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食用菌半纤维素酶系研究进展被引量：13: 2014年; 半纤维素是一类取之不尽而又亟待开发利用的碳水化合物。对食用菌半纤维素酶系的研究已经积累了诸多资料,主要包括β-1,4-内切木聚糖酶、β-木糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖苷酶、乙酰木聚糖酯酶、α-葡萄糖醛酸酶的研究。主要对半纤维素酶系,尤其是木聚糖酶的生物化学与分子生物学研究进行了简要概括,包括结构、酶学性质、基因的克隆与表达等,并综述了在食用菌生产中半纤维素酶活性的变化,最后展望了食用菌半纤维素酶系今后的主要研究方向。; 王孟兰赵妍陈明杰汪虹; 关键词：食用菌半纤维素酶木聚糖酶基因酶活

草菇谷胱甘肽还原酶基因受低温影响的表达研究被引量：4: 2015年; 谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase,GR）在真菌抵御逆境胁迫中起到重要作用,通过比对在草菇全基因组中获得编码gr的核苷酸序列。以对低温耐受性不同的草菇菌株V23（低温敏感型）和VH3（耐低温型）为试验材料,研究了低温胁迫对草菇菌丝gr的影响,并比较了该基因在V23和VH3中的表达差异。实时荧光定量PCR结果显示：在低温处理的最初2 h,低温敏感型菌株V23的gr相对表达量出现降低,到低温处理4～8 h时,其相对表达量分别上升至V23 0 h对照的1.78倍、1.05倍和1.36倍;耐低温型菌株VH3的gr相对表达量,在低温胁迫的最初2h时也呈现下降趋势,到低温处理4～6 h时,其相对表达量分别上升至VH3 0 h对照的1.47倍和1.41倍,但在低温处理8 h时,其相对表达量又降低至VH3 0 h对照的0.72倍。在正常生长和低温处理条件下,V23的gr相对表达量始终高于VH3,初步推测本试验中gr的高表达可能与草菇的耐低温能力无关。; 赵妍马丹丹姜威颜素雅陈明杰; 关键词：草菇实时荧光定量PCR

低温胁迫对草菇菌丝体糖原磷酸化酶基因表达的影响: 2014年; 在0℃低温胁迫下比较低温敏感型草菇(Volvariella volvacea)菌株V23和耐低温型菌株VH3糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase)pyg基因的表达情况。以α-微管蛋白为内参基因,采用实时荧光定量PCR技术测定pyg基因的表达,结果表明:低温处理4h时,V23的pyg基因相对表达量仅为0h的0.49倍,低温处理6h时有所回升,但仍低于处理0h的水平。VH3的pyg基因相对表达量从低温处理2h时急剧下降,至低温处理8h时达到最低值,仅为0h的0.28倍。随着低温处理时间的延长,pyg基因的相对表达量在V23和VH3中均呈下降趋势,相同的低温处理时间下,该基因在菌株V23中的下降幅度小于VH3中。; 赵妍汪虹李正鹏禄连静陈明杰; 关键词：草菇低温胁迫实时荧光定量PCR

草菇不同菌株木聚糖酶xyn基因的表达及其酶活性分析: 木聚糖酶是半纤维素酶系的重要组成部分,能够分解水稻、小麦等农作物秸秆中的半纤维素。研究探讨木聚糖酶相关基因及其功能,为进一步探讨木聚糖酶与草菇生物转化率之间的关系提供理论依据。首先通过生物信息学手段构建了草菇2个木聚糖酶...; 赵妍王梦兰陈明杰; 关键词：草菇木聚糖酶实时荧光定量PCR 系统进化树; 文献传递

基质高利用率灵芝菌株筛选方法的研究被引量：1: 2015年; 通过测定27株灵芝菌株的菌丝体生长速度,漆酶和纤维素酶相对活性及其栽培试验,运用多元线性回归分析法建立了菌丝体生长速度、漆酶和纤维素酶相对活性与产量的关系,确定出菌丝体的生长速度,漆酶和纤维素酶相对活性对产量的贡献力。结果表明:这些指标与产量有较高的线性相关。利用这些指标来预测杂交菌株的产量和选择灵芝杂交育种中的亲本,具有简便、快速等优点,可以有效缩短杂交育种的周期。; 王天娇唐传红张劲松杨焱徐凯刘艳芳唐庆九; 关键词：灵芝杂交育种

