国家自然科学基金(30330280)
- 作品数：22 被引量：144H指数：8
- 相关作者：肖献忠张华莉王慷慨刘瑛唐道林更多>>
- 相关机构：中南大学湖南中医药大学中南大学湘雅三医院更多>>
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- 热休克因子1对内毒素所致G-CSF基因表达的影响被引量：6
- 2005年
- 为探讨热休克因子1(heatshockfactor 1,HSF1)活化和过表达对内毒素(endotoxin ,ET)所致粒细胞集落刺激因子(granulocyte colonystimulatingfactor,G CSF)基因表达的影响,采用大肠杆菌内毒素即脂多糖(lipopolysaccharide ,LPS)处理RAW2 6 4 7巨噬细胞,并通过热休克预处理诱导HSF1活化,采用Western印迹检测HSP70的表达观察HSF1的活化情况,RT PCR检测热休克反应(heatshockresponse ,HSR)对G CSFmRNA表达的影响;构建HSF1的pcDNA3 1真核表达质粒,采用脂质体转染法建立HSF1过表达RAW 2 6 4 7巨噬细胞株,用免疫细胞化学和Western印迹观察HSF1的表达,RT- PCR及Northern印迹进一步研究HSF1对G CSF基因表达的可能影响.发现LPS诱导巨噬细胞中G- CSFmRNA表达增多,并随时间的延长,表达量逐渐增加;与单纯内毒素处理组相比,热休克预处理后,LPS诱导的巨噬细胞G- CSFmRNA的表达明显被抑制;建立的稳定表达HSF1的RAW 2 6 4 7细胞株中有HSF1蛋白的核移位;HSF1过表达可明显抑制LPS诱导的RAW2 6 4 7巨噬细胞G -CSFmRNA的表达.上述结果表明热休克预处理能抑制LPS诱导的巨噬细胞G- CSFmRNA的表达;HSF1过表达可抑制内毒素诱导的巨噬细胞G CSFmRNA的表达.
- 王秋鹏张华莉袁灿刘瑛肖卫民王慷慨刘双于凤秀肖献忠
- 热休克因子1与恶性肿瘤被引量：1
- 2009年
- 热休克因子1(heat shock factor1,HSF1)是调控真核生物热休克反应的主要转录因子。HSF1的作用远不止诱导热休克蛋白(heat shock protein,HSP)表达,也是肿瘤发生的一个有力调节因子,对肿瘤的起始和维持是必需的。HSF1在肿瘤发生中的可能机制是:作为转录因子诱导HSP90和抑制雌激素反应元件调节的基因和XAF1基因的表达;HSF1作为非转录因子诱导细胞有丝分裂停止和基因组不稳定性。
- 陈淑华肖献忠
- 关键词：热休克因子1恶性肿瘤转录调控
- 脑脊液热休克蛋白70水平对小儿中枢神经系统感染的鉴别诊断价值被引量：1
- 2007年
- 目的探讨脑脊液（CSF）中热休克蛋白70（HSP70）的变化及其在小儿中枢神经系统感染中的诊断价值。方法采用蛋白质免疫印迹技术检测13例化脓性脑膜炎（化脑组）、38例病毒性脑膜炎（病脑组）、7例结核性脑膜炎（结脑组）及46例非中枢神经系统感染患儿（对照组）CSF中HSP70水平。常规生化检测CSF的细胞总数、白细胞数、乳酸脱氢酶（LDH）、蛋白定量、腺苷脱氨酶、葡萄糖、压力及氯（Cl-）水平。结果化脑组（76.61±27.69）、病脑组（33.65±16.93）及结脑组（65.85±33.16）的HSP70水平均高于对照组（23.28±19.77）,差异有显著性（P〈0.05或P〈0.01）;化脑组及结脑组HSP70水平均高于病脑组（P均〈0.01）;化脑组与结脑组之间HSP70水平差异无显著性（P〉0.05）。