国家自然科学基金(81070605)
- 作品数：7 被引量：18H指数：3
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- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院上海交通大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞隔离共培养后向尿路上皮样细胞分化被引量：6
- 2012年
- 目的研究人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞体外隔离共培养后向尿路上皮样细胞转化的可行性。方法从人抽脂术后脂肪组织中提取脂肪干细胞,同时从猪膀胱中获取尿路上皮细胞,两种细胞体外培养扩增后,通过"Trans-well"体系进行体外隔离共培养3周。倒置显微镜下观察脂肪干细胞形态变化。RT-RCP鉴定诱导后人脂肪干细胞中尿路上皮特异性标记Uroplakin-Ⅱ在基因水平的表达,免疫荧光鉴定AE1/AE3和Uroplakin-Ⅱ在蛋白水平的表达情况。结果人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞体外隔离共培养3周后,倒置显微镜可见细胞折光性变强,细胞触角缩短,依然保持良好的增殖状态,但未见典型的尿路上皮细胞"铺路石样"改变。免疫荧光发现AE1/AE3和Uroplakin-Ⅱ均有表达,RT-PCR检测发现Uroplakin-Ⅱ基因表达阳性。结论人脂肪干细胞与猪尿路上皮细胞隔离共培养后,可以表达成熟尿路上皮特异性标记,说明脂肪干细胞可以向尿路上皮样细胞分化。
- 张明周哲周娟彭御冰王忠卢慕峻
- 关键词：脂肪干细胞尿路上皮细胞
- 人脂肪来源干细胞与聚己内酯/壳聚糖支架的生物相容性研究被引量：4
- 2013年
- 目的观察人脂肪来源干细胞(Human adipose derived stem cells,hADSCs)在聚己内酯/壳聚糖[Poly(ε-capro-lactone)/chitosan,PCL/CS]支架中的生长情况。方法取PCL/CS浸提液培养hADSCs,CCK-8法检测细胞活力,评价支架细胞毒性。hADSCs传代扩增后,接种到PCL/CS支架上,体外培养1周、2周,裸鼠体内培养2周,HE染色观察细胞在支架上的生长情况,免疫组化HLA-Ⅰ监测经裸鼠体内培养后复合支架上细胞的种属来源。结果 hADSCs在PCL/CS浸提液中可保持较高的增殖率,PCL/CS浸提液无细胞毒性。hADSCs终止于PCL/CS支架后,经过体外、内培养,hADSCs均能长入支架的空隙内,且体内培养比体外培养有更多的细胞长入支架。体外培养1周,已有细胞黏附生长在PCL/CS支架的边缘,体外培养2周后,部分细胞渗透到材料内部。体内培养2周后,大量细胞能渗透到材料内部,同时HLA-Ⅰ抗体检测发现,支架材料内部分细胞HLA-Ⅰ阳性表达,说明PCL/CS支架内该部分的细胞来源于hADSCs。结论 PCL/CS支架安全无毒,hADSCs能在PCL/CS支架上较好生长,该支架可用于组织工程膀胱的研究。
- 周哲吴稼晟张明赵阳周娟李伟王忠孙康卢慕峻
- 关键词：聚己内酯壳聚糖
- 干细胞在组织工程膀胱修复中的应用被引量：3
- 2011年
- 利用干细胞进行膀胱缺损修复是近年来组织工程膀胱研究的一项热点。干细胞具有自我更新和多向分化的潜能，是组织工程膀胱修复的理想种子细胞。本文分别就利用胚胎干细胞和成体干细胞作为种子细胞，进行膀胱缺损组织工程修复进行综述。
- 张明卢慕峻王忠
- 关键词：干细胞膀胱
- 胶原海绵支架体外构建组织工程膀胱黏膜被引量：3
- 2012年
