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国家自然科学基金(30671358)

作品数:10 被引量:23H指数:2
相关作者:李华平阮小蕾陈秀刘福秀何云蔚更多>>
相关机构:华南农业大学中山大学海南出入境检验检疫局更多>>
发文基金:国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项广东省自然科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 10篇期刊文章
  • 4篇会议论文

领域

  • 11篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 10篇香蕉
  • 8篇香蕉线条病毒
  • 6篇基因
  • 4篇原核表达
  • 2篇抗体
  • 2篇抗体制备
  • 2篇抗血清
  • 2篇抗血清制备
  • 2篇扩增
  • 2篇基因序列
  • 2篇基因组
  • 2篇功能域
  • 2篇分离物
  • 2篇复制酶
  • 2篇ORF
  • 2篇PCR扩增
  • 1篇蛋白
  • 1篇衣壳
  • 1篇衣壳蛋白
  • 1篇遗传进化

机构

  • 13篇华南农业大学
  • 1篇中山大学
  • 1篇海南出入境检...

作者

  • 13篇阮小蕾
  • 13篇李华平
  • 9篇陈秀
  • 6篇何云蔚
  • 6篇刘福秀
  • 4篇赵芹
  • 2篇饶雪琴
  • 1篇沈文锦
  • 1篇李照业
  • 1篇谢丽君
  • 1篇马丽娟

传媒

  • 2篇华中农业大学...
  • 2篇华南农业大学...
  • 2篇中国植物病理...
  • 1篇中国农业科学
  • 1篇科学通报
  • 1篇湖南农业大学...
  • 1篇植物病理学报
  • 1篇园艺学报
  • 1篇Scienc...

