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国家自然科学基金(30671087): 作品数：6 被引量：21H指数：4; 相关作者：李青叶菁张改娜王学仁贾敬芬更多>>; 相关机构：第四军医大学西京医院西安文理学院西北大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金西安市科技创新支撑计划基金陕西省教育厅科研计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

CIDEC在人原代前脂肪细胞向成熟脂肪细胞诱导分化过程中的表达研究: 目的探讨CIDEC在脂肪细胞分化过程中的表达情况。方法以原代培养人前脂肪细胞为研究对象,在体外将其诱导分化为脂肪细胞。采用Realtime PCR和WesternBlot的方法检测CIDEC和PPARγ在脂肪细胞分化过程...; 李烦繁李青叶菁谷雨李望舟李航张丽英宋越蒋丽娜; 关键词：细胞分化; 文献传递

CIDEs家族在脂肪细胞肿瘤中的表达被引量：1: 2008年; 目的:探讨CIDE基因家族与脂肪肉瘤的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测30例正常脂肪组织、20例脂肪瘤和21例脂肪肉瘤组织中CIDEA、CIDEB和CIDE3的表达情况。结果:CIDEA和CIDE3在30例正常脂肪组织、20例脂肪瘤和8例高分化脂肪肉瘤中均高表达,在2例去分化、6例黏液型及5例多形型脂肪肉瘤中,仅在成熟的脂肪细胞或有脂母细胞分化的细胞中表达,而去分化的肿瘤细胞和基质细胞则不表达;且CIDEA和CIDE3的表达一致;CIDEB在所有正常脂肪组织、脂肪瘤及脂肪肉瘤中均呈阴性。结论:CIDEA和CIDE3均与脂肪细胞的分化密切相关,二者的表达缺失可能与脂肪肉瘤的发生和进展有关,但CIDEB与脂肪肉瘤的发生无明显关系。; 王淑芳李青程红姚丽李繁烦张静陈广生赵大庆闵婕李南林; 关键词：脂肪肉瘤细胞分化

EGFP-CIDE-3及D sRed1-CIDE-3融合基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达和定位被引量：2: 2008年; 目的:分别构建EGFP、DsRed1与CIDE-3的融合基因真核表达载体,观察其在人胚肾上皮细胞293T中的表达,确定CIDE-3的亚细胞定位。方法:分别以质粒pEGFP-C3、pDsRed1-N1及本实验室克隆得到的质粒pET28a(+)-CIDE-3为模板,PCR扩增EGFP、DsRed1 DNA片段及人CIDE-3基因的CDS序列,再分别将EGFP、CIDE-3及DsRed1、CIDE-3克隆入真核表达载体pShuttle-CMV中。酶切、测序鉴定后,经磷酸钙转染入293T细胞,通过荧光显微镜观察其在293T细胞中的表达,并利用荧光染料Bodipy 493/503定位脂滴,探讨CIDE-3与脂滴之间的关系。结果:酶切及DNA测序证实,重组质粒pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3和pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3构建成功。荧光显微镜观察显示,pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3融合蛋白定位于细胞质,pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3融合蛋白也定位于细胞质,并与脂滴存在共定位关系。结论:成功构建了重组质粒pShuttle-CMV-EGFP-CIDE-3和pShuttle-CMV-DsRed1-CIDE-3;两者均可在239T细胞中表达,融合蛋白分布于细胞质,并与脂滴存在共定位关系。; 谷雨李青叶菁李烦繁闵婕张丽英马钰李航刘芳; 关键词：融合蛋白 EGFP 293T细胞

Identification of lipid droplet associated proteins in the formation of macrophage-derived foam cells using microarrays: A large number of macrophages-derived foam cells stores excessive neutral lipids in intracellular droplets,and...; Hang Li,Yu Gu,Yue Song,Fanfan Li,Liying Zhang,Lina Jiang,Jing Ye and Qing Li State Key Laboratory of Cancer Biology and Department of Pathology,Xijing Hospital,Fourth Military Medical University,Xi’an,China; 文献传递

脂肪储存小滴蛋白5的表达、纯化及多克隆抗体的制备: 目的制备兔抗小鼠脂肪储存小滴蛋白5(LSDP5)蛋白的多克隆抗体并进行鉴定。方法将原核表达质粒pGEX-LSDP5转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达GST与LSDP5融合蛋白,经GSTrap FF柱纯化后...; 刘芳叶菁张利军于铭李烦繁张丽英李航谷雨李青; 关键词：原核表达多克隆抗体酶联免疫吸附试验; 文献传递

