国家高技术研究发展计划(2008AA10Z311) 作品数:8 被引量:57 H指数:5 相关作者: 姜毓君 姚丽燕 韩希妍 周艳秋 曲行光 更多>> 相关机构: 东北农业大学 大连工业大学 黑龙江八一农垦大学 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 黑龙江省科技攻关计划 博士科研启动基金 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 农业科学 化学工程 更多>>
乳源生物活性肽构效关系的研究进展 被引量:5 2008年 乳源性抗高血压肽、抑菌肽和抗氧化肽的结构对它们的功能性质有重要的影响,尤其是在一级结构和二级结构方面。综述了一级结构中氨基酸个数、种类、含量、排布以及脯氨酸、疏水性氨基酸、碱性氨基酸等含量的高低,它们在肽段中所处的位置;二级结构中α-螺旋与β-片层等结构的改变对生物活性的具体影响。 孙颖 徐红华 张艳杰关键词:生物活性肽 ACEI IC50 抗菌肽 抗氧化肽 抗氧化肽及其研究进展 被引量:23 2011年 抗氧化肽具有抑制脂质过氧化和清除自由基的功能,维持人体自由基的平衡,提高机体抗衰老、抗疾病的能力。阐述了抗氧化肽的分类制备、构效关系及体外检测方法,旨在使之更好地应用于抗氧化肽食品、化妆品和饲料领域。 王瑞雪 孙洋 钱方关键词:抗氧化肽 抗氧化能力 rep-PCR指纹图谱技术在乳酸菌鉴定中的应用 被引量:7 2010年 采用了rep-PCR指纹图谱技术,对分离自内蒙古通辽地区的传统发酵乳中的乳酸菌进行了鉴定和多样性分析。应用rep-PCR指纹图谱技术能够对实验菌株达到非常好的分辨能力。结果表明,该地区的乳酸菌呈现出非常高的多样性,其中Lactobacillus plantarum和Lactobacillus helveticus等6种菌种是这些传统发酵乳中常见的种,而植物乳杆菌Lactobacillus plantarum为优势种;而且还发现同一乳酸菌种群指纹图谱存在一些特征性的条带,这将为我们快速鉴定乳酸菌提供了理论依据。 满朝新 迟涛 胡博韬 房玉国 王旻 周艳秋 韩琳琳 胡惠秩 姜毓君关键词:乳酸菌 传统发酵乳制品 牛凝乳酶原基因在乳酸乳球菌中的表达 被引量:9 2010年 【目的】利用乳酸乳球菌nisin诱导基因表达系统(the NIsin Controlled gene Expression system,NICE)表达牛凝乳酶原。【方法】从克隆载体pS19-PPC中获得牛凝乳酶原基因,将该基因与表达载体pNZ8148连接并电转化乳酸乳球菌NZ9000,转化子经酶切、PCR和测序鉴定后,用nisin进行诱导表达,表达产物利用SDS-PAGE和Western blot鉴定,表达产物纯化后检测凝乳活性。【结果】重组牛凝乳酶原与天然牛凝乳酶原比较,其分子量大小、免疫性质、生物活性和抑制剂敏感性没有发现显著差异,其凝乳活性可达2×103IMCU/mL。【结论】在乳酸乳球菌中表达了具有凝乳活性的牛凝乳酶原,同时乳酸乳球菌作为发酵剂和凝乳酶产生菌双重角色的实现,为奶酪加工提供了新思路和新方法。 孙大庆 秦兰霞 姚丽燕 李彬 曲行光 韩希妍 姜毓君关键词:乳酸乳球菌 蛋白印迹 基因芯片在益生菌筛选及功能性分析方面的应用 被引量:1 2009年 基因芯片技术是鉴别微生物最有效的手段之一,它不仅可以高效、快速、准确地筛选出益生菌,而且可以对其作用宿主后产生的益生功能进行分析。本文阐明了基因芯片的原理以及近年来基因芯片技术在益生菌筛选和功能性分析方面的应用。 