安徽省高校省级自然科学研究项目(2006kj394B)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 相关作者：夏俊唐晓燕崔秀云陈俊霞章菊更多>>
- 相关机构：蚌埠医学院大连医科大学重庆医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 核糖核酸酶抑制因子对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡和侵袭的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:将核糖核酸酶抑制因子(RI)转染乳腺癌细胞株MDA-MB-231中,探讨RI对细胞凋亡和侵袭的影响。方法:(1)应用脂质体LipofectamineTM2000分别将重组表达载体pLNCX-RI和空载体pLNCX导入MDA-MB-231细胞,G418筛选阳性克隆并扩增传代。RT-PCR和Western blot检测RI表达。(2)流式细胞术、Transwell细胞侵袭实验分别观察RI对乳腺癌细胞凋亡、侵袭的影响。(3)RT-PCR和West-ern blot法检测Survivin mRNA和蛋白的表达,Western blot方法检测Caspase-3蛋白的活化情况,初步探讨RI诱导乳腺癌细胞凋亡的相关机制。(4)RT-PCR和Western blot法检测CD24mRNA和蛋白的表达,初步探讨RI抑制细胞侵袭的机制。结果:(1)成功构建表达外源性RI的亚克隆细胞系MDA-MB-231/pLNCX-RI。(2)与未转染的MDA-MB-231细胞及转染空载体的MDA-MB-231/pLNCX细胞相比,MDA-MB-231/pLNCX-RI细胞凋亡率增加(P<0.01);细胞穿膜数减少(P<0.01);Survivin mRNA和蛋白的表达量下降(P<0.01),且能活化Caspase-3;CD24 mRNA和蛋白的表达量亦下降(P<0.01)。结论:(1)外源性RI基因在乳腺癌MDA-MB-231细胞中的稳定表达可以通过抑制Survivin的表达和激活Caspase-3促进细胞凋亡,并能通过抑制CD24表达降低细胞侵袭力。
- 周继红唐晓燕赵锐王慧夏俊
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子人乳腺癌细胞细胞侵袭细胞凋亡
- 核糖核酸酶抑制因子与人乳腺癌细胞恶性增殖的相关性研究被引量：3
- 2008年
- 目的：探讨核糖核酸酶抑制因子（ribonuclesae inhibitor,RI）的表达与人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR-3恶性增殖之间的关系。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测RI基因表达水平,细胞免疫化学技术检测RI蛋白表达情况。结果：人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖速度、S期所占比例均小于人乳腺癌细胞MDA-MB-231、SKBR-3（P〈0.05~P〈0.01）,且MCF-7细胞中RI基因表达水平、蛋白表达水平明显高于MDA-MB-231、SKBR-3细胞（P〈0.01）。结论：RI与人乳腺癌细胞恶性增殖生长有一定的相关性。
- 唐晓燕章菊夏俊陈俊霞崔秀云
- 关键词：乳腺肿瘤核糖核酸酶抑制因子细胞株
- 转染人核糖核酸酶抑制因子对乳腺癌细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2009年
- 目的:利用脂质体转染技术上调乳腺癌MDA-MB-231细胞中核糖核酸酶抑制因子(ribonuc lease inh ib itor,R I)水平,探讨R I对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及细胞周期的影响。方法:采用脂质体转染法,将R I基因转入乳腺癌MDA-MB-231细胞,经G418筛选后获得稳定高表达R I的亚克隆细胞系MDA-MB-231/pLNCX-R I。RT-PCR、W estern-b lot等方法鉴定R I在转染细胞中的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长情况,流式细胞术检测细胞周期变化。结果:成功构建了稳定高表达R I的亚克隆细胞系MDA-MB-231/pLNCX-R I;MTT结果显示,转染的R I基因能抑制细胞恶性增殖(P<0.01);细胞周期分析显示转染的R I基因使细胞停留在G0/G1期,S期细胞明显减少(P<0.01)。结论:R I能抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231的恶性增殖。
- 唐晓燕夏俊张克昌陈俊霞崔秀云
- 关键词：核糖核酸酶抑制因子乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞增殖细胞周期
