国家教育部博士点基金(20050159005)
- 作品数：16 被引量：84H指数：6
- 相关作者：薛一雪刘云会张震刘丽波夏春义更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院中国医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 低频超声对C6胶质瘤细胞TNF-α表达的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨低频超声对大鼠C6胶质瘤细胞内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的影响,为进一步研究低频超声开放血脑肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法应用1MHz低频超声辐照体外培养C6胶质瘤细胞后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测细胞培养液中TNF-α的含量及胶质瘤细胞中TNF-α mRNA的表达。结果ELISA结果显示C6胶质瘤细胞在低频超声辐照后1.5h～3h,其细胞培养液中TNF-α的含量达高峰。RT-PCR结果亦证明了低频超声辐照后1.5h～3h,TNF-α mRNA的表达水平与对照组相比达高峰。结论低频超声辐照可刺激大鼠C6胶质瘤细胞TNF-α分泌增加,TNF-α的表达上调可能在低频超声开放血肿瘤屏障的过程中发挥一定作用。
- 樊立林张震夏春义薛一雪刘云会
- 关键词：低频超声肿瘤坏死因子-Α血脑屏障胶质瘤
- 低频超声体外诱导C6胶质瘤细胞凋亡的研究被引量：7
- 2009年
- 目的应用低频超声辐照体外培养的C6胶质瘤细胞,探讨低频超声对肿瘤细胞的影响。方法应用不同强度(10%～100%)的低频超声(1MHz,20s)作用于体外培养的C6细胞,采用MTT法检测光密度(OD)值,计算超声辐照后C6细胞的生长率,应用TUNEL法观察C6细胞的凋亡形态及计算细胞凋亡率。结果低频超声辐照体外培养的C6胶质瘤细胞后,在超声强度<50%范围内,随超声强度增加C6细胞的生长率显著下降,细胞形态出现核浓缩和核碎裂等凋亡改变,细胞凋亡率随超声辐照强度增加而增加;当超声强度>50%时,C6细胞的生长率和凋亡率不随超声强度增加而改变。C6胶质瘤细胞凋亡率与生长率显著负相关。结论低频超声辐照能够在体外诱导C6胶质瘤细胞凋亡。
- 张震杨松涛樊立林刘云会薛一雪
- 关键词：低频超声C6细胞凋亡
- 神经胶质瘤nNOS和cGMP表达水平与其病理级别相关关系的研究被引量：8
- 2006年
- 目的：分析神经胶质瘤中神经元型一氧化氮合酶（nNOS）和cGMP表达水平与病理级别的相关关系。方法：免疫组化法和Westem blot法测定标本中nNOS的表达水平；放射免疫法测定相同组织中cGMP的表达水平。结果：HE染色显示，36例神经胶质瘤中Ⅰ级为11例，Ⅱ级为14例，Ⅲ级为11例。免疫组化结果显示，在病理级别为I、Ⅱ和Ⅲ级的神经胶质瘤中，nNOS的平均光密度值（OD）分别为0．1717±0．013 6、0．2744±0．0150和0．3684±0．015 0，Ⅰ、Ⅱ级比较及Ⅱ、Ⅲ级比较，差异均有统计学意义，P值均为0．000；神经胶质瘤中nNOS表达水平与其病理级别Ⅰ～Ⅲ级显著正相关，r=0．984，P=0．000，呈Ⅰ〈Ⅱ〈Ⅲ级。Westem blot结果显示，在病理级别为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的神经胶质瘤中，nNOS与β-actin的整合光密度值（IDV）之比分别为1．0900±0．0347、1．2242±0．0292和1．5398±0．0433，Ⅰ、Ⅱ级比较及Ⅱ、Ⅲ级比较，差异均有统计学意义，P值均为0．000；神经胶质瘤中nNOS表达水平与其病理级别Ⅰ～Ⅲ级显著正相关，r=0．953，P=0．000，呈Ⅰ〈Ⅱ〈Ⅲ级。放射免疫结果显示，在病理级别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的神经胶质瘤中，cGMP的浓度分别为（0．0034±4-0．0009）、（0．0063±0．0013）和（0．0132±0．0049）pmol／mg，Ⅰ、Ⅱ级比较及Ⅱ、Ⅲ级比较，组间差异均有统计学意义，P值分别为0．017和0．000；神经胶质瘤中以MP表达水平与其病理级别Ⅰ～Ⅲ级显著正相关，r=0．796，P=0．000，呈Ⅰ〈Ⅱ〈Ⅲ级。结论：神经胶质瘤中nNOS和cGMP表达水平与其病理级别Ⅰ～Ⅲ级显著正相关，提示利用缓激肽（bradykinin，BK）及其类似物开放血肿瘤屏障的疗效差异可能与两者表达水平有关。
