国家自然科学基金(30170236)
- 作品数：11 被引量：19H指数：3
- 相关作者：刘建平唐波何国祥李德陈惠更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南医院山西师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省基础研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 水稻OsNCED3基因的RNAi载体构建被引量：2
- 2012年
- 水稻OsNCED3基因是水稻抗逆过程中重要的基因之一。以水稻中花10号幼苗为材料,提取基因组DNA。设计引物扩增区段cDNA并引入相应的酶切位点,以基因组DNA作为模板,进行RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段的PCR扩增。将PCR产物连接到pMD19-T载体上,经酶切和PCR检测后进行测序。测序结果表明:RNAi-Os-NCED3顺式和反式目的片段均已正确的连接到pMD19-T载体上。然后将RNAi-OsNCED3顺式和反式目的片段通过酶切和连接,连接到含有发夹结构的质粒pFGC5941上。PCR及双酶切结果显示,构建的pFGC5941-OsNCED3即RNAi-OsNCED3载体结构完整。
- 冯光秀陈惠
- 关键词：水稻RNAI
- 直流电场影响血管平滑肌细胞迁移和增殖的研究被引量：2
- 2005年
- 目的:探讨生物电场(EF)对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)迁移和增殖的影响。方法:体外培养大鼠主动脉VSMC,EF干预72h,显微成像及图象分析技术检测VSMC迁移情况,免疫细胞化学染色方法观察VSMC增殖核抗原表达情况,观察细胞增殖改变。结果:在含有10%胎牛血清(FBS)的培养基中,在150 mV/mm EF作用下,VSMC向阴极迁移明显,向阳极迁移受抑制。150 mV/mm2、50 mV/mm EF干预下,细胞增殖核抗原较无EF干预培养VSMC无明显改变。结论:EF诱导VSMC定向迁移,对VSMC增殖没有明显影响。
- 唐波何国祥刘建平李德
- 关键词：电场血管平滑肌细胞迁移增殖
- 直流电场对血管平滑肌细胞迁移的影响
- 目的研究血管平滑肌细胞受直流电场作用后迁移的变化。提供直流电场调控血管平滑肌细胞定向迁移的实验依据,试图再狭窄防止提供新的途径。方法体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞,显微细胞培养条件下直流电场作用6h或37℃5％CO2...
- 唐波刘建平何国祥李德
- 文献传递
- 外加电场诱导大鼠血管平滑肌细胞形态及迁移行为变化与血管紧张素Ⅱ受体和血小板源生长因子受体的关系被引量：3
- 2006年
- 目的探讨电场作用下血管平滑肌细胞膜表面细胞生长因子受体表达的变化及其对细胞增殖迁移的影响。方法通过电场实验小室,对体外培养的大鼠主动脉血管平滑肌细胞给予直流电场干预,间断显微细胞图像记录和分析,研究不同强度电场、不同作用时间下血管平滑肌细胞迁移和细胞形态的变化;采用免疫细胞化学或免疫荧光染色方法,检测电场干预后与血管平滑肌细胞迁移密切相关的血小板源生长因子受体、血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体等受体的表达情况。结果①150V/m电场长时间作用下,培养的血管平滑肌细胞有明显的电场趋化性,细胞向负极迁移的距离明显高于无电场作用的对照组。②改进的电场干预装置作用下,血管平滑肌细胞膜血小板源生长因子受体表达增加,部分细胞内血小板源生长因子受体表达上调,呈不对称分布,在电场负极面较集中;细胞中血管紧张素Ⅱ1型受体表达亦增加,但无明显不对称分布现象;血管紧张素Ⅱ2型受体表达改变不显著。结论外加直流电场干预下,大鼠血管平滑肌细胞发生形状改变和定向迁移。血管平滑肌细胞中血小板源生长因子受体和血管紧张素Ⅱ1型受体表达上调和重分布,可能与细胞定向迁移的启动和维持有关。
- 刘建平唐波何国祥
- 关键词：电场血小板源生长因子受体
- 血管平滑肌细胞受电场作用后迁移的变化
- 目的探讨生理电场(EF)对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的影响。方法体外培养大鼠主动脉VSMC,用不同强度EF干预6小时,显微成像及图象分析技术检测平滑肌细胞迁移情况。结果在含有10%胎牛血清(FBS)的培养基...
- 唐波何国祥刘建平李德
- 文献传递
- 直流电场影响血管平滑肌细胞迁移和增殖的实验研究
- 目的探讨生理电场(EF)对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的影响。方法体外培养大鼠主动脉VSMC,EF干预72h,显微成像及图像分析技术检测VSMC迁移情况,免疫细胞化学染色方法观察 VSMC增殖核抗原表达情况,...
