广东省自然科学基金(9145624536-4000003)
- 作品数：13 被引量：30H指数：4
- 相关作者：吴志华张婧谢耀坚曾庆平杨巧丽更多>>
- 相关机构：国家林业局广州中医药大学中南林业科技大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金湛江市财政资金科技专项竞争性分配项目公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 桉叶不饱和脂肪酸的提取研究及成分分析被引量：4
- 2013年
- 用不同的溶剂、物料粒度、料液比、浸泡时间及萃取时间对桉叶不饱和脂肪酸进行提取的正交试验,筛选出最优的提取方案并对提取物甲酯化处理后通过GC-MS分析其成分。在进行了L16(45)正交试验之后,研究得到当溶剂为丙酮、物料粒度为0.075～0.15 mm、料液比为1:15(g:mL)、浸泡时间为8 h及超声波处理1.5 h时提取得率为14.9%,GC-MS分析,鉴定出6个化合物,其中有5个脂肪酸类化合物,如不饱和脂肪酸亚油酸和亚麻酸,10 g桉叶中含有36.01 mg不饱和脂肪酸。桉叶中含有重要的不饱和脂肪酸,具有开发利用价值。
- 杨巧丽谢耀坚谭晓风张婧黄赤夫吴志华
- 关键词：桉叶不饱和脂肪酸正交试验
- 桉叶脂肪酸提取成分的GC-MS优化分析被引量：1
- 2012年
- 以华南广泛栽培的尾巨桉DH32-29无性系为材料,采用D-optimal响应面方法对桉叶脂肪酸组成成分检测的GC-MS色谱条件进行优化,探讨了色谱条件的程序升温中的8个因子对桉叶提取物脂肪酸成分的影响。以脂肪酸成分的相对含量、脂肪酸种类数、Simpson指数、离子谱图质量为响应值,优化桉叶提取物脂肪酸成分得到的色谱条件为:初始温度80℃,第一次保留时间1.1min,升温速率1为17℃/min,中间温度240℃,第二次保留时间0.7min,升温速率2为1℃/min,最后温度253℃,最后保留时间4min。分别以优化前色谱条件和优化后色谱条件对16个不同提取方法获得WC3桉叶提取物进行对比,结果表明后者在桉叶脂肪酸含量、成分种类数、脂肪酸成分的Simpson指数上显著优于前者。
- 吴志华杨巧丽李天会张婧谢耀坚
- 关键词：桉树脂肪酸气相色谱-质谱
- 青蒿素和雷帕霉素阻遏一氧化氮爆发性缺氧激发的小鼠急性关节滑膜炎被引量：1
- 2012年
- 为探讨类风湿性关节炎(RA)的发病原因并揭示青蒿素及雷帕霉素抗RA的作用机理,本研究建立了完全弗氏佐剂(CFA)诱导的急性关节炎(CIAA)小鼠模型.从炎症形态学及组织病理学上与经典的胶原诱导关节炎(CIA)的比较表明,CIAA能完全模拟CIA的关节红肿、滑膜增生和炎性浸润,而且造模时间大大缩短(从28天缩短到3天).关节腔CFA注射使促炎症细胞因子基因全面上调,一氧化氮(NO)急剧爆发,缺氧诱导因子-1(HIF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)过表达,最终导致滑膜血管新生及细胞增殖.用NO供体化合物硝普钠(SNP)注射小鼠关节腔也能引起关节红肿,而CFA与NO合成抑制剂NG-单甲基-L-精氨酸(L-NMMA)共同给药则无关节炎症发生.SNP先激活促炎症细胞因子表达,然后阻遏诱导型NO合酶表达,再进一步促进HIF-1和VEGF表达.在CIAA小鼠造模前后注射青蒿琥酯和/或雷帕霉素,可逆转缺氧诱导的HIF-1和VEGF表达、滑膜血管形成、肿瘤样增生和淋巴细胞炎性浸润.青蒿琥酯不能完全抑制CFA诱导的免疫激活,而雷帕霉素可显著下调CFA激发的促炎症细胞因子表达,二者均能抑制NO合成,可见NO是RA发病的重要媒介因素.青蒿琥酯和雷帕霉素通过阻断NO产生的连锁效应展示了预防及治疗RA的潜在应用前景.