- 杨智航薛一雪刘云会刘丽波刘丽张桦
- 低频超声开放大鼠血脑屏障的研究被引量：6
- 2007年
- 目的探讨1MHz低频超声在不同功率、不同照射时间对大鼠脑细胞及血脑屏障的影响,寻求开放血脑屏障的最佳条件。方法119只Wistar大鼠颅顶右前方开窗后超声照射,采用伊文思蓝(EB)法检测血脑屏障通透性的变化;应用透射电镜观察内皮细胞紧密连接的变化。结果1MHz、12mW照射20s或30s,照射后3hrs,血脑屏障通透性均显著高于对照组(P<0.05),电镜下微血管内皮紧密连接呈开放状态,照射时间30s时,可见部分神经元核膜变形;照射后12hrs,与对照组相比血脑屏障通透性无明显差异(P<0.05),且部分神经元核膜的变形无明显恢复。1MHz、8mW照射的各组与对照组比较血脑屏障通透性无明显差异(P<0.05)。结论1MHz、12mW、照射时间20s可能是可逆性地开放血脑屏障的适宜条件。
- 张震夏春义薛一雪刘云会
- 关键词：低频超声血脑屏障通透性
- 低频超声开放大鼠血脑肿瘤屏障与TNF-α表达之间的关系被引量：1
- 2008年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与低频超声开放大鼠血脑肿瘤屏障之间的关系。方法应用1MHz低频超声辐照C6胶质瘤大鼠,采用伊文思蓝(EB)法检测血脑肿瘤屏障通透性的变化,应用透射电镜观察脑微血管内皮细胞紧密连接的变化,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脑组织中TNF-α含量的变化。结果低频超声辐照后大鼠血脑肿瘤屏障的通透性逐渐增加,在辐照后1.5h￣3h达高峰,12h恢复至正常水平;透射电镜显示低频超声辐照后,0.5h至9h血管内皮细胞的紧密连接均有不同程度的开放,至12h时关闭;低频超声辐照后大鼠胶质瘤侧脑组织中TNF-α含量逐渐增加,在1.5h￣3h达高峰,12h恢复至正常水平。结论低频超声辐照大鼠脑胶质瘤模型后引起TNF-α量的变化与血脑肿瘤屏障通透性变化的趋势及达到峰值的时间相一致。TNF-α的增加可能是低频超声辐照开放大鼠脑胶质瘤血肿瘤屏障的重要因素之一。
- 樊立林张震夏春义薛一雪刘云会
- 关键词：低频超声肿瘤坏死因子-Α
- ATP敏感性钾通道蛋白在缓激肽选择性开放血肿瘤屏障中的表达被引量：1
- 2007年
- 目的探讨ATP敏感性钾通道蛋白在缓激肽选择性开放血肿瘤屏障中的作用。方法建立大鼠脑胶质瘤模型,颈内动脉灌注缓激肽后,采用免疫组化SABC法和Western blot法测定肿瘤组织ATP敏感性钾通道蛋白的功能亚基Kir6.2的分布和表达的变化。结果脑胶质瘤大鼠经颈内动脉灌注缓激肽后,其肿瘤内血管内皮细胞的Kir6.2蛋白表达比对照组显著增多,且以灌注后10 min增加最为显著。结论ATP敏感性钾通道蛋白表达上调可能是缓激肽选择性开放血肿瘤屏障的重要机制之一。
- 张振彪刘云会谷艳婷薛一雪
- 关键词：缓激肽ATP敏感性钾通道
- 缓激肽诱导胶质瘤细胞内cAMP反应元件结合蛋白磷酸化的实验研究被引量：4
- 2006年
- 目的观察缓激肽作用下,大鼠C6胶质瘤细胞中转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element bind-ing protein,CREB)磷酸化的动态变化,并探讨其可能的意义。方法应用免疫细胞化学和Western blot方法,观察1μmol.L-1缓激肽作用C6胶质瘤细胞在不同时相点(0,5,10,15,20,30min)CREB磷酸化的动态变化。结果1μmol.L-1缓激肽作用C6胶质瘤细胞的5到30min的各时相点均能检测到CREB的磷酸化(P<0.01),其中以15min的磷酸化最强(P<0.01)。结论缓激肽可促进大鼠C6胶质瘤细胞中转录因子CREB的磷酸化,此作用可能与其促进血肿瘤屏障的选择性开放有关。