携带CIDE-3基因重组腺病毒的构建: 目的构建携带EGFP(EnhancedGreen Fluorescent Protein)-CIDE-3(CellDeath-Inducing DFF45-Like Effectors 3)及DsRed1(Discoso...; 谷雨叶菁李烦繁张丽英李航刘芳李青; 关键词：融合基因 EGFP 腺病毒; 文献传递

人CIDE3基因克隆和真核表达载体构建及促凋亡作用的研究被引量：5: 2007年; 目的:克隆人诱导细胞死亡的DFF45样效应因子3(CIDE3)全长基因,构建真核表达质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并检测其促凋亡作用。方法:①提取人腹部皮下白色脂肪组织的总RNA,经RT-PCR获得CIDE3全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.l(+),构建重组质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并进行序列测定。②用脂质体法将pcDNA3.l(+)-CIDE3转染人宫颈癌细胞系HeLa细胞,通过TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:①经RT-PCR扩增得到特异性717 bp的目的片段,构建的重组质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3经序列测定,结果与Genbank发表的序列完全一致。②转染Hela细胞后,经Tunel染色法检测发现,转染pcDNA3.l(+)-CIDE3后有大约25%的细胞发生了凋亡,与转染空质粒pcDNA3.l(+)(<5%)及未转染质粒的细胞相比,其凋亡细胞明显增多。结论:成功克隆了人CIDE3全长基因,构建了真核表达质粒pcDNA3.l(+)-CIDE3,并验证了CIDE3基因可诱导细胞发生凋亡的生物学作用,为进一步研究CIDE3的生物学功能奠定了坚实基础。; 王淑芳李青姚丽程虹张静叶菁李繁烦李南林; 关键词：基因克隆真核表达凋亡

一种快速有效提取植物和真菌DNA和RNA的简易方法被引量：6: 2009年; 本文利用一种真菌核酸的快速提取方法提取了3种真菌的DNA和RNA,并将该法略作改进用于烟草DNA和RNA的提取。同时,通过低温保藏试验评价核酸提取液和提取产物的稳定性和有效性;利用凝胶电泳、PCR和RT-PCR等方法比较分析核酸质量;并将提取效果与传统方法或试剂盒的提取效果进行比较,以分析其有效性。结果表明,改进后的提取方法是一种简单、方便和有效的实验方法,不仅可用于真菌也可用于植物DNA和RNA提取,用这种方法提取得到的DNA和RNA在低温保存条件下比较稳定,能较长时间保持其原有活性。; 王学仁张改娜何涛郝建国贾敬芬; 关键词：真菌烟草

Axin在星形细胞肿瘤组织中的表达及其相关性研究: 检测Axin在星形细胞肿瘤组织中的表达并对其与临床病理参数间的相关性进行分析。方法通过RT-PCR的方法检查星形细胞肿瘤组织中Axin mRNA的表达;用免疫细胞化学染色的方法检测星形细胞肿瘤中Axin蛋白的表达,同时检...; 张丽英叶菁李青; 关键词：AXIN 星形细胞肿瘤 RT-PCR 免疫细胞化学; 文献传递

毛头鬼伞真菌具有抗烟草花叶病毒活性的y3基因的克隆及对烟草的转化被引量：4: 2010年; 【目的】蛋白质Y3具有抗烟草花叶病毒(TMV)活性并由y3基因编码。本文的目的是从真菌毛头鬼伞(Coprinus comatus)中克隆y3基因全长并在植物体中展现其对TMV的抑制活性。【方法】我们利用试剂盒5′-Full RACE Core Set(TaKaRa)扩增了y3基因cDNA5′-端未知序列,通过RT-PCR获得了全长序列,并把该全长序列与CaMV 35 S启动子和NOS终止子一起插入多克隆位点(MCS)构建了植物表达载体pCAMBIA1301-y3,用于农杆菌介导的烟草转化。【结果】y3基因全长534碱基对,包含1个开放阅读框(ORF),编码一条含130个氨基酸残基的肽链(GenBank检索号:GQ859168;EMBL:FN546262)。其cDNA序列和由它推到的氨基酸序列均与已发表的y3基因部分片段有高度相似性(94%)。Northern杂交分析证实了y3基因在转基因烟草中得到表达。接种TMV的转基因植株表现出抗TMV的活性。【结论】我们克隆了y3基因全长并得到了转基因植株。在转基因植株中,由于y3基因的表达改善了植株的抗病毒活性。y3基因的克隆和表达无疑为该基因的进一步研究奠定了基础。; 王学仁何涛张改娜郝建国贾敬芬; 关键词：COPRINUS 植物表达载体构建

国家自然科学基金(30671087)

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