王明娜 姜毓君 张光辉 姚丽燕 韩希妍 周艳秋 韩琳琳关键词:基因芯片 益生菌 功能分析 Cloning of Bile Salt Hydrolase Gene and Its Expression in Lactic Acid Bacteria 被引量:3 2011年 According to the sequence of the bile salt hydrolase (BSH) gene of Bifidobacterium and the restriction enzyme cutting sites of expression vector pNZ8148, primers were designed and the bile salt hydrolase (BSH) gene was gotten from Bacillus bifidus ATCC 29521 by PCR. BSH gene was inserted into lactic acid bacteria expression vector pNZ8148 to construct the recombinant pNZ8148-BSH. The recombinant pNZ8148-BSH was transferred into lactic acid bacteria NZ9000 with electrotransformation method. And the recombinant which could express BSH protein was obtained. It was identified by SDS-PAGE electrophoresis and activity verification. The result could provide a rationale reference for expressing BSH in lactic acid bacteria. LI Bin JIANG Yujun关键词:IDENTIFICATION 乳源血管紧张素转移酶抑制肽在乳酸乳球菌中的表达 被引量:2 2011年 在乳酸乳球菌中表达乳源血管紧张素转移酶抑制肽。选取了4种不同的来源于牛酪蛋白的血管紧张素转移酶(ACE)抑制肽,为了确保能够在人体消化液作用下正常发挥它们的ACE抑制活性,4种短肽以串联多肽(TP)的形式进行表达,并在各短肽单体间引入了人体内主要消化酶的酶切位点。根据TP的氨基酸序列和乳酸乳球菌的偏爱密码子,人工合成TP基因。然后将TP基因和绿色荧光蛋白(GFP)基因串联于载体pSEC-E7,从而构建了pSEC-TP:GFP质粒,实现了2种蛋白在乳酸乳球菌中的共表达。经电击转化,将该重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,获得重组菌株NZ9000(pSEC-TP:GFP)。用Nisin诱导TP:GFP蛋白表达。RT-PCR、激光共聚焦扫描显微镜和SDS-PAGE鉴定表达产物。RT-PCR结果表明,TP:GFP蛋白在RNA水平表达成功;SDS-PAGE表明目标产物是35 ku的条带。在乳酸乳球菌中实现了乳源血管紧张素转移酶抑制肽的表达。 曲行光 满朝新 姚丽燕 赵凤 杨士芹 姜毓君关键词:乳酸乳球菌 嗜酸乳杆菌NCFM对Caco-2细胞基因表达谱的影响 被引量:7 2009年 【目的】嗜酸乳杆菌NCFM作为一株具有良好益生功能的模式菌株,采用基因芯片技术对其作用后的宿主细胞基因的变化情况进行分析,在生物、食品等领域具有较大研究价值。【方法】将嗜酸乳杆菌NCFM和Caco-2细胞共同培养2h,提取Caco-2细胞的总RNA,并将RNA反转录成cDNA,与Human Genome U133Plus2.0Array基因表达谱芯片杂交,杂交后进行图像扫描和数据分析,并采用Real-time RTPCR方法对差异表达的基因进行验证。【结果】采用基因芯片方法检测了Caco-2细胞经嗜酸乳杆菌NCFM作用2h后的基因表达变化,发现差异表达基因为508个,其中有473个基因上调,35个基因下调,初步推测Caco-2细胞能诱导多个基因的表达,以发挥嗜酸乳杆菌NCFM的益生功能。并且经Real-time RTPCR验证,表达差异显著的3个免疫调节相关基因CCL2、PTX3和TNFRSF9的确在嗜酸乳杆菌NCFM作用期间高表达。【结论】以上这些结果促进了对嗜酸乳杆菌NCFM益生功能的认识,也为揭示该乳酸菌的作用机理提供了理论基础。 王明娜 张光辉 韩希妍 姚丽燕 周艳秋 姜毓君关键词:CACO-2细胞 基因芯片技术 REAL-TIME PCR