国家自然科学基金(30471139)
- 作品数：3 被引量：39H指数：3
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- 相关机构：山东农业大学山东省作物生物学重点实验室更多>>
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- 马铃薯Y病毒CP基因5’端和3’端反向重复结构介导的抗病性研究
- ＜正＞RNA沉默是生物（特别是真核生物）细胞抵御外来核酸（病毒、转座子或转基因）入侵以保持生物自身基因组完整性的一种防御机制,在动物RNAi、植物转录后基因沉默及真菌的quelling中都是保守的。RNA介导的病毒抗性是...
- 宋云枝李鹏朱常香迟胜起温孚江
- 文献传递
- hpRNA的茎环比例对RNA介导的病毒抗性产生的影响
- 以马铃薯 Y 病毒(Potato Virus Y,PVY)的外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因3′端50bp 片段为 hpRNA 的茎,以 pUC19不同长度的序列为 hpRNA 的环,构建了茎环比例分别为4...
- 李云宋云枝朱常香温孚江
- 关键词：HPRNA
- 文献传递
- 多抗PVY、TMV和CMV转基因烟草的培育被引量：26
- 2008年
- 【目的】利用RNA介导抗性培育抗多种植物病毒的转基因烟草。【方法】分别以马铃薯Y病毒(PVY)、烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)全长衣壳蛋白(CP)基因为模板,通过设计PCR引物和亚克隆获得PVYCP3′端长度100bp、TMVCP3′端长度100bp和CMVCP3′端长度200bp的cDNA片段并拼接成嵌合基因,并以此为模板构建反向重复结构嵌合基因的植物表达载体pRHPTC。将pRHPTC通过冻融法导入农杆菌LBA4404,采用叶盘法转化烟草NC89,然后测定转基因烟草对3种病毒的抗性。【结果】经卡那霉素筛选和PCR检测,共获得276株转基因烟草。Southern和Northernblot分析表明,外源基因以不同拷贝数整合于烟草基因组中;不同转基因植株中病毒RNA的积累量存在显著差异。抗病性检测显示:23%左右的转基因植株表现出对3种病毒侵染的抗性。对转基因植株扩繁后代和T1代的抗性分析表明:多病毒抗性表现稳定。【结论】利用RNA介导的抗病毒基因工程可获得同时抗多种病毒的转基因烟草,其抗病性在T0代扩繁植株和T1代植株中得到稳定遗传。
- 朱常香宋云枝温孚江
- 关键词：马铃薯Y病毒转基因烟草
- hpRNA的茎环比例对RNA介导的病毒抗性产生的影响被引量：11
- 2008年
- 以马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因3′端50bp片段为hpRNA的茎,以pUC19不同长度的序列为hpRNA的环,构建了茎环比例分别为4∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶4和1∶8的植物表达载体。利用农杆菌介导法转化烟草品种NC89,获得了多种转基因植株。室内抗病性检测发现:不同茎环比例的hpRNA介导的病毒抗性效率不同;茎环比例为4∶1、2∶1和1∶1时效率较高,抗性植株的比例达60%左右;随着环长度的逐渐增加,抗性植株的比例逐渐降低;当茎环比例为1∶8时,抗性植株的比例仅为9.52%。Southern blot分析结果表明:外源基因已整合于烟草的基因组中,且转基因植株的抗病性与转基因的拷贝数之间无明显的相关性。Northern blot分析结果表明:目的片段转录产物的积累量与植株的抗病性呈负相关,证明所获得的抗病性是RNA介导的。
- 李云宋云枝朱常香温孚江
- 关键词：HPRNA
- 核基质结合区对马铃薯Y病毒全长非翻译CP基因介导抗病性的影响被引量：7
- 2005年
- 为探索核基质结合区(m atrix attachm ent reg ions,MAR s)对RNA介导的病毒抗性的影响,我们将从烟草中克隆到的核基质结合区TM 2构建在包含马铃薯Y病毒全长非翻译CP基因的植物表达载体pRPVYCPN的表达盒的两侧,构建了植物表达载体pRTM 2CPNTM 2。采用农杆菌介导基因转化法,将表达载体pRPVYCPN和pRTM 2CPNTM 2转入烟草品种NC89中,分别获得了144株和344株转基因烟草。抗病性检测发现,核基质结合区的存在能明显提高RNA介导抗性的产生效率。在含MAR s转基因植株中,抗病植株的比率为15.1%,而不含核基质结合区的转基因植株的抗病比率则为8.3%。这一研究结果对抗病毒植物的分子育种和转基因表达调控有指导意义。
- 迟胜起宋云枝朱常香郑成超刘晓玲温孚江
- 关键词：核基质结合区马铃薯Y病毒
