江西省自然科学基金(0630012)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
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- 解脂耶氏酵母yPPI基因的克隆与功能研究
- 2006年
- 用硫酸二甲酯诱变解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)野生型菌株,获得了不能在油酸作惟一碳源的培养基上生长的突变株。通过功能互补突变株在含油酸的培养基上的生长,从解脂耶氏酵母基因组文库中克隆了一个基因。同源性比较发现,该基因产物与广泛分布于各种生物体中的亲环素类的肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)有较高的同源性,因此将该基因命名为yPPI。电子显微镜下观察发现,yPPPI基因突变株发生了一系列明显的结构变化,在其细胞核的周围出现了许多膜系结构,且细胞内没有过氧化物酶体．免疫荧光分析表明,yPPI基因突变细胞的过氧化物酶体基质蛋白能够正常地合成,但它们不是定位于过氧化物酶体内,而是均匀地分布于细胞质中。这些结果表明yPPI的存在与过氧化物体的形成和过氧化物酶体基质蛋白的正确定位有着密切的关系,证明了亲环素类肽基脯氨酰顺反异构酶对过氧化物酶体的生物合成作用。
- 罗玉萍李思光
- 关键词：亲环素基质蛋白解脂耶氏酵母
- 酵母过氧化物体生物合成缺陷突变株的诱变、筛选和鉴定被引量：3
- 2006年
- 过氧化物体对生物的生长和发育非常重要,人类很多疾病就是由于过氧化物体生物合成缺陷引起。以解脂耶氏酵母E122为出发菌,采用硫酸二乙酯诱变,获得了两株过氧化物体生物合成缺陷突变株,其中一株为温度敏感的突变株。在正常生长条件下,突变株的免疫荧光分析显示弥散的染色模式,且在电镜下观察不到过氧化物体的形态结构。将克隆于表达载体pINA445上的目前所发现的与过氧化物体生物合成有关的基因转化这两株突变株,发现它们均不能恢复其在含油酸的培养基上的生长,表明这两个突变株是由与过氧化物体生物合成相关的新基因的突变引起。这两个突变株的获得为参与过氧化物体生物合成的新基因的发现奠定了基础。
- 罗玉萍李思光
- 关键词：解脂耶氏酵母诱变
