湖南省卫生厅资助项目(B20050102)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- bcl-2 shRNA-3增强急性原代白血病细胞对柔红霉素敏感性的研究
- 2009年
- 目的研究以bcl-2基因为靶标的短发夹RNA-3(shRNA-3)对急性原代白血病细胞存活和细胞对柔红霉素(DNR)敏感性的影响。方法将shRNA-3转入急性原代白血病细胞并与柔红霉素联合培养,于24、48和72h,用锥虫蓝拒染法计数活细胞,用免疫组织化学法检测白血病细胞bcl-2和P-糖蛋白(p-gp)的表达。结果shRNA-3能明显降低原代白血病细胞存活,以shRNA-3联合DNR作用最显著,在72h内活细胞数由2.0×105/mL下降到0.8×105/mL,并能显著抑制bcl-2和P-gP的表达,与单用DNR组相比,bcl-2蛋白表达率由(47.21±7.26)%下降到(27.82±8.25)%(P<0.05),P-gP表达率由(24.28±5.60)%下降到(16.34±4.15)%(P<0.05)。结论shRNA-3能增强急性原代白血细胞对柔红霉素的敏感性。
- 李君君颜家运刘劼欧大明黄丽芳
- 关键词：BCL-2白血病急性药物敏感性
- bcl-2 shRNA表达载体的构建及其在K562细胞中的干扰作用研究被引量：1
- 2008年
- 目的构建bcl-2shRNA表达载体,观察其在人白血病K562细胞系中对bcl-2基因的干扰作用。方法设计合成有短发夹结构靶位bcl-2基因的65个碱基的寡核苷酸,连接到载体pSIREN-Shuttle(pSS),构建了bcl-2shRNA表达载体,得到重组质粒pSS-shbcl-2-1、pSS-shbcl-2-2、pSS-shbcl-2-3和一个阴性对照,将其稳定转染K562细胞,分别用RT-PCR、Western-blot法检测转染后K562细胞bcl-2 mRNA及蛋白质表达水平。结果成功构建了bcl-2shRNA的表达载体,并筛选到转染后K562细胞在pSS-shbcl-2-3组bcl-2基因的mRNA和蛋白质表达水平明显抑制。结论特异性的bcl-2shRNA可以干扰K562细胞中bcl-2基因的表达,针对bcl-2基因不同位点的不同shRNA也有干扰效果的差异。
- 李君君颜家运刘劼黄丽芳
- 关键词：基因BCL-2细胞系K562
