国家教育部“211”工程(98005)
- 作品数：9 被引量：24H指数：4
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- 相关机构：中山大学淄博市中心医院邢台市眼科医院更多>>
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- IL-1ra抑制IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞表达ICAM-1被引量：6
- 2003年
- 【目的】明确IL-1ra是否对IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞表达ICAM-1有抑制作用及生物学意义,探讨表达ICAM-1在IL-1α诱导的外周血单个核细胞与眼眶成纤维细胞黏附中所起的作用。【方法】以IL-1α或/和IL-1ra处理培养的Graves’眼病(GO)患者和正常人眼眶成纤维细胞。用半定量RT-PCR法检测IL-1ra对IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞表达ICAM-1 mRNA的影响;用Western blot法和细胞免疫化学法检测IL-1ra对IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞表达ICAM-1蛋白的影响;用荧光显微镜检测预先标记的外周血单个核细胞(PBMC)与培养的眼眶成纤维细胞的黏附能力。用抗ICAM-1中和抗体来显示ICAM-1在IL-1α诱导的黏附过程中所起的作用。【结果】IL-1ra抑制IL-1α诱导的GO患者和正常人眼眶成纤维细胞表达ICAM-1 mRNA和蛋白呈剂量依赖性;IL-1ra抑制IL-1α诱导的PBMC与眼眶成纤维细胞的黏附呈浓度及时间依赖性。ICAM-1 mRNA和蛋白被抑制的方式与眼眶成纤维细胞受IL-1ra处理后与PBMC黏附的减弱明显平行。而且,抗ICAM-1单克隆抗体抑制PBMC黏附到眼眶成纤维细胞呈浓度依赖性。【结论】IL-1ra能够在mRNA和蛋白水平抑制IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞表达ICAM-1,IL-1ra抑制IL-1α诱导的眼眶成纤维细胞表达ICAM-1可能在减弱IL-1α诱导的PBMC黏附到成?
- 刘桂琴吴中耀杨华胜林征郑健樑
- 关键词：格雷夫斯病白细胞介素1受体成纤维细胞免疫化学法
- 甲状腺相关眼病患者眼眶脂肪组织相关基因的异常表达被引量：4
- 2007年
- 目的探讨甲状腺相关眼病(thyroid-associatedophthalm opathy,TAO)患者眼眶脂肪组织相关基因的表达。方法选用TAO患者(20例)及正常对照(17例)眼眶脂肪组织,采用RT-PCR法对脂肪细胞分化转录因子前脂肪细胞因子-1(Pref-1)、过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ),脂肪细胞分泌因子瘦素、脂联素以及共同抗原TSHR等5个基因进行检测。比较TAO及正常人眶脂肪组织基因表达的改变。结果RT-PCR法测得的TAO患者眼眶脂肪组织中各基因mRNA表达的相对灰度值为:瘦素1.23±0.03、脂联素1.16±0.08、PPARγ1.03±0.06、TSHR0.96±0.04、Pref-10.48±0.07,其中瘦素、脂联素、PPARγ、TSHRmRNA表达明显较正常对照组增强,而Pref-1表达则减弱(P<0.05)。结论TAO患者眼眶脂肪组织中存在着异常的基因表达,在TAO的发生、发展中可能起着重要作用。
- 王莉菲吴中耀
- 关键词：甲状腺相关眼病脂肪组织基因表达
- 甲状腺相关眼病患者眼眶脂肪抵抗素的表达被引量：5
- 2006年
- 目的通过检测抵抗素在甲状腺相关眼病患者及对照组眼眶脂肪组织和脂肪细胞中的表达,为进一步探讨抵抗素与甲状腺相关眼病的相关性打下基础。方法通过体外原代培养获得前脂肪细胞,前脂肪细胞在分化液的作用下转化为成熟脂肪细胞。用RT—PCR法检测眶脂肪组织、前脂肪细胞及成熟脂肪细胞中抵抗素mRNA的表达,并进行免疫组化检测抵抗素蛋白的表达。结果前脂肪细胞中无抵抗素mRNA及蛋白的表达。成熟脂肪细胞及眶脂肪组织中有抵抗素mRNA及蛋白的表达。免疫组化结果显示抵抗素蛋白位于成熟脂肪细胞胞浆中。结论甲状腺相关眼病患者眶脂肪中抵抗素mRNA及蛋白表达丰富,说明甲状腺相关眼病患者眶脂肪增多是因成熟脂肪细胞所占比例增加、脂肪细胞分化增强所致。
- 刘红霞吴中耀杨华胜颜建华毛羽翔王莉菲林征
- 关键词：甲状腺相关眼病脂肪抵抗素前脂肪细胞
