北京市自然科学基金(7042010)
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：北京市结核病胸部肿瘤研究所更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 室内紫外线消毒对分枝杆菌及变异株的杀灭效果
- ＜正＞ 目的:为了提高实验室的消毒效果,保障实验的准确性和实验人员以及环境的安全,以分支杆菌和结核菌-L型稳定株为模型,用紫外线常规照射后,观察室内的消毒效果。方法:挑取分支杆菌和结核菌-L型稳定株菌落,经研磨器研磨后,...
- 刘湘京卢润生
- 文献传递
- 结核分枝杆菌黏附素HBHA在结核病免疫学诊断中的应用被引量：5
- 2008年
- 目的探讨结核分枝杆菌肝素结合血凝黏附素（Heparin—binding haemagglutinin adhesin，HBHA）在结核病免疫诊断方面的应用价值。方法将在苏通培养基中培养至稳定期的卡介苗菌株（BCG）菌体超声裂解，离心后取上清并通过CL-6B层析柱，利用含0—500mmol／L氯化钠的磷酸盐缓冲溶液（PBS）进行梯度洗脱后获得天然HBHA。以BCG基因组为模板PCR扩增结核分枝杆菌hbha基因片段，质粒pET-32a为载体，大肠杆菌作为宿主菌制备原核表达的HBHA重组蛋白。以纯化的天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白为包被抗原，分别对肺结核组、肺外结核组、PPD阳性和PPD阴性健康对照组各47例血清通过ELISA方法检测抗HBHA的抗体水平。应用SPSS11．5统计软件对各研究组数据进行方差齐性检验，然后进行t检验，并计算各研究组的敏感度和特异度。结果含有375mmol／L氯化钠的PBS洗脱液可以洗脱获得较纯的天然HBHA蛋白。利用重组HBHA所带的组氨酸标签进行特异分离、纯化。ELISA检测结果表明天然HBHA蛋白和重组HBHA蛋白、PPD阳性和PPD阴性健康对照组之间血清抗体水平差异不明显。肺结核组与肺外结核组的血清抗体ELISA检测的吸光度值在散点图中分布有明显差异，肺结核组吸光度值集中分布在0．30—0．40之间，肺外结核组吸光度值分布在0．35—0．45之间，经统计学检验结果差异具有统计学意义（t：12．224，P〈0．05）。结核组（肺结核和肺外结核）与对照组（PPD阴性，PPD阳性）吸光度值分布具有显著不同，对照组全部小于0．30，结核组吸光度值则集中分布于0．30—0．45之间。经统计学检验（t=25．909，P〈0．05）血清抗体水平具有显著性差异。结论结核分枝杆菌黏附素HBHA在结核病免疫学诊断的应用中具有较好的特异度和敏感度，有望用于结核病、尤其是肺外结核病的实验室辅助诊断。
- 张旭霞孙照刚李妍张健源端木宏谨李传友
- 结核分枝杆菌天然黏附素HBHA的制备及其检测应用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨HBHA在ELISA检测结核病方面的应用。方法将BCG培养至稳定生长期将其苏通培养基上清通过CL-6B层折柱．利用含NaCL的PBS溶液梯度洗脱得到天然HBHA．然后以纯化的天然HBHA蛋白和原核表达的HBHA蛋白为包被抗原分别对肺结核组、肺外结核组、PPD阳性和PPD阴性健康对照组血清各47例进行ELISA检测抗HBHA抗体水平。