年份

  • 1篇2014
  • 1篇2013
  • 2篇2010
  • 6篇2009
  • 2篇2008
  • 2篇2007
10 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
香蕉线条病毒广东分离物基因组序列测定和特征分析
<正>由香蕉线条病毒(Banana streak virus,BSV)引致的香蕉线条病毒病在中国大陆首次由费继锋等(2001) 发现并报道,饶雪琴等(2005)利用 PCR 检测法在华南地区不同香蕉种芽中检测出 BSV ...
谢丽君何云蔚陈秀赵芹阮小蕾李华平
关键词:基因组序列PCR扩增病害防治
文献传递
香蕉线条病毒ORFⅡ基因的原核表达及抗体制备被引量:2
2009年
ORFⅡ gene of Banana streak virus GuangDong isolate(BSV-GD) was amplified from a BSV-GD recombinant plasmid by PCR,and the gene was expressed by being cloned into prokaryote expression vector pET-28b(+).The fusion protein was about 16.5 kDa in size and was soluble with SDS-PAGE analysis.The purified protein was obtained by using the histidine labeling kit of N-terminus of protein.The antiserum was obtained by immunizing healthy rabbits with the purified protein.Western blot and ELISA analysis showed that the special antiserum of BSV possessed high titer,which was tested as 1∶51 200.The study was a base for further research on BSV including ORFⅡ gene function and virus detection.
何云蔚陈秀阮小蕾刘福秀李华平
关键词:香蕉生产抗体制备原核表达ORF
香蕉线条病毒衣壳蛋白功能域基因的原核表达及抗血清制备被引量:2
2013年
制备香蕉线条病毒广东分离物(BSV-GD)的抗血清,可为BSV-GD的快速检测和进一步研究BSV编码蛋白的功能提供条件。通过常规分子生物学方法,克隆了BSV-GD衣壳蛋白(Coatprotein,CP)功能域基因,构建了该基因的原核表达载体pET28b.CP,并诱导表达了大小约为46.5kD的融合蛋白His-CP。可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在。利用His标签纯化试剂盒对目的蛋白进行纯化、回收,获得了高纯度的融合蛋白。以纯化的融合蛋白为抗原免疫健康大耳白兔,成功制各了BSV-GDcP功能域基因编码蛋白的兔抗血清。Western.blotting分析表明该抗血清具有很强的特异性,间接ELISA法检测抗血清效价达204800倍以上,对植物材料的合适检测浓度为1:1600~1:6400。
陈秀饶雪琴阮小蕾刘福秀李华平
关键词:香蕉香蕉线条病毒原核表达
水稻瘤矮病毒基因组第11片段编码一个RNA沉默抑制子被引量:2
2008年
水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)是中国及东南亚国家水稻上的一个重要病原,但有关RGDV与植物细胞互作的分子机制仍不清楚.本研究利用农杆菌共渗透的方法鉴定了RGDV基因组S11片段编码蛋白Pns11在转GFP(green fluorescent protein)基因本生烟纯合系(Nicotiana benthamiana line16c)中的抑制子活性.在该系统中,Pns11能抑制由GFP正义RNA介导的局部和系统沉默,并能灭活RNA沉默信号或阻断沉默信号的移动.体外表达Pns11能增强马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)在本生烟上的致病性.该抑制子在局部和系统沉默抑制实验中能降低siRNA的累积,但不能完全消除其存在.结果表明,Pns11干扰了RNA沉默途径的起始阶段.
刘福秀赵芹阮小蕾何云蔚李华平
关键词:基因沉默抑制子
香蕉线条病毒侵染性克隆的构建
本文根据香蕉线条病毒广东分离物的基因组序列设计引物,分别克隆了病毒基因组第6404~779bp和4784~2300bp两段序列,分别命名为BSV-A,BSV-T。将BSV-A和试验室先前克隆的BSV-17(包含第5133...
何云蔚阮小蕾陈秀刘福秀李华平
关键词:香蕉线条病毒侵染性克隆重组质粒基因序列
香蕉线条病毒MP功能域基因的克隆、原核表达及抗血清制备被引量:2
2014年
[目的]制备香蕉线条病毒广东分离物( BSV-GD) MP功能域基因编码蛋白的多克隆抗血清,为BSV基因编码蛋白功能的研究提供条件.[方法]对BSV-GD ORF3基因氨基酸序列进行生物信息学分析,得出MP功能域基因序列,克隆该基因并插入载体pET-28b(+)构建原核表达载体,经IPTG诱导表达后,采用超声波裂解法进行蛋白可溶性分析,利用组氨酸标签纯化试剂盒对目的融合蛋白进行纯化和回收,然后以纯化的目的蛋白为抗原免疫健康家兔制备其多克隆抗血清;通过Western-blot分析该抗血清的特异性,间接ELISA法检测该抗血清的效价.[结果和结论]MP功能域基因在ORF3中的序列为61~311 aa处,核酸序列长753 bp.试验克隆了该基因并成功构建了其原核表达载体pET28b-MP,经IPTG诱导1 h后表达了相对分子质量约为30800的融合蛋白6His· MP.可溶性分析表明该融合蛋白以包涵体形式存在,纯化获得了高纯度的目的融合蛋白,以其为抗原成功制备了BSV-GD MP功能域基因编码蛋白的多克隆抗血清;分析表明该抗血清具有很强的特异性,其效价高达204800倍以上.
陈秀饶雪琴阮小蕾李华平
关键词:香蕉线条病毒原核表达抗血清
香蕉束顶病毒基因附加组分的克隆及序列分析被引量:1
2010年
采用PCR的方法分别克隆了香蕉束顶病毒(BBTV)广东分离物NS株系和NSP株系的附加组分,将之命名为BT-NS和BT-NSP。序列分析发现,2个附加组分基因全长均为1 094 nt,其核苷酸的同源率为97.3%,编码氨基酸的同源率为98.4%;与BBTV台湾分离物附加组分S1、S2和越南分离物附加组分S3相比,BT-NS/NSP与S1的氨基酸序列相似率最高,与S2的相似率最低。每一附加组分的ORF均含有推导的与脱氧核苷酸结合的基序,具有潜在的复制酶活性。通过对BBTV编码复制酶基因组分的进化树分析发现,BT-NS/NSP与BBTV台湾附加组分S1的亲缘关系最近,与广东分离物NSP株系DNA组分1的亲缘关系较远。
阮小蕾李海辉李华平
关键词:香蕉束顶病毒
富贵竹中杆状DNA病毒湖北分离物的分子鉴定被引量:2
2009年
【目的】证明湖北发病富贵竹上是否存在杆状DNA病毒属(Badnavirus)病毒,分析来自富贵竹及其它作物Badnavirus病毒不同分离物间的分子差异。【方法】通过分段克隆测序的方法获得湖北富贵竹中Badnavirus病毒基因组全序列,利用BLAST工具及其它生物学软件进行序列分析。【结果】富贵竹Badnavirus病毒湖北分离物基因组为环状结构,全长7522bp;基因组正链包含7个ORFs,推测其编码蛋白的分子量分别为17.58、14.93、214.77、11.86、11.31、16.12和11.00kD。获得的基因组与福建富贵竹斑驳病毒(Dracaenamottlevirus,DrMV)大小仅相差9个核苷酸,两者基因组核苷酸序列一致率为99.7%,ORFs1~3编码氨基酸序列的一致率分别为99.3%、100%、99.2%,而与其它已报道的14种Badnavirus病毒分离物间的核苷酸全序列一致率为32.0%~44.0%。【结论】叶片表现褪绿斑驳等症状的湖北富贵竹中存在Badnavirus病毒,该病毒与DrMV为同种病毒,已报道的富贵竹中Badnavirus病毒分离物间分子差异非常小,这与已报道的其它作物中Badnavirus病毒不同分离物间存在非常大的分子差异不同。
陈秀阮小蕾赵芹李华平
关键词:富贵竹分子鉴定
Suppressor of RNA silencing encoded by Rice gall dwarf virus genome segment 11被引量:8
2008年
Rice gall dwarf virus(RGDV)is an important rice pathogen in China and Southeast Asia.However,little is known about the molecular mechanisms of RGDV interactions with plant cells.Here,we have identi-fied an RGDV protein,Pns11,which acts as a suppressor of RNA silencing in coinfiltration assays with the reporter,green fluorescent protein(GFP)in transgenic Nicotiana benthamiana line 16c carrying GFP.Pns11 suppressed local and systemic silencing induced by sense RNA.The spread of mobile RNA si-lencing signals was blocked or inactivated by Pns11.Expression of Pns11 also enhanced Potato virus X pathogenicity in N.benthamiana.This suppressor could reduce,but not eliminate,siRNA in the local and systemic RNA silencing suppression assays,suggesting that Pns11 functions by interfering with initial stages of RNA silencing.
LIU FuXiuZHAO QinRUAN XiaoLeiHE YunWeiLI HuaPing
关键词:抑制物基因片段
香蕉线条病毒编码蛋白的互作研究
本文在获得BSV-GD基因组全序列的基础上,将BSV-GD基因组的ORF1,ORF2和ORF3的运动蛋白(MP)、衣壳蛋白(CP),PR,RT/RH功能域序列分别构建至诱饵载体pGBKT7和猎物载体pGADT7上,分别转...
陈秀李照业阮小蕾李华平
关键词:香蕉线条病毒菌株筛选编码蛋白基因序列
共2页<12>
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