相关性分析显示：HSP70水平增高程度与CSF的细胞总数（r=0.298,P=0.002）、白细胞数（r=0.274,P=0.005）、LDH（r=0.322,P=0.001）、蛋白定量（r=0.629,P〈0.001）、腺苷脱氨酶水平（r=0.363,P=0.001）均呈显著正相关,与CSF中葡萄糖水平呈显著负相关（r=-0.443,P〈0.001）,与CSF压力（r=0.001,P=0.993）及Cl-水平（r=0.148,P=0.133）无相关性。结论小儿中枢神经系统感染时,CSF中HSP70增高;检测CSF中HSP70水平有助于化脑、结脑与病脑的鉴别诊断。
- 康睿曹励之唐道林张国元俞燕肖献忠
- 关键词：脑膜炎中枢神经系统感染脑脊液热休克蛋白70
- 热休克反应对内毒素所致小鼠巨噬细胞炎症因子表达的抑制作用与MAPK信号转导通路的关系研究
- 2005年
- 【目的】探讨热休克反应(HSR)对内毒素(LPS)所致MAPK信号通路的影响。【方法】采用400 ng/mlLPS处理小鼠巨噬细胞(RAW264.7),通过免疫印迹,抗磷酸化抗体检测ERK、JNK、p38的磷酸化。 热休克反应是将巨噬细胞在42℃的条件下培养1h,随后在37℃,5%CO2条件下恢复12h。【结果】ERK、 JNK、p38在LPS处理15min后即被活化,30min达高峰并持续至45min,90min后开始恢复。RT PCR检 测发现TNF α、IL 15mRNA水平增高。细胞经HSR(42℃1h,并恢复12h)后,再经LPS刺激则TNF α、IL 15mRNA转录受抑制,但HSR对JNK、p38、ERK等三种MAPK的活化(磷酸化)无影响。【结论】HSR抑制 LPS所致的炎症因子表达不涉及MAPK信号通路。
- 石永忠唐道林王慷慨于凤秀刘梅冬张华莉肖献忠
- 关键词：内毒素类巨噬细胞炎症热休克反应信号传递小鼠
- 热休克转录因子1及其突变体的研究进展被引量：2
- 2008年
- 热休克因子1(HSF1)是一种转录因子,在正常时不活化,应激时活化而具有反式激活能力。在其蛋白质结构中含有DNA结合域、三聚结构域、调节结构域、转录活化结构域等,它们在HSF1活化过程中各自发挥重要作用。通过改变HSF1的结构构建其突变体,能特异地引起或阻碍HSF1的活化。这些突变体已应用于心血管疾病、肿瘤、神经系统疾病的研究。
- 梁秋娟张华莉涂自智肖献忠
- 关键词：热休克因子1
- 从基因敲除小鼠心肌组织中筛选热休克反应中受HSF1调控的靶基因被引量：8
- 2004年
- 目的 :用cDNA芯片从热休克转录因子 1(HSF1)基因敲除小鼠心肌组织中筛选热休克反应受HSF1调控的靶基因。方法 :用cDNA芯片检测热休克反应 (42℃ 15min ,恢复 3h)中HSF1 / 小鼠心肌组织基因表达谱的改变 (以HSF1+ / + 小鼠为对照 ) ;用RT PCR对cDNA芯片筛选结果进行验证 ;对差异表达的已命名基因进行启动子区转录因子结合位点的分析。结果 :共筛选到差异表达基因 114 2个 ;其中在HSF1 / 小鼠心肌中表达下调的基因为 398个 ,已命名基因为 173个 ;在HSF1 / 小鼠心肌中表达上调的基因为 6 4 1个 ,已命名基因为 2 35个。在HSF1 / 小鼠心肌中表达下调 2 .5倍的已命名基因中 ,有 5个基因启动子区含有热休克元件 (HSE) ;在HSF1 / 小鼠心肌中表达上调 2 .5倍的已命名基因中 ,有 6个基因启动子区含有HSE。结论 :在热休克反应中 。
