国家自然科学基金(81070531)
- 作品数:3 被引量:66H指数:2
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 小鼠生精相关基因pQE/Dnajb13重组载体的构建和蛋白表达被引量:2
- 2013年
- 目的利用分子克隆技术构建重组表达载体pQE/Dnajb13,在大肠埃希菌中高效表达、鉴定并纯化。方法应用RT-PCR技术,以小鼠睾丸cDNA文库为模板扩增Dnajb13基因全长开放阅读框,将其连接到pQE载体后测序鉴定;将重组质粒转入宿主菌E.coli M15,经IPTG诱导表达His/Dnajb13融合蛋白,Ni2+亲和层析纯化融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting对融合蛋白进行分析和鉴定。结果成功构建了pQE/Dnajb13重组质粒,测序结果与预期一致;转化重组质粒的E.coli M15经IPTG 37℃诱导4 h后高效表达His/Dnajb13融合蛋白。结论成功进行了pQE/Dnajb13重组质粒的构建和重组蛋白的表达,为Dnajb13基因的功能研究奠定了基础。
- 朱莉刘刚
- 关键词:蛋白表达精子发生
- 大鼠生精相关基因TSARG1原核表达载体的构建和表达
- 2011年
- 目的构建大鼠生精相关基因pGEX-KG/TSARG1重组载体并进行原核表达。方法应用RT-PCR技术从大鼠睾丸组织mRNA中扩增TSARG1的开放阅读框(ORF),T-A克隆后将TSARG1插入到原核表达载体pGEX-KG中,经测序鉴定后将重组质粒转入宿主菌E.coliBL21,IPTG诱导表达GST/TSARG1融合蛋白。结果成功构建pGEX-KG/TSARG1重组质粒;转化重组质粒的E.coli BL21经IPTG 37℃诱导高效表达GST/TSARG1融合蛋白。结论 pGEX-KG/TSARG1原核表达载体的成功构建为进一步研究TSARG1的生物学功能奠定了基础。
- 张懿刘刚
- 关键词:基因克隆蛋白表达精子发生
- 16835例中国不育男性的精液质量分析被引量:64
- 2014年
- 目的:通过精液常规检查评价大样本量的不育男性的生育能力,为男性不育症的临床治疗和疗效观察提供科学依据。方法:收集16 835例不育男性的精液标本,以1 567例精子库候选供精者精液标本作为普通人群对照组,采用计算机辅助精液分析技术(computer assisted sperm analysis,CASA)进行精液常规检测并对结果进行统计学分析。结果:不育患者精液异常主要表现为弱精症。不育组无精症、弱精症、少弱精症患者比例高于对照组,不育组少精症患者比例低于对照组(P<0.001)。结论:弱精症、无精症、少弱精症与不育相关,而单纯少精症不一定与不育相关。
- 李维娜朱文兵唐章明刘刚
- 关键词:不育弱精症少精症无精症少弱精症