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应用生物素-链霉亲和素的酶联免疫吸附法检测谷物中的玉米赤霉烯酮被引量：10: 2009年; 基于生物素-链霉亲和素的酶联免疫吸附法(ELISA),建立了玉米赤霉烯酮(ZEN)的ZEN-ELISA检测方法。该方法的检测灵敏度为0.8 ng/ml,批内、批间变异系数分别为5.1%和8.6%,平均加样回收率为91.2%;抗ZEN单克隆抗体与玉米赤霉醇的交叉反应度为12.3%,而其与赭曲霉素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉素B1无交叉反应;相关试剂在4℃存180 d后各检测参数基本无变化;该方法与商品ELISA试剂盒对同一样品ZEN测定结果的相关系数为0.943 2。说明该方法的特异性和稳定性较好,测定结果准确,可用于ZEN的大量筛查。; 马智鸿黄飚屠蔷高蕾张珏王柯; 关键词：真菌毒素

T-2毒素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析被引量：9: 2010年; 以时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)方法建立快速灵敏的T-2毒素的全自动检测方法。采用T-2-BSA包被96孔板作为固相抗原,与游离的T-2竞争有限的抗T-2单克隆抗体,以Eu3+标记的羊抗鼠抗体示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立T-2-TRFIA。同时对这一方法的稳定性、灵敏度、回收率和特异性进行考核。此方法灵敏度为0.2μg/L,测量范围0.2～500μg/L,批内变异为7.5%,批间变异为12.7%,平均回收率为89.6%。与赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1、牛血清白蛋白无交叉反应。10条不同时间进行的间接竞争T-2-TRFIA的效应点均值ED80、ED50和ED20分别为2.66,6.97,29.11μg/L。同时,用TRFIA和ELISA试剂盒同时检测T-2毒素,在ELISA和TRFIA产品的共同可测范围之内,两者的相关系数为0.926。; 杨润琳计融江涛汤鲁宏朱海李文新黄飚; 关键词：单克隆抗体

用双标记时间分辨荧光免疫法同时检测黄曲霉毒素B_1和赭曲霉毒素A被引量：12: 2009年; 目的采用双标记时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术建立同时检测黄曲霉毒素B1(AFB1)和赭曲霉毒素A(OTA)的高灵敏分析方法。方法将AFB1-HRP、OTA-BSA包被96孔板为固相抗原,与游离AFB1、OTA共同竞争有限的抗AFB1多克隆抗体或抗OTA单克隆抗体,以稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体、Sm3+标记羊抗鼠抗体进行示踪,采用间接竞争免疫分析方法在解离增强荧光免疫分析体系中建立AFB1/OTA-TRFIA。结果该方法检测AFB1的灵敏度为0.02μg/L,测量范围为0.02～100μg/L,批内和批间变异系数(CV)分别为3.2%和7.3%,平均回收率为88.1%;检测OTA的灵敏度为0.05μg/L,测量范围为0.05～50μg/L,批内和批间CV分别为2.9%和7.9%,平均回收率为89.9%,AFB1/OTA-TRFIA检测时,AFB1与OTA不相互干扰。样品经双标记AFB1/OTA-TRFIA与单标记AFB1-TRFIA、OTA-TRFIA同时检测,与AFB1-TRFIA两者检测AFB1结果的相关系数为0.972,与OTA-TRFIA两者检测OTA结果的相关系数为0.981,说明结果相符。结论AFB1/OTA-TRFIA灵敏度高,可测范围宽,稳定性好,一次操作可以同时得到AFB1、OTA的两个结果,是一种简便、快速、经济的可进行大批量样品筛查的方法。; 黄飚张珏马智鸿张艺朱岚金坚谢敏浩; 关键词：黄曲霉毒素B1 赭曲霉毒素A 时间分辨荧光免疫分析食品检测

