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猪圆环病毒2型间接ELISA检测方法的建立被引量：4: 2007年; 根据GenBank中猪圆环病毒2型（PCV-2）ORF2基因序列设计特异性引物，进行PCR反应，回收PCR产物，将其克隆人pMD18-T载体，再定向克隆到表达载体pET-32a中并转化大肠杆菌Rosetta，进行原核表达。表达产物经His—Bind蛋白纯化试剂盒纯化，平均浓度为1．10mg／ml。以1．8μg／ml蛋白包被酶标板，建立ELISA检测方法。建立的ELISA方法与北京世纪元亨公司试剂盒比较，两者检测结果符合率达85％以上。用该方法对常州某猪场36份母猪和156份10～160日龄猪群血清样品进行了检测，检测结果显示母猪阳性率为81．4％，仔猪阳性率随着日龄的增加而逐渐降低，之后由于受PCV-2的感染，阳性率逐渐升高。本试验建立的ELISA方法，具有较好的特异性、莺复性和敏感性，可用于猪群PCV-2抗体的大规模检测。; 潘群兴何孔旺段治涛黄克和; 关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因

检测CSFV、JEV、PRRSV三种RNA病毒多重RT-PCR方法的建立被引量：15: 2007年; 猪瘟病毒(CSFV)、流行性乙型脑炎病毒(JEV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起严重的种猪繁殖障碍的病原,而且经常混合感染,及时准确诊断是防治的前提。根据GenBank发表序列选取3对引物建立检测CSFV、JEV和PRRSV病毒的多重RT-PCR方法,扩增产物分别为508 bp、380 bp、263 bp。经与IDEXX商品化的检测CSW抗原试剂盒比较,二者的符合率为96.7%;扩增JEV和PRRSV PCR产物分别经EcoR V和Sau3A I酶切得到预期的片段。建立的多重RT-PCR检测JEV、PRRSV和CSFV敏感度分别为12.5个TCID_(50)、10个TCID_(50)和10^(-3)ng总RNA。结果表明该多重RT-PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于临床三种病毒核酸的检测。; 张雪寒何孔旺郭容利俞正玉倪艳秀; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒多重RT-PCR

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国家科技攻关计划(2004BA514A16-5)