- 刘建平唐波何国祥
- 文献传递
- 电场干预对血管平滑肌细胞形态和细胞骨架的影响被引量：6
- 2006年
- 目的:探讨生理电场干预对大鼠主动脉血管平滑肌细胞形态和细胞骨架蛋白F-actin表达的影响。方法:实验于2002-07/2003-12在解放军第三军医大学西南医院中心实验室进行。取清洁级Wistar大鼠47只,颈离断法处死大鼠,体外培养其主动脉血管平滑肌细胞。①分别给予0,50,100,150,200,250mV/mm生理电场干预,显微成像及图像分析技术记录分析血管平滑肌细胞形态变化。②150mV/mm生理电场干预的血管平滑肌细胞在无生理电场(0)和生理电场作用5,10,30min、1,3,6h各时间点,用激光共聚焦显微镜检测细胞骨架蛋白F-actin的变化。结果:①血管平滑肌细胞在100～250mV/mm生理电场作用下显示明显的趋化反应,部分细胞的板状突起向阴极面伸展。②激光共聚焦显微镜显示150mV/mm生理电场作用5min,细胞内F-actin表达增加,30～60min达到高峰,以后仍然高于无电场干预的血管平滑肌细胞;F-actin逐渐呈平行排列,形成整齐的应力纤维丝。结论:生理电场干预下血管平滑肌细胞细胞膜向阴极伸展,血管平滑肌细胞F-actin合成和重新分布,发生结构改变,可能参与血管平滑肌细胞定向迁移的调控。
- 唐波何国祥刘建平李德
- 关键词：电生理学细胞支架蛋白质类
- 一种优化的测定水稻硅含量的方法被引量：5
- 2016年
- 为建立一种更为简便且准确的水稻(Oryza sativa)硅含量测定方法,对硅钼蓝分光光度法的多个实验条件进行了优化,并对水稻样品的前处理——消解法和高压灭菌法进行了比较研究。结果表明,还原剂为抗坏血酸、测定波长为600 nm、硅钼黄显色时间和硅钼蓝稳定时间分别为5和25分钟为最佳测定条件,样品的前处理则是消解法优于高压灭菌法,前者提取硅的效果好于后者。该优化方法为深入研究水稻和其它植物中硅的吸收和转运机制奠定了基础。
- 贾雨薇杨瑞林张洋房娟娟陈惠
- 关键词：水稻硅含量
- 外加直流电场对血管平滑肌细胞形态及迁移行为的影响被引量：2
- 2006年
- 在外加直流电场(electricalfields,EFs)作用下血管平滑肌细胞(VSMCs)膜表面细胞生长因子受体表达发生明显的变化,并影响细胞形态、迁移的特性。通过EFs干预装置干预体外培养的大鼠主动脉VSMCs,记录和分析细胞图像,研究不同强度电场、不同作用时间下VSMCs迁移和细胞形态的变化,并用免疫细胞化学或免疫荧光染色方法检测与VSMCs迁移相关的血小板衍化生长因子受体(PDGFR)、血管紧张素II1型受体(AT1R)和2型受体(AT2R)等受体的表达情况,研究EFs影响VSMCs形态及迁移的机制。研究结果提示,在EFs干预作用下,VSMCs膜PDGFR表达增加,部分细胞呈不对称分布,在EFs阴极面较集中;细胞中AT1R表达亦增加,但无明显不对称分布现象;AT2R表达没有改变;EFs长时间作用下,培养的VSMCs有明显的电场趋化性,细胞向阴极迁移的距离明显高于无EFs作用对照组,细胞膜向阴极方向伸展,发生形状改变,定向迁移依赖于EFs强度。EFs作用下,部分细胞生长因子受体的表达上调和重分布,可能与细胞定向迁移的启动和维持有关。
- 刘建平唐波何国祥
- 关键词：血管平滑肌细胞电场受体
- 血管平滑肌细胞受电场作用后迁移的变化被引量：2
- 2006年
- 目的:观察生理电场干预对大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响。方法:实验于2002-07/2003-12在解放军第三军医大学西南医院中心实验室进行。取Wistar大鼠47只,颈离断法处死大鼠,体外培养主动脉血管平滑肌细胞。将细胞根据培养基分为DMEM组和DMEM+体积分数为0.1的胎牛血清组,分别给予0,50,100,150,200,250mV/mm生理电场干预6h,显微成像及图像分析技术记录分析血管平滑肌细胞迁移。结果:①在DMEM组,细胞在250mV/mm电场中没有定向迁移,电场干预没有明显提高细胞迁移速度。②在DMEM+体积分数为0.1的胎牛血清组,血管平滑肌细胞在电场作用下显示明显的趋化反应。在100～250mV/mm,细胞向阴极迁移。在150mV/mm电场中,单个细胞和细胞团定向迁移的速度没有明显差异[(12.79±0.77),(14.21±0.45)μm/h,P>0.05]。结论:生理电场诱导血管平滑肌细胞向阴极定向迁移,电场的作用依赖于电场强度和血清成分。
- 唐波何国祥刘建平李德
- 关键词：细胞平滑肌血管细胞学电生理学