结果在进行梯度洗脱时含有375mMNaCL的PBS洗脱液可以获得较纯的天然HBHA蛋白。ELISA检测结果表明肺结核组和肺外结核组的血清抗体水平高于PPD阳性和PPD阴性健康对照组（x^2=36．48，P〈0．01），肺结核组和肺外结核组之间（x^2=0.27。P〉0．05）、PPD阳性和PPD阴性健康对照组之间（x^2=0．30，P〉0.05）血清抗体水平没有显著差异。结论利用天然HBHA蛋白和重组HBHA蛋白进行ELISA结核病诊断都具有较高的特异性和敏感性，可以较好地用于结核病的诊断。以天然HBHA为基础的血清学诊断方法具有更好的敏感性和特异性。
- 张旭霞孙照刚李妍刘洋李卫民邱云青张健源端木宏谨李传友
- 关键词：结核分枝杆菌结核结核病
- 结核分枝杆菌黏附素HBHA的克隆表达及其免疫原性研究被引量：3
- 2006年
- 目的应用克隆表达技术从大肠杆菌中获得重组的结核分枝杆菌黏附素HBHA蛋白,并以HBHA免疫小鼠观察抗HBHA抗体的产生并探讨其免疫原性。方法1)应用PCR技术扩增结核分枝杆菌hbhA编码基因的特异片段。2)结核分枝杆菌hbhA编码基因的克隆及在大肠杆菌中的表达。3)应用克隆表达的HBHA蛋白免疫小鼠,并用ELISA法测定小鼠血清抗HBHA抗体水平。结果1)结核分枝杆菌hbhA基因成功地克隆到PET-32 a(+)表达载体中,并在大肠杆菌中获得了高效表达。重组HBHA主要存在于包涵体中,纯化包涵体并获得了大量的重组HBHA。2)重组HBHA免疫小鼠可产生较高水平的抗HBHA抗体(>1∶102 400),表明重组HBHA在纯化过程中仍保留较强的免疫原性。结论结核分枝杆菌黏附素HBHA具有较好的免疫原性。
- 李传友张旭霞张健源李卫民田苗邱云青孙照刚李妍端木宏谨
- 关键词：分枝杆菌结核黏附素免疫原性
- 肺外结核发病分子机制的研究进展
- ＜正＞ 一、肺外结核一般情况目前结核病仍是威胁我国人民健康的重大公共卫生问题,每年因结核病死亡人数超过其它传染病死亡人数的总和,肺外结核死亡人数在结核病人中的死亡比例呈逐年升高趋势（我国2000年为9.8%,1990年为...
- 李传友端木宏谨
- 文献传递
- 结核分枝杆菌黏附素和结核病
- ＜正＞ 细菌黏附素是菌体自身成分或其分泌的参与黏附到宿主细胞的物质。目前细菌黏附素的概念并没有达到完全的公认及广泛的使用,在不同的领域,甚至同一领域不同的作者仍然使用不同的术语,如受体、结合位点等,在结核分枝杆菌研究领域...
- 李传友端木宏谨
- 文献传递
- 结核分枝杆菌黏附素HBHA的克隆表达及其免疫原性研究
- 2007年
- 目的应用克隆表达技术从大肠杆菌中获得重组的结核分枝杆菌黏附素HBHA蛋白，并以重组HBHA免疫小鼠观察抗HBHA抗体的产生并探讨其免疫原性。方法①应用PCR技术扩增结核分枝杆菌hbhA编码基因的特异片段。②结核分枝杆菌hbhA编码基因的克隆及在大肠杆菌中的表达。③应用克隆表达的HBHA蛋白免疫小鼠，并用ELISA法测定小鼠血清抗HBHA抗体水平。结果①结核分枝杆菌hbhA基因成功地克隆到PET-32a（＋）表达载体中，并在大肠杆菌中获得了高效表达。重组HBHA主要存在于包涵体中，纯化包涵体并获得了大量的重组HBHA。②重组HBHA免疫小鼠可产生较高水平的抗HBHA抗体（〉1：102400），这表明重组HBHA在纯化过程中仍保留较强的免疫原性。结论结核分枝杆菌黏附素HBHA具有较好的免疫原性。
- 李传友张旭霞张健源李卫民田苗邱云青孙照刚李妍端木宏谨
- 关键词：黏附素免疫原性