- 吴佩鲍飞郑青肖娜汪大婷曾庆平
- 关键词：一氧化氮缺氧
- 低温诱导黄花蒿中青蒿素的生物合成及其机制研究被引量：8
- 2012年
- 目的研究低温处理对黄花蒿中青蒿素及其他萜类合成通路的影响。方法以4℃为胁迫条件,利用高效液相色谱法测定青蒿素量;硫酸钛沉淀法和N,N-二甲基-对-亚硝基苯胺漂白反应分别检测黄花蒿叶片过氧化氢(H2O2)和单线态氧(1O2)量;紫外分光光度法检测过氧化氢酶(CAT)活性;实时荧光定量PCR技术定量分析青蒿素合成途径及竞争途径关键酶基因的表达。结果 4℃处理4 h后黄花蒿叶片中1O2和H2O2量升高,并伴随着青蒿素量和CAT活性逐步提高,4、24、48 h后青蒿素量分别提高20%、65%、80%;4℃处理24 h后,青蒿素合成相关基因(HMGR、FPS、ADS、CYP71AV1、CPR和DBR2)的表达普遍上调,其中ADS基因的表达提高16倍;而青蒿素合成竞争途径酶(β-石竹烯合酶)基因(CS)表达则下调近20倍。结论低温刺激可能通过产生高浓度活性氧(ROS)促进青蒿素合成前体转化,上调青蒿素合成相关基因表达并抑制竞争途径基因表达等途径促进青蒿素合成。
- 杨瑞仪卢元媛杨雪芹冯丽玲曾庆平
- 关键词：黄花蒿青蒿素活性氧基因表达
- 黄花蒿cyp71av1启动子的分离及表达特性分析被引量：4
- 2011年
- 目的从黄花蒿中分离鉴定青蒿素生物合成途径关键酶——细胞色素P450单加氧酶编码基因(cyp71av1)的启动子序列并研究其表达特性,探索提高该基因表达量并进一步促进青蒿素合成的途径。方法采用热不对称嵌套PCR法从黄花蒿DNA中分离cyp71av1 5’端非翻译区序列,构建与β-葡萄糖苷酸酶(GUS)报告基因融合的植物表达载体,通过农杆菌介导转化烟草。采用GUS组织化学染色法和分光光度法分别定性和定量检测cyp71av1 5’端非翻译区序列调控GUS基因在正常条件和胁迫条件下的表达。结果从黄花蒿中分离出长短2个cyp71av1 5’端非翻译区序列,分别获得与GUS基因融合表达的转基因烟草,均能检测到GUS活性且两者无明显差异。GUS活性定量检测结果还显示,在脱水、4℃和紫外辐射条件下,转化烟草GUS活性提高1.4～2.7倍。结论从黄花蒿分离出的2个cyp71av1 5’端非翻译区序列都具有启动子功能,并且具有环境诱导表达特性。
- 杨瑞仪杨雪芹冯丽玲曾庆平
- 关键词：黄花蒿启动子青蒿素
- 青蒿萜类合成途径的交流模式(英文)被引量：3
- 2010年
- 【目的】探讨青蒿细胞质与质体中的萜类合成途径的相互关系。【方法】用甲羟戊酸(MVA)途径抑制剂洛伐他汀、脱氧木酮糖磷酸(DXP)途径抑制剂磷甘霉素及类固醇合成抑制剂咪康唑对青蒿苗进行处理,对途径终产物——β-胡萝卜素和生育酚的生成以及细胞质内的MVA途径关键酶基因(HMGR、FPS、ADS、CYP71AV1、CPR、SQS)和质体内的DXP途径关键酶基因(DXS、DXR)的转录表达水平的动态变化进行了定量依时分析。【结果】洛伐他汀对MVA途径基因(HMGR、FPS、ADS、CYP71AV1、CPR、SQS)和DXP途径基因(DXS、DXR)的转录均有抑制作用,但对DXP途经终产物(β-胡萝卜素和生育酚)的合成无显著影响,叶片也并未出现白化。磷甘霉素处理后对DXS、DXR转录和β-胡萝卜素、生育酚合成有持续抑制作用,但MVA途径基因转录在3h瞬时提高,青蒿苗同时出现短根和叶片白化现象。添加咪康唑后青蒿素合成基因(ADS、CYP71AV1、CPR)的转录水平分别提高11、5和3倍。【结论】表明青蒿2条萜类合成途径之间存在物质交流,且流动方向可能以叶绿体向胞浆流动为主,抑制青蒿素合成竞争途径可调节细胞代谢向青蒿素合成方向移动。
