广东省科技计划工业攻关项目(2007B030702001)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：陆家海彭敬陆杰吴蒙李改瑞更多>>
- 相关机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- H5N1禽流感病毒HA与NA基因克隆及分泌表达被引量：2
- 2011年
- 目的克隆和表达H5N1型流感病毒血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因,为制备抗体和亚单位疫苗打基础。方法采用PCR技术扩增H5N1型流感病毒H5A和N1A基因,克隆入含有醇氧化酶-1(AOX1)启动子和分泌信号肽序列的巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPIC9K中,构建重组载体;经电穿孔转化酵母宿主菌GS115,筛选高拷贝重组转化子,筛选后摇瓶培养,1%甲醇诱导表达;诱导培养上清经聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白免疫印迹(Western-blot)检测蛋白表达情况。结果电泳和测序证实成功构建酵母表达载体pPIC9K-H5A和pPIC9K-N1A,重组蛋白在毕赤酵母中可以高效表达,表达蛋白分子量大小约为64和52 kD,第3和第4天表达量最高;Western-blot检测显示,目的蛋白能与H5亚型的AIV血清结合。结论成功克隆并表达H5N1型流感病毒HA、NA基因序列,为诊断试剂和疫苗开发等进一步研究奠定基础。
- 吴蒙刘宇鸽李改瑞彭敬陆杰陆家海
- 关键词：流感病毒H5N1毕赤酵母分泌表达
- 抗菌肽分子优化设计研究进展被引量：1
- 2013年
- 抗菌肽(AMPs)是生物体内合成的一种具有抗菌活性的多肽类物质,对多种病原体乃至耐药性菌株具有明显的杀伤作用。但由于其易降解,活性不稳定等缺陷受阻于临床应用。随着抗菌肽数据库的发展,并在降低AMPs毒性、提高AMPs抑菌活性、增强AMPs稳定性及生物利用度、克服AMPs体内转运难题的原则指导下,对众多抗菌肽进行分子优化设计,旨在解决目前抗菌肽合成及活性的瓶颈,相信在不久的将来抗菌肽将成为临床上重要抗菌武器。
- 朱钧萍申婧郭中敏陆家海
- 关键词：抗菌肽数据库
