序列进行分析,选择其高度保守区域设计引物,对金黄地鼠各组织提取mRNA,经RTPCR扩增,产物纯化后与pGEM-T-easy连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选后得到重组标准品质粒,对重组标准品质粒进行酶切、PCR和测序鉴定,表明PrP基因保守区段已经成功克隆.将107～102拷贝/反应的重组标准品质粒进行荧光定量PCR,10次重复Ct值平均分别为17.50±0.5、21.38±0.2、25.29±0.7、29.12±0.7、31.34±0.4、33.89±0.1,系统自动分析软件显示Ct值与标准品浓度的对数之间存在良好的线性关系,回归系数为0.998.对动力学曲线分析表明,在该反应体系和反应条件下,该标准曲线的灵敏度为102拷贝/反应.荧光PCR PrP基因表达检测标准品质粒和标准曲线的建立,为检测PrP基因的组织特异性表达和动物传染性海绵状脑病发生的分子机理奠定了基础.; 宁章勇赵德明杨建民崔亚利孟丽平吴长德秦秀慧马李颖; 关键词：实时荧光定量PCR 重组质粒

我国重大动物疫病防控策略的分析被引量：21: 2006年; 近年来,国际国内动物疫病频繁爆发,暴露出我国重大动物疫病防控体系中存在的问题,而目前我国在重大动物疫病上仍实行严格的保密制度,极不利于我国重大动物疫病的科学技术研究、防控体系建设和国际合作与交流,严重影响了公众对动物疫病的正确认识。本文在全面分析国内外重大动物疫病防控现状的基础上,指出了亟待解决的一系列问题,提出了如下建议:①建立健全国家重大动物疫情的防控体系。成立国家动物疫病专家咨询机构;建立健全防疫体系;充分发挥大专院校的作用,建立健全技术支持体系。②借鉴国外防疫先进经验,适时公开疫情。③完善法律体系。要解决我国现有法律法规中的配套问题;要解决法律法规涵盖不全,职责不清问题;要加强人才队伍建设,提高执法人员的素质。④建立完善防疫补偿机制。; 赵德明; 关键词：动物疫病

骡朊病毒基因克隆与序列分析: 2008年; 张太翔田国华田国宁张金玲韩亮张丽萍赵德明; 关键词：传染性海绵状脑病慢性消耗性疾病朊病毒牛海绵状脑病克雅氏病

实验动物恒河猴朊病毒基因分析: 目的通过对航天医学研究飞船应急返回高过载模拟试验中所用实验动物恒河猴进行朊病毒基因诊断和分析,了解实验动物的朊病毒疾病易感性,进而为该试验所用实验动物质量提供背景资料和朊病毒的检测数据。方法根据已报道的猴朊病毒基因序列设...; 杨建民赵德明阚广捍李宁郝永新李莹辉吴斌; 关键词：实验动物恒河猴朊病毒基因分析; 文献传递

小脑颗粒神经元细胞模型材料制备被引量：3: 2005年; 小脑颗粒神经元是动物传染性海绵状脑病发生、发展过程中的主要反应性细胞之一,小脑颗粒神经元的体外分离、纯化和鉴定是建立动物传染性海绵状脑病细胞作用模型的关键步骤。根据大鼠小脑颗粒神经元的生存特性,按照抑制筛选的原理,对小脑颗粒神经元进行了体外分离和培养,经神经元特异性的烯醇化酶(NSE)免疫组织化学染色,表明体外培养的小脑颗粒神经元细胞纯度较高,可以用于细胞作用模型的建立。; 宁章勇赵德明杨建民崔亚利郝永新秦秀慧马李颖; 关键词：小脑颗粒神经元

一步法RT-PCR快速检测口蹄疫O型病毒被引量：1: 2007年; 周向梅赵德明孙艳明杨建民马李颖; 关键词：PCR快速检测病毒分离口蹄疫血清学试验 PCR技术

大鼠大脑皮质星形胶质细胞体外分离培养和纯化被引量：1: 2005年; 宁章勇赵德明杨建民崔亚利周向梅秦秀慧; 关键词：星形胶质细胞体外分离培养分子作用机制原代培养免疫组织体外分离

绵羊重组PrP~c蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定: 本研究将纯化的绵羊重组蛋白PrP(23-256),免疫Balb／c小鼠,经细胞融合和 2～3次克隆,用间接ELISA方法筛选出两株能够稳定分泌抗prion蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D11和2G1,Western bl...; 周向梅梁芳王志刚乔俊文赵德明; 关键词：绵羊单克隆抗体 WESTERN-BLOT; 文献传递

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