脱氧雪腐镰刀烯醇时间分辨免疫法的建立被引量：4: 2009年; 目的:利用抗脱氧雪腐镰刀烯醇多克隆抗体及其人工抗原,采用时间分辨免疫荧光技术建立间接竞争脱氧雪腐镰刀烯醇时间分辨免疫检测方法(DON-TRFIA)。方法:以DON人工抗原(DON-BSA)包被微孔板,与DON标准或样品中的DON共同竞争结合抗DON多克隆抗体,然后用稀土离子Eu3+标记羊抗兔抗体进行示踪检测,并对建立DON-TRFIA进行方法学的考核。结果:该方法的灵敏度为0.01ng/ml,检测范围为0.01～100ng/ml,IC50为4.84ng/ml,批内、批间变异率均小于10%。不同样品添加回收实验表明小麦、玉米、啤酒、面包回收率分别为89.41%～123.2%、115.6%～123.6%、80.35%～118%、87%～92.45%。玉米样品检测结果表明DON-TRFIA与商品化DON-ELISA试剂盒结果高度相关,具有较好的一致性。结论:DON-TRFIA是目前已见报道文献中最灵敏的DON免疫检测法,具有很好的应用前景。; 高雷黄飚李秋萍张莲芬金坚; 关键词：生物毒素

氯霉素的BAS-时间分辨荧光免疫分析被引量：3: 2009年; 采用基于生物素-亲和素系统(BAS)的时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)建立高灵敏的氯霉素(CAP)全自动检测方法。以亲和素包被板,生物素-CAP-OVA与游离CAP竞争限量抗CAP多克隆抗体,用铕标记的羊抗兔IgG示踪。该方法的灵敏度为0.018ng/mL,效应点ED20、ED50、ED80分别为0.092、1.339、39.275ng/mL,与甲砜氯霉素、青霉素、诺氟沙星的交叉反应率均小于0.1%,批内和批间的变异系数分别为4.4%和11.8%。向蜂蜜和鸡蛋样品添加0.1～10ng/mL浓度的CAP,平均回收率分别为110.3%和92.8%。检测结果与ELISA试剂盒有良好的相关性。结果表明,CAPBAS-TRFIA法灵敏度高、特异性好、操作简便,适于大样本筛查,有良好的应用前景。; 张艺黄飚王柯张珏王雪金坚; 关键词：氯霉素时间分辨荧光免疫分析法生物素-亲和素系统

氯霉素的直接竞争时间分辨荧光免疫检测法被引量：2: 2009年; [目的]采用时间分辨荧光技术建立氯霉素(CAP)直接竞争免疫检测法(CAP TRFIA)。[方法]以羊抗鼠IgG二抗为固定相,游离CAP与生物素化的CAP人工抗原(CAP-BSA)共同竞争限量的CAP抗体;用铕标记的链霉亲和素示踪。[结果]该方法的灵敏度为0.016 ng/ml,用于牛奶样品检测的添加回收率为89.6%,批内和批间变异系数分别为5.5%和10.1%,与甲砜霉素的交叉反应率<0.01%。[结论]CAP TRFIA直接竞争法灵敏度高、特异性好、性能稳定,适于高通量筛查,有良好的应用前景。; 张艺黄飚王柯张珏朱岚马智鸿周彬; 关键词：氯霉素时间分辨荧光免疫分析法牛奶

应用生物素-链霉亲和素的时间分辨荧光免疫分析检测玉米赤霉烯酮被引量：3: 2009年; 采用基于生物素（Biotin）-链霉亲和素（Strepavidin）的时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）技术建立了快速灵敏的玉米赤霉烯酮（ZEN）检测方法。以strepavidin包被板条，加入生物素化的ZEN—BSA，结合在板条上的ZEN—BSA与标准／样本中的游离ZEN共同竞争限量的抗ZEN单克隆抗体，用稀土离子Eu“标记的羊抗鼠IgG进行示踪，建立了间接竞争的ZEN-TRFIA。该方法的检测灵敏度为0．2ng／ml，测量范围是0．2～200．0ng／ml，批内、批间变异系数分别为5．7％和8．3％，平均回收率为91．1％。与玉米赤霉醇的平均交叉反应是12．3％，与赭曲霉素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉素B1无交叉反应，说明该方法的特异性较好。相关试剂在4℃放6个月后各检测参数基本无变化，说明该方法稳定。样品同时用ZEN—TRFIA和商品ELISA试剂盒测定样品ZEN含量，两者的相关系数为0．9664，说明该方法测量准确。ZEN—TRFIA具有测量准确、检测灵敏度高、检测范围宽、操作简便、标记物稳定等优点，适合于ZEN大量筛查的应用。; 马智鸿黄飚屠蔷高蕾张珏王柯; 关键词：生物素-链霉亲和素

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国家高技术研究发展计划(2008AA10Z415)