- 背景:组织工程膀胱黏膜层的构建在组织工程膀胱修复中占有重要的地位,但目前并没有最合理的构建方法。目的:探讨胶原海绵支架复合猪膀胱尿路上皮细胞体外构建膀胱黏膜结构的可行性。方法:刮取猪膀胱黏膜层后用酶消化方式进行猪膀胱尿路上皮细胞原代培养,并进行尿路上皮细胞标志物免疫荧光和RT-PCR鉴定。制备疏松多孔的胶原海绵支架材料,将第3代尿路上皮细胞接种在胶原海绵支架上,体外培养4～8d后观察尿路上皮细胞和胶原海绵材料的复合情况。结果与结论:原代培养的猪膀胱尿路上皮细胞呈"多角形"、"铺路石"样,以克隆团形式生长。免疫荧光鉴定AE1/AE3阳性,RT-RCR检测uroplakin-ⅠA、uroplakin-Ⅱ阳性。胶原海绵复合尿路上皮细胞体外培养4～8d后,细胞在胶原海绵支架上生长良好,覆盖胶原材料的表面并长入材料内部,保持了尿路上皮细胞的特性。体外培养6d时,尿路上皮细胞与胶原支架复合效果最好,同时细胞数量也最多。结果初步表明了胶原海绵复合膀胱尿路上皮细胞可以构建组织工程膀胱黏膜,且体外培养6d为最佳时间点。
- 张明徐明曦吴稼晟李伟孙康王忠周哲卢慕峻
- 关键词：膀胱黏膜胶原尿路上皮细胞
- 人脂肪来源干细胞与胶原支架共培养的实验研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察评价人脂肪来源干细胞(Human adipose derived stem cells,hADSCs)在胶原支架中的生长情况,为进一步体内组织修复研究提供依据。方法取人抽脂术后脂肪,经胶原酶解、过滤、离心获得hADSCs,代传代扩增后,接种到胶原支架上。细胞-材料复合物分别体外培养1周、2周,裸鼠体内培养2周、4周后,HE染色观察细胞在支架上的生长情况,免疫组化HLA-Ⅰ检测经裸鼠体内培养后的复合物上的细胞的种属来源。结果原代培养的hADSCs呈"梭形"或"成纤维细胞"样,并以克隆团形式生长。免疫荧光Vimentin染色阳性。第3代hADSCs经流式细胞鉴定,CD29、CD44、CD105表达阳性,CD45、CD34表达阴性。胶原支架复合hADSCs经过体外、体内培养,hADSCs均能长入胶原支架的空隙内,且体内培养比体外培养有更多的细胞长入支架。体外培养1周,已有细胞粘附生长在胶原支架的边缘,体外培养2周后,更多的细胞渗透到材料内部。体内培养2周后,大量细胞占据材料的边缘,有部分细胞能渗透到材料内部甚至材料全层。体内培养4周后,大量细胞渗透支架全层。HLA-Ⅰ抗体检测发现,支架材料内部细胞阳性表达,说明胶原支架内部的细胞来源于hADSCs。结论胶原支架与hADSCs具有较好的相容性,可作为hADSCs的载体材料,用于组织工程缺损修复的研究。
- 徐明曦周哲张明吴稼晟李伟孙康王忠赵阳卢慕峻
- 关键词：脂肪来源干细胞胶原
- 人永生化尿路上皮细胞系与胶原支架共培养的实验研究
- 2014年
- 目的观察评价人永生化尿路上皮细胞系(immortalized human bladder urothelium cell line)SVHUC-1在胶原支架中的生长情况,为进一步体内组织修复研究提供依据。方法制备疏松多孔的胶原支架材料,SV-HUC-1传代扩增后,接种在胶原支架上,体外培养7 d后取材,观察SV-HUC-1和胶原的复合情况。结果 SV-HUC-1呈"多角形"、"铺路石"样,以克隆团形式生长。HE染色显示胶原支架上的SV-HUC-1经过体外培养7 d后即可形成沿支架表面排列的复层上皮结构,大量SV-HUC-1渗透到胶原的空隙内。扫描电镜显示细胞材料复合良好。结论 SV-HUC-1能在胶原支架上较好的生长,胶原可以作为理想的支架材料,进一步用于组织工程膀胱修复的研究。
- 周哲赵阳吴稼晟张明李伟孙康王忠卢慕峻
- 关键词：尿路上皮细胞胶原
- 组织工程支架材料在膀胱修复中的应用进展被引量：1
- 2013年
- 组织工程技术为膀胱的修复与重建开辟了一条崭新的途径。近年来,利用组织工程技术进行膀胱修复重建的实验和临床研究逐年增加。支架材料作为组织工程膀胱修复重建的关键部分,受到了极大的关注。本文就组织工程膀胱构建中支架材料的研究进展进行综述。
- 赵阳张明王忠卢慕峻
- 关键词：膀胱
