国家教育部博士点基金(200800010106)
- 作品数：11 被引量：61H指数：3
- 相关作者：蔡志明唐爱发桂耀庭余州张振明更多>>
- 相关机构：北京大学深圳医院深圳北京大学香港科技大学医学中心暨南大学第五附属医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 睾丸特异性启动子计算机识别方法研究
- 2010年
- 目的研究应用生物信息学技术对小鼠睾丸特异启动子进行识别、预测。方法分析睾丸特异性启动子序列和非睾丸特异性启动子序列,通过反式作用因子在两种序列中的对应密度比,确定识别特征,进行睾丸特异性启动子识别。结果收集了24条睾丸特异性启动子序列,分析得到9个反式作用因子及其特征向量。结论本方法对小鼠睾丸特异启动识别、预测具有较高的准确性。
- 唐爱发张振明桂耀庭蔡志明
- 关键词：睾丸特异性启动子计算生物学
- Tesmin基因在小鼠睾丸中的表达分析被引量：1
- 2009年
- 目的研究Tesmin基因的表达特点。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织提取RNA,通过RT-PCR分析差异表达基因Tesmin在小鼠睾丸不同发育阶段中的表达。结果基因芯片结果显示4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸中分别是31.4(A)、34(A),1292(P)、865.6(P)、977.2(P)和830.7(P),代表Tesmin基因在4d,9d小鼠中无表达,1 8d龄后开始高表达,RT-PCR结果表明小鼠Tesmin基因在小鼠9d龄及之前的睾丸中没有表达,在18d龄后睾丸中开始高表达,与基因芯片分析结果相一致。结论Tesmin基因为小鼠年龄依赖性表达基因,小鼠Tesmin基因的表达与小鼠精子发生有很强的一致性,推测该基因可能在精子发生中起重要作用。
- 唐爱发张振明余州张晓燕孙亮叶炯贤桂耀庭蔡志明
- 关键词：DNA芯片精子发生
- 睾丸基因表达特征和生物学功能的研究被引量：7
- 2010年
- 近50年来，包括中国在内的全世界成年男性的精子数量和质量都在下降。据报道，世界卫生组织调查显示，不孕不育症的发生约为育龄夫妇的8％～12％，其中男性因素占50％。而生精障碍引起的少精子症或无精子症又是造成男性不育的常见原因。
- 蔡志明孙亮唐爱发
- 关键词：睾丸基因表达不育
- DNA甲基化的世代传递被引量：2
- 2010年
- 在过去的几年里,人们对表观遗传修饰中的DNA甲基化修饰有了新的认识。这种修饰作用决定了基因在何时何地表达,这一修饰作用不仅会贯穿生物体的整个发育过程,而且会遗传给下一代。异常的DNA甲基化修饰会导致复杂的突变,同样,这些突变亦有可能遗传到子代,进而影响到子代的生长发育。对DNA甲基化在世代间传递现象的探讨会为表观遗传机制的研究提供很好的模型,进而有助于生物医学方面的研究。本文就DNA甲基化世代传递方面的研究进展作一综述。
- 孙亮唐爱发桂耀庭蔡志明
- 关键词：表观遗传学DNA甲基化肿瘤
- Rfx2基因在小鼠睾丸中的表达研究被引量：2
- 2010年
- 目的利用基因芯片筛选与精子发生相关的基因,并研究其表达特征。方法将4 d、9 d、18 d、35 d、54 d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的基因。通过RT-PCR分析差异表达基因在小鼠睾丸不同发育阶段中的表达。结果分析Affymetrix全基因组芯片杂交结果后,筛选得到1个差异表达杂交点,通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是Rfx2基因。该基因在4 d、9 d、18 d、35d、54 d和6月龄小鼠睾丸中的芯片信号校正值分别是22.9(A)、1.5(A),130.3(P)、65.6(P)、112.7(P)和71.7(P),表明Rfx2基因在4日、9日龄小鼠睾丸中不表达,从18日龄后开始表达,而且在18日龄-6月龄小鼠睾丸中持续表达;RT-PCR结果表明Rfx2基因在4 d、9 d小鼠睾丸中不表达,在18日龄小鼠睾丸中开始表达,其实验结果与芯片分析结果一致。结论 Rfx2基因为小鼠年龄依赖性表达基因,推测Rfx2基因在小鼠精子发生过程中起重要作用。
- 王朝亮唐爱发余州张晓燕张振明李贤新桂耀庭蔡志明
- 关键词：精子发生
- Stra8基因启动子逆转录病毒包装细胞株的建立
- 2011年
- 目的建立小鼠Stra8基因启动子控制绿色荧光蛋白EGFP表达（Pstra8-EGFP）的逆转录病毒包装细胞株，以方便地将Pstra8-EGFP转导到目的细胞，为生殖细胞鉴定分选提供基础。方法PCR扩增小鼠基因组DNA中的Stra8基因启动子片段，构建Stra8基因启动子控制表达的EGFP报告基因逆转录病毒质粒。将质粒脂质体法转染PT67病毒包装细胞，G418抗性筛选后，梯度稀释法将包装细胞单克隆化并扩增成多个细胞株。以包装细胞培养上清液感染NIH3T3细胞的所形成的G418抗性阳性细胞数定义病毒滴度，确定高滴度病毒包装细胞株。通过染毒小鼠骨髓间充质干细胞（mouse bone marrow mesenchymal stemcells，MSCs）验证该细胞株的Pstras8-EGFP转导效果。结果所建立的病毒包装细胞株培养上清液滴度达到1．3×10^6 cfu／ml。MSC经包装细胞培养上清液感染后，在（retinoicacid，RA）诱导下能表达EGFP蛋白。结论成功构建了将Pstras．EGFP转导到目的细胞的PT67逆转录病毒包装细胞株。