- 王振华薛一雪刘丽波王萍
- 关键词：神经胶质瘤缓激肽CAMP反应元件结合蛋白
- 缓激肽开放血瘤屏障过程中诱发快速耐受性的机制探讨被引量：7
- 2006年
- 目的探讨缓激肽(bradykinin,BK)开放血瘤屏障过程中,HSF1和HSP70对BK诱发快速耐受性的影响。方法首先通过立体定向法接种C6细胞制备恶性胶质瘤大鼠模型。模型制备成功后,经颈内动脉缓慢小剂量给予缓激肽(或生理盐水)10μg.kg-1.min-1,动态观察肿瘤组织内热休克因子1(heatshockfactor1,HSF1)蛋白单体和三聚体的活性及热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)的表达(Westernblot法)。免疫组织化学技术检测血瘤屏障上紧密连接蛋白occludin的变化。利用伊文思蓝连续监测缓激肽处理后的C6恶性胶质瘤大鼠血瘤屏障的通透性,同时电镜观察血瘤屏障的病理学改变。结果缓激肽作用于C6大鼠后,紧密连接增宽,血瘤屏障通透性增加,伊文思蓝渗出量分别较对照组增加了5.19μg.g-1(0min),5.06μg.g-1(5min),11.35μg.g-1(10min,P<0.05),21.54μg.g-1(15min,P<0.01),12.81μg.g-1(30min,P<0.05),7.28μg.g-1(60min)。肿瘤组织内HSF1蛋白三聚体活性和HSP70蛋白的表达逐渐增加,且分别于处理后的5min和30min时达高峰(P<0.01,与对照组相比),最大值为对照组的2～3倍。免疫组化检测结果发现,处理后的C6动物,其血瘤屏障的紧密连接蛋白occludin表达减少,15min后逐渐增加。结论缓激肽作用于血瘤屏障后,激活了HSF1并促进了hsp70蛋白的表达。增加的hsp70可能通过发挥分子伴侣作用来修复紧密连接蛋白,进而诱发快速耐受性。
- 秦丽娟谷艳婷薛一雪
- 关键词：缓激肽血瘤屏障热休克蛋白70热休克因子1
- 缓激肽对C6胶质瘤细胞IL-1β表达的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨缓激肽对大鼠C6胶质瘤细胞内白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的影响,为进一步研究缓激肽开放血肿瘤屏障的机制提供实验依据。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量技术和放射免疫法分别检测缓激肽作用C6胶质瘤细胞后,胶质瘤细胞IL-1β mRNA及细胞培养液中IL-1β的含量。结果RT-PCR结果显示缓激肽作用15min后,IL-1β mRNA的表达水平较对照组升高(P<0.05),然后逐渐下降;放射免疫法结果亦证明了C6胶质瘤细胞在缓激肽作用15min后,其细胞培养液中IL-1β的含量最高。结论缓激肽可刺激大鼠C6胶质瘤细胞中IL-1β的分泌增强,IL-1β的表达上调可能在缓激肽增加血肿瘤屏障通透性的过程中发挥一定作用。
- 王振华薛一雪
- 关键词：神经胶质瘤缓激肽白细胞介素-1Β血肿瘤屏障
- 缓激肽对C6胶质瘤细胞分泌白细胞介素-6的影响
- 2007年
- 目的:白细胞介素-6(IL-6)与脑胶质瘤的恶性增殖密切相关,本文探讨缓激肽作用大鼠C6胶质瘤细胞后对IL-6表达的影响。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和放射免疫法分别检测1μmol·L-1缓激肽作用下,C6胶质瘤细胞内及细胞培养液中IL-6的表达水平。结果:RT-PCR结果显示缓激肽作用于C6胶质瘤细胞,在不同时相点(0,5,10,15,30,60min)均有IL-6mRNA的表达,各组间比较无显著性差异(P>0.05);放射免疫法结果显示,细胞培养液中未检测到IL-6的表达。结论:缓激肽作用C6胶质瘤细胞60min以内不引起IL-6的表达增强,这为缓激肽临床应用的安全性提供了有利的实验依据。
- 王振华薛一雪
- 关键词：神经胶质瘤缓激肽白细胞介素-6