草菇β-木糖苷酶活性及其编码基因xyl的转录表达研究被引量：1: 2014年; 本研究首先对草菇β-木糖苷酶编码序列Xyl进行了生物信息学分析,然后以对硝基木糖苷为底物测定了不同菌株中的木糖苷酶活性,并进一步比较了木糖苷酶基因xyl在草菇不同菌株中的相对表达量。结果表明:Xyl属于糖苷水解酶第43家族,由534个氨基酸残基组成,预测分子量为58.82ku,等电点为4.99;系统进化树分析表明,Xyl的氨基酸序列与木腐菌相似性较高,最高值达到61%,且草菇与木腐菌黄孢原毛平革、毛韧革菌等亲缘关系较近,但与同为草腐菌的灰盖鬼伞遗传距离较远;草菇不同菌株的β-木糖苷酶活性测定结果显示,Vb1的β-木糖苷酶活性最高,0229的β-木糖苷酶活性与A8之间无显著性差异;Real-time PCR结果显示,Vb1的xyl基因相对表达量也最高,三个菌株的xyl基因相对表达量依次为Vb1>A8>0229。; 王孟兰赵妍黄建春陈明杰; 关键词：草菇 Β-木糖苷酶实时荧光定量PCR 生物信息学

低温胁迫下草菇海藻糖磷酸化酶基因表达变化研究被引量：2: 2014年; 海藻糖是真菌抵御逆境的重要渗透调节物质之一,其合成与分解受海藻糖磷酸化酶(trehalose phosphorylase,TP)调控。以草菇低温敏感型菌株V23和耐低温型菌株VH3为试验材料,研究了低温胁迫对草菇海藻糖磷酸化酶基因的影响,并比较了海藻糖磷酸化酶基因在两个菌株中的转录表达差异。实时荧光定量RT-PCR结果显示:耐低温型菌株VH3的TP基因在低温处理2 h时表达量升高,此后逐渐下降,低温敏感型菌株V23的TP基因在整个低温处理过程中一直呈下降趋势,并且在相同低温处理时间下,该基因在VH3中的表达量下降幅度要小于V23中的。初步推测TP基因的高表达与草菇的耐低温能力相关。; 李亚鹏陈明杰赵妍汪虹; 关键词：草菇 RT-PCR

草菇不同菌株木聚糖酶xyn基因的表达及其酶活性分析被引量：3: 2014年; 木聚糖酶是半纤维素酶系的重要组成部分,能够分解水稻、小麦等农作物秸秆中的半纤维素。研究探讨木聚糖酶相关基因及其功能,为进一步探讨木聚糖酶与草菇生物转化率之间的关系提供理论依据。首先通过生物信息学手段构建了草菇2个木聚糖酶基因xyn1和xynII编码氨基酸序列的系统进化树,然后从生物转化率不同的草菇菌株分别提取各自的RNA,反转录为cDNA后,采用实时荧光定量PCR技术分析了xyn1和xynII基因的转录表达情况;最后应用DNS法对这些菌株中的木聚糖酶活性进行了测定。研究结果表明,xyn1编码的氨基酸序列与草腐菌相似性较高,而xynII编码的氨基酸序列与木腐菌遗传差异较小。在木聚糖酶活性测定和实时荧光定量PCR结果中,不同菌株的木聚糖酶活性趋势与xynII的转录表达趋势相似,均呈现依次递减。草菇的木聚糖酶活性与其生物转化率之间存在正相关性,推测草菇不同菌株木聚糖酶活性差异可能表现在转录水平上的差异。; 王孟兰赵妍陈明杰汪虹; 关键词：草菇木聚糖酶实时荧光定量PCR 系统进化树

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上海市科技兴农重点攻关项目(20111-2)