- 漆正宇崔光辉郭新秦洁张艳敏桂耀庭蔡志明
- 关键词：视黄酸间充质干细胞生殖细胞
- Y染色体及其微缺失与男性不育:过去、现在与将来被引量：43
- 2010年
- 由遗传缺陷所引起的精子发生障碍是男性不育的一个重要病因。一直以来,Y染色体被认为缺乏重要的功能基因。直到睾丸决定基因的发现,Y染色体的研究才重新得到重视。Y染色体的成功测序揭开了Y染色体的真实结构和Y染色体微缺失的分子基础。在Y染色体上的220个基因中,位于AZF区的16个编码基因或基因家族与男性生殖与发育相关。至今,在Y染色体AZF区已发现至少12种缺失。Y染色体上大量的同源序列与回文结构所致非等位的同源性重组是Y染色体微缺失发生的分子基础。Y染色体微缺失是已知的导致男性不育的最主要的分子遗传病因,临床上常使用PCR扩增Y染色体特异的序列标记位点来进行检测。基因组学时代的到来为男性不育的研究带来革命性的工具与方法,有利于加深对Y染色体缺失发生机制的了解,进一步明确Y染色体基因的功能以及相互之间的联系,为基因治疗奠定基础。
- 蔡志明
- 关键词：Y染色体男性不育无精子因子
- Pkg2在小鼠中的年龄依赖性表达特征分析
- 2010年
- 目的利用基因芯片技术筛选与精子发生相关的基因,并研究其表达特点。方法将4d、9d、18d、35d、54d龄和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的基因。然后通过RT-PCR分析差异表达基因在小鼠睾丸不同发育阶段中的表达。结果对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后,筛选得到1个差异表达杂交点,通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是Pgk2基因。该基因在4d、9d、1 8d、35d、54d龄和6月龄小鼠睾丸中信号强度分别是1.7(A)、161.5(P)、634(P)、1881.3(P)、3123.7(P)和3440.4(P)表明Pgk2基因在4d龄小鼠睾丸中无表达,9d低表达,从18年龄后开始高表达;RT-PCR结果表明:小鼠Pgk2基因在小鼠9d龄及之前的睾丸中无表达或低表达,在18d龄睾丸后开始高表达,与芯片数据的结果相一致。结论 Pgk2基因为小鼠年龄依赖性表达基因,推测其在精子发生过程中有重要作用。
- 唐爱发张振明余州张晓燕桂耀庭蔡志明
- 关键词：基因芯片精子发生
- TNP2基因在小鼠睾丸组织中的表达研究被引量：2
- 2009年
- 目的筛选与精子发生相关的基因。方法将4d、9d、18d、35d、54d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的基因。通过RT-PCR分析差异表达基因在小鼠睾丸不同发育阶段中的表达。结果对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后,筛选得到1个差异表达杂交点,通过NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知,该差异表达基因是TNP2基因。小鼠TNP2基因全长724bp,其编码框大小为375bp。RT-PCR结果表明TNP2基因在小鼠21d龄及之前的睾丸中没有表达,在35d龄睾丸开始高表达。结论 TNP2基因为小鼠年龄依赖性表达基因,小鼠TNP2基因的表达与小鼠精子发生过程有很强的一致性,因此,可以推测该基因在精子发生中可能起重要作用。
- 李贤新来永庆叶炯贤唐爱发余振东桂耀庭蔡志明
- 关键词：寡核苷酸序列分析精子发生
- 精子顶体小泡蛋白-1(ACRV1)在小鼠睾丸组织中的表达与定位被引量：4
- 2011年
- 目的:研究精子顶体小泡蛋白-1(ACRV1)在小鼠睾丸组织发育过程中的表达特征。方法:将4 d、9 d、18 d、35 d、54 d和6月龄小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交,筛选出差异表达的ACRV1基因。采用RT-PCR方法检测ACRV1基因在小鼠不同日龄和不同组织中的表达情况,采用免疫组织化学方法检测ACRV1蛋白在小鼠睾丸组织中的定位。结果:对Affymetrix全基因组芯片杂交结果分析后,筛选得到1个差异表达杂交点,通过在NCBI网站与小鼠全基因组序列Blast分析可知该差异表达基因是ACRV1基因。RT-PCR结果表明ACRV1 mRNA呈小鼠睾丸特异性表达,在出生31 d小鼠睾丸开始高表达,在成年前达到高峰。ACRV1蛋白主要定位在睾丸圆形精子和长形精子细胞。结论:ACRV1基因存在发育的表达调控,为小鼠年龄依赖性表达基因,其表达与小鼠精子发生的过程有很强的一致性,且具有睾丸特异性表达的特征,因此推测该基因可能在精子发生中具有关键作用。
- 颜秋霞唐爱发葛颂余州李文杰陈静蔡志明桂耀庭
- 关键词：基因芯片精子发生
