公共文化服务平台

共 4 条记录，以下是 1-4

全选清除导出

排序方式：

毛冠鹿种内异染色质变化与染色体多态被引量：3: 2006年; 采用原代和传代培养方法对8头毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)的皮肤细胞进行了染色体研究,发现了一种核型与以前所报道的几种核型不一致,确定为一新核型。在该核型中,染色体众数2n=47,2条X染色体异型,一条为端着丝粒,另一条为近端着丝粒。C-带显示该核型中异染色质除了分布在2条X染色体长臂中之外,在第一对大的端着丝粒染色体中的一条近着丝粒区出现一异染色质“柄”。结合C-带及薄层扫描结果对毛冠鹿种内常染色体、性染色体中异染色质的含量和分布与染色体多态的关系进行了探讨。; 粘伟红庞宏张锡然曹祥荣刘伟王强; 关键词：异染色质核型薄层扫描

毛冠鹿睾丸组织cDNA文库的构建及P1精蛋白基因的克隆被引量：4: 2006年; 为构建毛冠鹿睾丸组织cDNA文库,用TRIzol试剂提取总RNA,利用SMART(switchingmechanismat5’endofRNAtranscript)技术合成cDNA第1链,双链cDNA经LDPCR(LongdistancePCR)扩增并经sfiⅠ酶切和过柱分级分离后,克隆入经sfiI酶切的λTrip1EX2载体,经体外包装而成cDNA原始文库。该毛冠鹿睾丸组织cDNA原始文库含有独立克隆数为5.52×105,重组率达90.8%。文库扩增后,滴度达1.05×109pfu/ml,插入cDNA平均长度为1.01kb。通过随机挑取噬菌斑,并克隆测序,从该文库中克隆了毛冠鹿睾丸组织特异表达基因:P1精蛋白基因(GenBank序列号:DQ299383),该cDNA具有5’和3’非编码区,从第95至250个核苷酸为一完整阅读框(ORF),此阅读框编码一个51Aa的P1精蛋白。以上结果表明本文构建的毛冠鹿睾丸组织cDNA文库符合建库要求,可作为进一步克隆毛冠鹿睾丸组织特异表达基因的可靠材料。; 张文汤文文庞宏曹祥荣戴君勇张锡然徐春茂王强胡均; 关键词：毛冠鹿睾丸 CDNA文库

毛冠鹿大脑组织全长cDNA文库构建被引量：2: 2006年; 运用SMART技术构建了毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)大脑组织全长cDNA文库。提取大脑组织总RNA,Oligotex mRNA Kit纯化、获得poly(A)+RNA,以CDSⅢ/3′PCR引物进行逆转录,LD-PCR扩增获得全长双链cDNA,经SfiⅠ酶切及柱层析分离后,500 bp以上的片段与载体λTripIEx2连接,体外包装得到cDNA文库。经鉴定原始文库滴度为5.1×105pfu/ml,扩增后文库滴度为1.5×109pfu/ml,重组率达到85%以上,插入片断平均长度约为1.0 kb,说明构建文库质量符合要求,可用于大脑特异表达基因的筛选。从该文库中克隆到了rig基因全长,包含5′和3′非编码区,从第43至477个核苷酸为一完整阅读框(ORF),此阅读框可编码一个145氨基酸的rig蛋白。; 汤文文张文曹祥荣张锡然徐春茂王强胡均; 关键词：毛冠鹿大脑 CDNA文库 SMART技术

大规模筛选表达序列标签(ESTs)方法的改进被引量：2: 2007年; 介绍一种改进的大规模ESTs筛选的方法。以SMARTTM cDNA Library Construction Kit所构建的毛冠鹿大脑cDNA文库为研究材料,基于该文库噬菌体可自发转化为质粒的特点,直接把噬菌体文库转化为质粒文库。随机选取平板中转化后的质粒cDNA文库克隆,振荡培养后运用菌液电泳的方法代替传统的PCR筛选法,对重组克隆进行筛选。改进的菌液电泳法可以准确鉴定出重组的质粒,并估计出插入片段的大小。该方法能更好地保持SMARTTM cDNA Library Construction Kit所构建文库的完整性,是一种简单、高效、适用于大规模表达序列标签筛选的有效方法。; 刘伟邵菁庞宏张锡然曹祥荣; 关键词：CDNA文库表达序列标签

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(30370789)