国家自然科学基金(30770967)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 相关领域：生物学更多>>
- AKT靶向miRNA表达载体的构建及其对胃癌细胞增殖侵袭的影响被引量：1
- 2011年
- 目的构建靶向AKT基因的miRNA真核表达载体,观察其转染胃癌BGC-823细胞后对胃癌细胞增殖及侵袭的影响。方法设计并合成两条针对AKT基因的特异性miRNA干扰序列,与载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR连接,转化大肠杆菌,纯化并鉴定后转染BGC-823细胞,实时定量PCR及Western blot技术鉴定重组体对AKT基因表达的干扰效果。使用MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞的侵袭能力。结果针对AKT基因的miRNA干扰质粒构建成功,BGC-823细胞转染该质粒后AKT mRNA及AKT蛋白表达明显受抑制,细胞增殖和侵袭能力均显著下降(P均<0.05)。结论 AKT靶向miRNA真核表达载体构建成功;其可有效抑制胃癌细胞的增殖和侵袭能力。
- 熊建光李湘楚何小飞于红刚
- 关键词：AKT基因MICRORNARNA干扰增殖
- FAK基因靶向miRNA表达质粒的构建及鉴定
- 2010年
- 目的构建靶向黏着酶(FAK)基因的miRNA真核表达质粒,为其在胃癌相关研究中的应用奠定基础。方法设计合成两条针对FAK基因的特异性miRNA干扰序列,定向克隆到pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体上,经鉴定后转染胃癌BGC-823细胞,实时定量PCR及Western-blot技术鉴定重组体对细胞FAK基因表达的干扰效果。结果针对FAK基因的两组miRNA干扰质粒构建成功,转染BGC-823细胞后,细胞FAK mRNA及FAK蛋白表达均明显降低。结论针对FAK基因的miRNA真核表达质粒成功构建,该质粒可用于miRNA进行靶向FAK的相关研究。
- 刘启胜董卫国于红刚
- 关键词：微小RNARNA干扰
