国家高技术研究发展计划(2006AA10A113) 作品数:25 被引量:178 H指数:9 相关作者: 刘胜毅 黄军艳 董彩华 陈锦清 官春云 更多>> 相关机构: 中国农业科学院油料作物研究所 湖南农业大学 浙江省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 哲学宗教 更多>>
白菜型油菜BrDAD1基因的克隆及其植物反义载体的构建 被引量:1 2010年 应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了白菜型油菜BrDAD1基因及自身的启动子基因Pro-DAD1,并将其分别克隆到pMD18-Tvector载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了该基因及启动子全序列。结果表明,该基因及启动子全长分别为1 270 bp与1 335 bp。将白菜型油菜BrDAD1基因反向克隆到植物表达载体pCambia 1300的自身启动子基因Pro-DAD1启动子下游,构建了该基因的植物反义表达载体pCamDAD1。 吴晓梅 朴学成 陈明训 王中关键词:油菜 启动子 反义表达载体 Isolation of the Flanking Sequences Adjacent to Transgenic T-DNA in Brassica napus Genome by an Improved Inverse PCR Method 被引量:2 2010年 [Objective] The research aimed to isolate flanking sequences adjacent to the transgenic T-DNA in Brassica napus by an improved inverse PCR method.[Method] Using single clone of transgenic FS4 in Brassica napus as the research materials,total DNA was extracted from transgenic Brassica napus by using modified CTAB method.After enzyme digestion and purification,self-joining was made.Two circles of nested PCR and the sequence alignment were carried out.[Result] A fragement with the size of 4.0 kb was amplified ... 杨坤 吴学龙 朗春秀 陈锦清甘蓝型油菜Bn19070的表达与同源基因At2g19070的amiRNAi研究 被引量:6 2011年 基于原芯片杂交结果,油菜杂合双显性雄性核不育系差异表达基因Bn19070与拟南芥At2g19070基因高度同源,在油菜可育株雄蕊中高量表达,不育株雄蕊中表达量极低。从雄性不育基因At2g19070入手,利用amiR-NAi(人工微RNA干扰)技术对其两个RNA区段分别设计靶标,转化拟南芥。在多个转基因拟南芥植株和后代中普遍观察到小孢子数量减少、成熟花粉萎缩失去活力、不结实或者少结实的不育表型。两个靶标的干扰使转基因拟南芥出现了类似的表型,基因表达抑制率都在90%以上,干扰效果好,暗示amiRNAi技术在靶标选择上具有一定的灵活性。At2g19070基因的干扰对Bn19070的功能研究有借鉴作用。 李振波 王琢玉 刘学群 覃瑞 黄军艳 董彩华 刘胜毅关键词:雄性不育 拟南芥 甘蓝型油菜温敏核不育材料104S的发现及遗传特性分析 被引量:7 2009年 104S是一个从自交系99104植株群体中发现的油菜新型温敏核不育材料.育性调查表明,104S的育性变化与现有已育成的温敏核不育系湘油402S具有相似的规律性,但其花器形态与后者有所不同,为一种较大花瓣的温敏核不育材料.遗传分析结果表明,104S的育性受1对隐性不育基因和1对主效及若干微效温敏基因共同控制.104S的不育基因与湘油402S中的不育基因为非等位基因,而且两者的温敏基因只对其相对应的不育基因起调控作用,而对其他不育基因不起作用. 