- 刘瑛袁灿张华莉王秋鹏肖献忠
- 关键词：CDNA芯片热休克反应热休克转录因子1靶基因心肌组织
- 高迁移率族蛋白-1与脓毒症被引量：21
- 2004年
- 唐道林肖献忠
- 关键词：高迁移率族蛋白-1细胞因子脓毒症炎症
- 热休克反应对HMGB1表达及LPS诱导的HMGB1释放的影响被引量：6
- 2005年
- 【目的】观察热休克反应对高迁移率族蛋白 1(HMGB1)表达及内毒素(LPS)诱导的 HMGB1 释放和移位的影响。【方法】用500 ng/ml LPS处理小鼠RA)264.7巨噬细胞20 h,)estern blot分析HMGB1在胞核及其培养上清中的改变;热休克模型通过RA)264.7 细胞置 42.5℃水浴锅中孵育 1 h,然后在 37℃恢复12 h后制备;通过)estern blot分析,观察热休克反应对HMGB1表达及LPS诱导的HMGB1释放及其移位的影响。【结果】HMGB1蛋白表达水平在热休克反应 4 h后减少,8 h后明显减少,12 h后逐步恢复至正常水平;RA)264.7细胞受LPS处理20 h后,细胞培养基中HMGB1的水平明显增加,胞核HMGB1含量减少,而热休克预处理抑制了LPS诱导的HMGB1释放及胞核HMGB1减少。【结论】热休克能影响HMGB1的基因表达;热休克反应抑制LPS诱导的HMGB1释放及其移位。
- 唐道林石永忠蒋磊王慷慨肖卫民肖献忠
- 关键词：热休克反应HMGB1LPS诱导RAW264.7细胞
- Kruppel样因子4对内毒素所致IL-6基因表达的调控及机制研究被引量：10
- 2009年
- 探讨Kruppel样因子4(KLF4)对内毒素所致白介素(IL-6)的基因表达以及释放的影响,并对其调控机制做了初步研究.使用RT-PCR和Westernblot检测KLF4mRNA和蛋白质的表达.采用KLF4过表达的RAW264.7巨噬细胞株或反义寡核苷酸技术抑制内源性KLF4的表达,用RT-PCR和ELISA检测内毒素(LPS)刺激后IL-6mRNA和蛋白质的表达.采用荧光素酶报告基因检测RAW264.7细胞中KLF4过表达对IL-6基因启动子报告基因转录活性的影响.使用EMSA法检测细胞中KLF4与IL-6基因启动子区KLF4元件的结合.结果表明:LPS可以诱导RAW264.7巨噬细胞KLF4的表达以及IL-6蛋白表达.KLF4过表达明显抑制IL-6的mRNA和蛋白质的表达,而KLF4缺失使这种作用消失.荧光素酶报告基因的结果显示,KLF4可以抑制LPS所致的IL-6基因启动子的转录活性.EMSA显示KLF4不能与IL-6启动子区的KLF4结合元件直接结合.结果表明,LPS可以促进RAW264.7小鼠巨噬细胞KLF4的表达和IL-6的释放.KLF4能抑制LPS诱导的IL-6表达和释放,其机制是抑制IL-6启动子的转录活性,但KLF4的抑制作用不是通过直接与IL-6基因的启动子区相结合而实现的.
- 冯衍生刘梅冬刘瑛刘俊文陈广文张华莉肖献忠
- αB-晶体蛋白的功能与疾病被引量：12
- 2005年
- αB-晶体蛋白作为小分子热激蛋白家族代表性成员,人们对其基因定位与调控、蛋白质表达与修饰、组织分布与细胞内定位、功能及其机制进行了多方面的研究。近几年来揭示了其在保护细胞骨架、抗应激损伤、抗凋亡及其他方面的功能,也发现了其与肌肉、神经系统等多种疾病的重要关系。这些进展表明,αB-晶体蛋白在机体内源性保护机制中起着广泛和重要的作用,并有可能成为疾病治疗的新靶点。
- 刘双肖献忠
- 关键词：小分子热激蛋白分子伴侣
