中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2007CHX04)
- 作品数:6 被引量:14H指数:2
- 相关作者:陈乃宏苑玉和孙建栋胡金凤刘岩更多>>
- 相关机构:中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- MPP^+抑制PC12细胞BDNF表达
- 2009年
- 研究MPP+(1-methyl-4-phenylpyridinium)对PC12细胞的毒性作用及机制。采用MTT法检测细胞存活率,Western blotting检测蛋白变化及双荧光素酶报告基因系统检测转录因子活性。结果表明,MPP+能够显著抑制细胞存活率,且呈剂量依赖性;而且MPP+能够降低PC12细胞神经营养因子BDNF(brain-derived neurotrophic factor)的蛋白水平,并能够抑制ERK(extracellular signal-regulated proteinkinase)的磷酸化,而对CaMKⅡ活性无影响,同时能够显著抑制BDNF的转录因子CREB(cAMP response element binding protein)的磷酸化,并抑制其转录活性。因此MPP+可能通过抑制ERK活性而抑制其下游转录因子CREB的活性,最终导致BDNF的表达减弱。
- 苑玉和孙建栋胡金凤陈乃宏
- 关键词:脑源性神经营养因子细胞外信号调节蛋白激酶CAMP反应元件结合蛋白
- α-synuclein修饰与帕金森病的研究进展被引量:2
- 2010年
- α-synuclein基因是最早发现的与帕金森病(Parkinson's disease,PD)相关的基因,在部分家族性PD患者中存在该基因的突变。无论是家族性还是散发性PD,其特征性包涵体——Lewy小体的主要成分都是聚集的α-synuclein蛋白,从组成来看,α-synuclein的氨基酸序列中存在众多能被修饰的位点,并且在α-synuclein转基因鼠中也检测到了以磷酸化、硝基化以及泛素化形式存在的α-synuclein聚集体。α-synuclein的不同修饰可能影响其自身的聚集特性及毒性作用,进而在PD的发病进程中发挥重要作用。因此,探讨与PD相关的α-synuclein的磷酸化、硝基化及泛素化修饰,对于更清楚地了解α-synuclein修饰与PD间的关系有重要意义。
- 马开利陈乃宏
- 关键词:Α-SYNUCLEIN帕金森病磷酸化泛素化
- MPP+对PC12细胞ERK信号通路影响的研究
- 研究MPP(1-methyl-4-phenylpyridinium)对PC12细胞的毒性作用及机制。采用MTT方法检测细胞存活率,Western blot检测蛋白变化及双荧光素酶报告基因系统检测转录因子活性。结果表明MP...
- 孙建栋陈乃宏
- 关键词:MPP+BDNFERKCREB
- 文献传递
- α-synuclein C端截短体的胞内分布被引量:1
- 2010年
- 目的研究α-synuclein的4种C端截短体胞内的表达分布情况。方法PCR法获得α-synuclein的4个C端截短体基因片段,分别克隆入pEGFP-N1载体,并转染MN9D细胞、PC12细胞及SH-SY5Y细胞,于Confocal荧光显微镜下观察α-synuclein 4个C端截短体胞内的表达分布情况。结果α-synuclein的不同C端截短体胞内分布明显不一致,表现为随着C端部分的增长,α-synuclein截短体向核分布的趋势增强。结论α-synuclein的胞内定位与其C端密切相关,并且整个C端序列都可能在其核分布中发挥重要作用。
- 马开利苑玉和胡金凤孙建栋刘岩李博宇陈乃宏
- 关键词:Α-SYNUCLEINPC12细胞SH-SY5Y细胞
- 帕金森病模型大鼠中脑α-突触核蛋白增加被引量:9
- 2010年
- 目的观察鱼藤酮对大鼠中脑α-突触核蛋白(α-SYN)的影响。方法SD大鼠长期低剂量皮下注射1.0mg·kg-1·d-1的鱼藤酮,建立帕金森病(PD)动物模型。采用旷场实验评价动物行为学改变,观察大鼠5min的活动情况。免疫荧光化学方法检测中脑部位TH阳性神经元数目的变化。免疫组织化学和Western blot方法检测中脑部位α-SYN的蛋白水平的改变。结果同对照组相比,鱼藤酮实验组动物5min的正中格停留时间明显延长(P<0.05),方格穿行次数明显减少(P<0.05),竖起时间和次数明显减少(P<0.01);中脑部位TH阳性神经元数目明显减少(P<0.05),α-SYN蛋白水平明显增加(P<0.05)。结论给予鱼藤酮能够使SD大鼠出现运动障碍,中脑部位TH阳性神经元数目减少,该现象可能与大鼠中脑部位α-SYN蛋白水平增加有关。
- 孙建栋苑玉和刘岩王晓锋陈乃宏
- 关键词:帕金森病鱼藤酮Α-突触核蛋白酪氨酸羟化酶旷场实验中脑
- α-Synuclein与MPP^+细胞毒性协同作用的研究
- 2009年
- 目的模拟与帕金森病发病密切相关的遗传因素与环境因素,研究α-synuclein与MPP+对细胞的毒性作用。方法RT-PCR方法扩增α-synuclein基因片段;分子克隆技术构建哺乳动物细胞表达载体;脂质体法转染;Western blot,MTT方法,双报告基因检测法和显微镜观察,研究过表达α-synuclein和MPP+对细胞存活率及NFκB信号通路的影响。结果MPP+和α-synuclein均能够显著抑制细胞存活率,二者共同作用时抑制作用更加明显;而且研究发现α-synuclein能够抑制由转录因子NFκB介导的基因表达,MPP+能够进一步增强其抑制作用。结论在遗传背景发生改变时,细胞对外界环境中的毒素更加敏感,提示帕金森病的发病存在某种遗传易患性。
- 苑玉和孙建栋胡金凤陈乃宏
- 关键词:帕金森病Α-SYNUCLEINMPP+NFΚB
- α-突触核蛋白对PC12细胞的毒性机制
- 目的研究α-突触核蛋白和MPP对细胞的毒性作用机制。方法RT-PCR方法制备α-突触核蛋白的cDNA片段;酶切构建哺乳动物细胞表达载体;脂质体法转染;MTT方法、双报告基因检测和显微镜观察,Western blot,研究...
- 李博宇苑玉和陈乃宏
- 关键词:突触核蛋白MPP+NFΚB
- 文献传递
- 糖原合成酶激酶3β转基因细胞模型的建立被引量:2
- 2009年
- 目的建立GSK3β(糖原合成酶激酶3β)转基因细胞模型。方法RT-PCR方法扩增GSK3β基因片段;分子克隆技术构建哺乳动物细胞表达载体;脂质体法转染PC12细胞;Western blot验证稳定株;染色质染色法和流式细胞术检测细胞凋亡;MTT法确定细胞接种条件。结果成功获得GSK3β融合载体;并建立GSK3β转基因细胞株;转基因组中GSK3β蛋白表达量明显高于对照组,染色质明显浓染甚至出现凋亡小体,去血清后该变化更加明显;GSK3β转基因组早期凋亡的细胞含量比对照组明显增多;确立了转基因细胞筛选化合物的接种条件。结论成功建立GSK3β转基因细胞模型。
- 苑玉和孙建栋张威胡金凤陈乃宏
- 关键词:GSK3Β凋亡
- Protective Effect of Lithium Chloride on MPTP and Rotenone-Treated PC12 Cell
- Aim To study the protective effect and potential mechanism of lithium chloride on MPTP and rotenone-induced PC...
- 赵明陈乃宏
- 关键词:MPTPROTENONE
- 文献传递