- 杨瑞仪杨雪芹冯丽玲曾庆平
- 关键词：甲羟戊酸途径
- 尾叶桉叶片脂肪酸成分的GC-MS分析被引量：4
- 2011年
- 以索氏提取和超声波提取两种方法对尾叶桉U6桉叶油进行了提取,并利用GC-MS对其成分进行了分析。结果表明:桉叶油中共检出8种脂肪酸成分,其中饱和脂肪酸6种,分别为十四酸、棕榈酸、硬脂酸、花生酸、二十四烷酸和二十八酸,多不饱和脂肪酸2种:亚油酸和α-亚麻酸;两种方法中索氏法的提取率(7.69%)明显高于超声波法(6.51%),而所得不饱和脂肪酸组成相同,索氏提取物中不饱和脂肪酸α-亚麻酸为18.93%,亚油酸为7.72%;超声波提取物中α-亚麻酸为30.31%,亚油酸为6.48%。
- 张婧谢耀坚杜阿朋李天会吴志华
- 关键词：尾叶桉脂肪酸多不饱和脂肪酸气相色谱-质谱
- 韦塔桉叶片脂肪酸的提取及成分的GC-MS分析
- 2012年
- 以丙酮为提取溶剂,物料粒度为100-200目,料液比1：15,浸泡8 h,萃取时间为1.5 h,在超声功率为80 khz,30℃时对韦塔桉桉叶油进行提取,并用GC-MS对其成分进行分析。结果得到韦塔桉桉叶油的提取率为19.04%,经GC-MS分析得到韦塔桉桉叶油含有10种脂肪酸,其中亚油酸和亚麻酸为不饱和脂肪酸。桉叶油中棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸的绝对含量分别为0.82%、0.86%、0.15%、0.33%,占提取粗脂总量的2.16%。
- 杨巧丽谢耀坚谭晓风张婧吴志华
- 关键词：韦塔桉脂肪酸GC-MS
- 顶空固相微萃取—气质联用分析尾巨桉叶片挥发油化学成分被引量：1
- 2012年
- 应用顶空固相微萃取法提取尾巨桉叶片挥发油,同时以气相色谱——质谱法结合色谱保留指数法对化学成分进行定性定量分析。结果表明:尾巨桉叶片挥发油中共有86种化合物,其中相对含量大于0.3%的成分有40个,占色谱峰总流总面积的89.65%,主要成分是桉油精(33.10%)、α一蒎烯(10.58%)、1-甲基-2-(1-甲基乙基)苯(8.98%)、乙酸松油酯(6.96%)、乙烯基甲醚(3.13.%)、龙脑烯醛(1.59%)、己醛(1.54%)、己烷(1.42%)等组分。
- 林丽静朱冰清吕国提杨巧丽吴志华
- 关键词：尾巨桉挥发油顶空固相微萃取
- 青蒿素增敏复方抑制肿瘤细胞增殖及延缓荷瘤裸鼠移植肿瘤生长的研究被引量：4
- 2010年
- 【目的】提高青蒿素抗肿瘤效率,阐明青蒿素增敏复方的抑瘤增敏机理。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各药物对人肝癌细胞株HepG2细胞的生长抑制率;经皮下接种HepG2细胞进行荷瘤裸鼠造模,测定给药15 d后瘤体质量,计算抑瘤率。【结果】青蒿琥酯配伍马来酸二乙酯、巯基琥珀酸和氨基三唑后,肿瘤细胞的生长抑制率较相同浓度的青蒿琥酯单方高43.84%,抑瘤率较青蒿琥酯单方提高近3倍。HepG2细胞中抗氧化剂含量及抗氧化酶活性测定结果表明,空白组的测定值均高于单方组和复方组,而复方组的测定值低于单方组。【结论】青蒿素增敏复方可能通过降低抗氧化剂含量及抑制抗氧化酶活性发挥抗肿瘤增敏作用。
- 黄玲张平祖曾庆平
- 关键词：增敏裸鼠
