河南省基础与前沿技术研究计划项目(2004922043)
- 作品数:6 被引量:14H指数:2
- 相关作者:李春丽何国庆陈其新郑振宇席燕燕更多>>
- 相关机构:河南农业大学浙江大学更多>>
- 发文基金:河南省基础与前沿技术研究计划项目河南省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 乳糖诱导植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein在大肠杆菌中的表达被引量:5
- 2006年
- 构建了植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein高效表达的工程菌株,对其乳糖诱导条件进行了优化。乳糖浓度、诱导时间和诱导温度对菌株生长和目的蛋白表达的试验结果显示,高浓度乳糖对菌株生长有抑制作用(P<0.01),对目的蛋白的表达无显著影响(P>0.05),时间延长对于菌株生长有利(P<0.01),对目的蛋白的表达因温度不同而不同。进一步的研究表明,以0.5%乳糖在28℃~30℃诱导4h对菌株生长和目的蛋白的表达有利,目的蛋白的表达量可达20%左右。
- 李春丽陈其新何国庆
- 关键词:植物甜蛋白大肠杆菌
- 乳糖作为诱导剂对人β-防御素3蛋白表达的影响被引量:2
- 2006年
- 对人β-防御素3基因工程菌株BL21-pET-hBD3的乳糖诱导条件进行了研究。乳糖浓度、诱导时间和诱导温度对菌株生长和目的蛋白表达的试验结果显示,高浓度乳糖对菌株生长有抑制作用(P<0.01),对目的蛋白的表达无显著影响(P>0.05),延长诱导时间对菌株生长有利(P<0.01),但对蛋白的表达无显著影响(P>0.05)。以0.5%乳糖在37℃诱导4h对目的蛋白的表达有利,目的蛋白的含量可达28.1%。控制好诱导条件,乳糖与IPTG的诱导效果基本相当。
- 李春丽席燕燕陈正华何国庆
- 关键词:大肠杆菌
- 植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的密码子优化及其在毕氏酵母中的表达被引量:2
- 2011年
- 根据甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的成熟区氨基酸序列,按照酵母密码子的偏好优化其编码序列,合成了4对末端具粘合位点的寡聚核苷酸序列,经连接、PCR扩增后得到了179 bp的des-pGlu1-Brazzein编码序列,插入到pPIC9K载体中,构建了重组表达载体pPIC9K-Bra。经酶切、电击转化到毕赤酵母菌GS115中。酵母工程菌株经筛选鉴定后诱导表达,目的蛋白的表达量约占上清总蛋白的51.6%,分离纯化后的des-pGlu1-Brazzein具有一定的甜度。
- 李春丽韩露郑振宇赵卫东
- 关键词:甜蛋白毕氏酵母活性检测
- 人β防御素3基因工程菌株的IPTG诱导条件优化被引量:2
- 2007年
- 对人β防御素3基因工程菌株BL21-pET-hBD3的摇瓶生长和诱导条件进行了优化.对装液量、接种量和初始pH对菌种生长的影响进行了比较.结果表明,装液量对菌株生长影响最大.IPTG浓度、诱导时间和诱导温度对目的蛋白表达的试验结果显示,温度是一重要影响因素.进一步研究表明,菌株在37℃生长,在28-34℃以0.2 mmol.L-1IPTG诱导4 h对目的蛋白的表达有利,目的蛋白的含量最高可以达到总蛋白的29.8%.
- 李春丽郑振宇席燕燕
- 关键词:人Β防御素3大肠杆菌
- 植物甜蛋白des-pGlul-brazzein在大肠杆菌中表达条件的优化被引量:1
- 2006年
- 构建了植物甜蛋白des—pGlul—Brazzein高效表达的工程菌株,对其IPTG诱导条件进行了研究。IPTG浓度、诱导时间和诱导温度对菌株生长和目的蛋白表达的试验结果显示,温度是重要的影响因素。进一步的研究表明,菌株在28~30℃以0.2mmol/L IPTG诱导4h,对菌株生长和目的蛋白的表达有利,目的蛋白的表达可达到总蛋白的43.8%。
- 李春丽陈其新何国庆
- 关键词:植物甜蛋白大肠杆菌