邬贤梦 肖钢 官春云关键词:甘蓝型油菜 温敏核不育 花器形态 利用基因芯片技术研究甘蓝型油菜油酸合成中差异表达基因 被引量:8 2010年 采用基因芯片技术对甘蓝型油菜高油酸(71.71%)和低油酸(55.6%)材料进行分析,探索油酸的差异表达基因。结果检测到差异表达基因562个,其中上调表达基因194个,下调表达基因368个。以基因芯片中油菜上调基因NM_100489和下调基因NM_130183为材料,用实时荧光定量方法验证基因芯片的结果,二者完全相符。根据基因芯片的实验结果,采用Go注释系统和数据库查询对562个差异表达基因进行功能注释表明,主要为各种酶类、结合功能、转录调控、代谢等,还有的功能未知或与糖代谢及脂肪酸合成相关,其中丙酮酸激酶、果糖二磷酸、酰基传递/酰基ACP硫脂酶、作用于酯键的水解酶、Δ9硬脂酰-乙酰载体蛋白去饱和酶(ADS1)、Δ9酰基-油脂减饱和酶2(ADS2)、ω-3脂肪酸减饱和酶(fad3)等被鉴定为差异表达基因。 官梅 李栒 官春云关键词:基因芯片 油菜 油酸 差异表达基因 油菜抗菌肽基因的生物信息学分析 本研究利用生物信息学方法对油菜ESTs(expressed sequence tags,ESTs)数据库中596,361条EST序列进行了分析。经过对EST序列的预处理、拼接和对抗菌肽数据库比对,我们已经初步鉴定了油菜中... 柯涛 毛晗 董彩华 郭学兰 黄思良 刘胜毅关键词:油菜 抗菌肽 生物信息学 文献传递 油菜(Brassica napus)油酸性状的遗传规律研究 被引量:6 2009年 以高油酸油菜品系04—863(油酸含量80.5%)与低油酸油菜品系湘油15号自交系04-1020(油酸含量62.7%)为材料,通过杂交获E、R代和回交一代,研究了油菜油酸性状的遗传规律.结果表明:1)油菜油酸性状属数量性状.呈连续变异.很难明确分组;2)杂种一代表现为两亲本的中间类型,但受母本的影响较大,当以高油酸品系04—863为母本时,E代的油酸含量(X^-=73.41)分布倾向高油酸亲本,相反,若以低油酸湘油15号自交系04—1020为母本,E代油酸含量(X=67.75)分布则倾向低油酸亲本;3)对环境条件变化比较敏感,亲代(P1、P2)或一代都存在着由于环境条件差异而引起的表型差异.F2代广泛分离既有基因型分离的差异,又有环境引起的表型差异.度量这种差异分别以方差和标准差来表示离开平均数的变异程度,在各世代中以F2的方差和标准差最大.分别为V=52.81,S=7-28;4)各代变异的次数分布大体上符合正态分布,即极端类型个体少,中间类型多:5)支配油菜油酸性状的基因数为一对主基因符合孟德尔的3:1分离规律,其回交比例为1:1,油酸性状的遗传力为69%~71%,是由于遗传差异引起的,另31%~29%则是由于环境差异引起的.说明数量性状与质量性状的区分是相对的. 官梅 李栒关键词:油酸 甘蓝型油菜BnERF50的超表达增强了转基因拟南芥对核盘菌的抗性 被引量:2 2011年 从接种核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)后的甘蓝型油菜品种中双9号cDNA芯片中筛选出一个新的抗性相关基因BnERF50。序列分析表明该基因产物BnERF50蛋白含有一个典型的ERF(乙烯相应转录因子)保守结构域,属于ERF家族成员。接种核盘菌24h后,该基因的表达量被诱导显著上调。在它的超表达转基因拟南芥中,病原相关蛋白(PR)防御素基因PDF1.2和几丁质酶基因ChiB的表达量升高,对腐生营养型真菌核盘菌的抗性显著增强。 汪承刚 李丹 许李明 董彩华 黄军艳 方菊萍 刘胜毅关键词:核盘菌 油菜抗菌肽基因的生物信息学分析 究利用生物信息学方法对油菜ESTs(expressed sequence tags,ESTs)数据库中596,361条EST序列进行了分析.经过对EST序列的预处理、拼接和对抗菌肽数据库比对,我们已经初步鉴定了油菜中近1... 柯涛 毛晗 董彩华 郭学兰 黄思良 刘胜毅关键词:油菜 抗菌肽 生物信息学 特殊脂肪酸生物合成的基因工程研究进展 2007年 脂肪酸是生物体的重要组成成分,对维持生物体的正常生命活动具有重要功能。在一些动植物或微生物中存在一些特殊脂肪酸,主要包括以下两类:一是通常在鱼油和海底微生物中发现的长链多不饱和脂肪酸,在医药保健业有重要应用价值;二是通常包含有羟基、环氧基或炔键等功能基团的脂肪酸,为重要的工业原料。本文综述了近年来几种特殊脂肪酸生物合成的基因工程研究进展。 陈亮 宋丽英 徐香玲 李集临 胡赞民关键词:长链多不饱和脂肪酸