吉林省科技厅科研基金(200804423)
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 相关作者：马英智王悦周延民苏学今朱喆更多>>
- 相关机构：空军航空大学吉林大学吉林大学口腔医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 富血小板血浆对体外培养条件下人真皮成纤维细胞增殖能力的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:探讨富血小板血浆(PRP)对人真皮成纤维细胞(hDFbs)在体外培养条件下增殖能力的影响,探讨PRP促进皮肤、黏膜伤口愈合的机制。方法:PRP和hDFbs来源于健康成年人,两次离心法制备PRP,倒置相差显微镜观察0、12.5%、25.0%、50.0%和100.0%PRP浓度作用下hDFbs的增殖;免疫细胞化学检测50.0%浓度不同剂量PRP作用下细胞血小板源性生长因子(PDGF)的表达;荧光染色技术观察PRP作用下hDFbs在纯钛材料表面的生长;流式细胞术检测PRP培养后不同时间hDFbs细胞周期;CCK-8法检测不同浓度PRP培养条件下细胞增殖活力。结果:倒置相差显微镜下见PRP各浓度组细胞数量均多于对照组,细胞数量增加、折光性增强;免疫细胞化学检测,30μL PRP组PDGF表达量最高且细胞密度最大,但10μL PRP组累积吸光度值(IOD)高于20μL PRP组(836.27±21.15 vs 794.35±30.26,P<0.05);荧光染色技术观察,PRP组材料表面hDFbs细胞密集,数量较对照组高;细胞周期检测,PRP促进细胞进入S期进行DNA复制,PRP作用后第2天PRP组S期细胞百分比高于空白组(34.41%vs 22.00%,P<0.05),第8天PRP组G0/G1期细胞百分比高于空白组(95.07%vs 89.70%,P<0.05);CCK-8测定细胞增殖活性,100.0%PRP组吸光度A450值高于12.5%PRP组(34.41%vs 22.00%,P<0.05)。结论:高浓度的PRP虽然表现较强的促细胞增殖作用,但并不存在浓度、剂量依赖性,适宜浓度的PRP可促进hDFbs的增殖。
- 王悦马英智朱喆苏学今周延民
- 关键词：人真皮成纤维细胞富血小板血浆细胞增殖
- 富血小板血浆对人成骨样细胞MG63增殖能力的影响
- 2012年
- 目的研究富血小板血浆(PRP)对人成骨样细胞MG63增殖能力的影响,探讨PRP的生物学功能。方法采集健康志愿者的静脉血,两次离心法制备PRP,氯化钙加人凝血酶激活后离心提取PRP萃取液。碱性磷酸酶(ALP)染色检测不同体积分数PRP(0、1%、2%、3%)对MG63分化活性的影响,碘化丙啶(PI)荧光染色观察PRP作用下MG63细胞形态的变化,免疫细胞化学检测PRP对MG63表达转化生长因子-β(TGF-β)的影响,扫描电子显微镜(SEM)观察PRP对MG63在人工骨材料表面生长情况的影响,CCK-8法检测PRP对MG63增殖活性的影响,流式细胞术(FCM)检测经PRP培养后不同时间MG63的细胞周期,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PRP作用下MG63中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)mRNA的表达量。结果 ALP检测见3%PRP组ALP阳性细胞染色最深,并随体积分数的增加染色强度增加,且PRP组细胞均出现不同程度的脱片现象。PI荧光染色见PRP组细胞核荧光染色较对照组增强。免疫细胞化学检测见3%PRP组TGF-β表达量最高(P<0.05)。SEM观察:PRP组材料表面MG63密集,生长状态良好。CCK-8法测定细胞增殖活性,显示4.8%PRP组吸光度A450 nm值高于对照组(P<0.05)。FCM检测表明:PRP组第2天S期细胞百分比高于对照组(P<0.05);第10天PRP组G0/G1期细胞百分比高于对照组(P<0.05);除第6天外,PRP组G2/M期细胞百分比均高于对照组。RT-PCR结果表明:PRP组MG63的Col-ⅠmRNA表达量较对照组明显上调。结论适宜体积分数的PRP对MG63的增殖、迁移和相关蛋白、基因的表达有促进作用,PRP具有统一、协调细胞生物学行为的作用。
- 王悦刘春丽王静杨旭芳周延民马英智
- 关键词：富血小板血浆细胞增殖