- 甲状腺相关眼病患者眼眶前脂肪细胞的培养及分化被引量：11
- 2005年
- 【目的】研究甲状腺相关眼病患者(TAO)眼眶组织中是否存在前脂肪细胞,在一定条件下能否分化为成熟脂肪细胞,探讨脂肪细胞在TAO发病中的作用。【方法】选用TAO患者眼眶中的脂肪颗粒,共8例(8只眼),采用组织块培养法培养细胞,观察细胞形态;细胞免疫组织化学方法检测前脂肪细胞因子鄄1的表达,初步验证前脂肪细胞的存在;诱导细胞向成熟脂肪细胞分化,油红O染色观察细胞形态及细胞内脂滴形成情况;RT鄄PCR检测分化过程中转录因子过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)表达的改变。【结果】原代培养细胞为梭形,增殖旺盛;免疫组化显示前脂肪细胞因子鄄1表达阳性;细胞可分化为成熟脂肪细胞,并伴有PPARγ基因表达的增强。【结论】TAO患者眼眶组织中存在着功能活跃的前脂肪细胞;进一步验证了脂肪细胞数量的增加在TAO发病中的重要作用。
- 王莉菲吴中耀杨华胜颜建华毛羽翔陈智聪
- 关键词：前脂肪细胞甲状腺相关眼病细胞培养基因表达
- 甲状腺相关眼病患者眼眶前脂肪细胞分化前后相关基因表达被引量：2
- 2007年
- 目的探讨甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthal mopathy,TAO)患者眼眶前脂肪细胞分化前后相关基因表达的改变,进一步验证脂肪细胞分化在TAO发病中的重要作用。方法培养TAO患者(14例)眼眶前脂肪细胞,并诱导其向脂肪细胞分化,采用RT-PCR法检测分化前后脂肪细胞分化转录因子前脂肪细胞因子-1(Pref-1)、过氧化物酶体增殖体激活受体γ(PPARγ)、脂肪细胞分泌因子瘦素(Leptin)、脂联素(Adiponec-tin)以及共同抗原促甲状腺激素受体(TSHR)5个基因mRNA表达的改变。结果RT-PCR法测的TAO眼眶前脂肪细胞分化后各基因mRNA表达的相对灰度值为Leptin0.82±0.09、Adiponetic0.79±0.05、PPARγ0.62±0.05、TSHR0.86±0.08、Pref-10.70±0.04,其中前4个基因表达明显较分化前增强(P<0.05),Pref-1则未见统计学差异。结论TAO患者眼眶前脂肪细胞在一定条件下可向成熟脂肪细胞转化,并伴随着相关基因的改变,在TAO的发生、发展中可能起着重要作用。
- 王莉菲吴中耀
- 关键词：甲状腺相关眼病前脂肪细胞基因表达
- Graves’眼病患者眼眶前脂肪细胞抵抗素诱导的表达被引量：3
- 2006年
- 目的通过检测抵抗素在Graves’眼病患者眼眶前脂肪细胞培养分化过程中的表达,进一步研究前脂肪细胞的分化过程。方法在体外通过组织块培养法获取前脂肪细胞,前脂肪细胞在分化液的作用下转化为成熟脂肪细胞。利用RT-PCR法检测前脂肪细胞及成熟脂肪细胞中抵抗素mRNA的表达情况,对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞进行免疫组化检测抵抗素蛋白的表达情况。结果前脂肪细胞中无抵抗素mRNA及蛋白的表达。成熟脂肪细胞中有抵抗素mRNA及蛋白的表达。免疫组化结果显示抵抗素蛋白位于成熟脂肪细胞胞浆中。结论Graves’眼病患者眼眶组织中存在功能活跃的前脂肪细胞,能够在体外分化为脂肪细胞。抵抗素是脂肪细胞分泌的一种脂肪细胞因子,仅存在于成熟脂肪细胞中,可作为脂肪细胞分化的标记物。
- 刘红霞吴中耀杨华胜颜建华毛羽翔王莉菲
- 关键词：抵抗素前脂肪细胞脂肪细胞
- 重组人抵抗素对TAO患者眼眶前脂肪细胞分化的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨重组人抵抗素对甲状腺相关眼病(TAO)患者眼眶前脂肪细胞分化的影响及其在TAO发病中的可能作用。方法10例严重TAO患者眼眶脂肪组织来自眼眶减压术中,正常对照组来自各种原因行眼球摘除术者。培养眼眶前脂肪细胞,并诱导分化,在分化液中分别加入0、10、25、50、100μg/L质量浓度的重组人抵抗素,采用逆转录PCR(RT-PCR)法检测分化过程中过氧化物酶增生体激活受体γ(PPARγ)基因的表达,研究重组人抵抗素对前脂肪细胞分化的作用。结果TAO患者及正常对照组眼眶前脂肪细胞在体外均可被诱导分化成脂肪细胞。分化成熟的脂肪细胞可被油红O染成橘红色。重组人抵抗素对眼眶前脂肪细胞的分化有抑制作用,RT-PCR结果显示PPARγ基因的表达随着抵抗素质量浓度的升高而减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组人抵抗素可抑制人眼眶脂肪组织来源前脂肪细胞的分化,脂肪细胞标记性PPARγ基因的表达减弱,有望在TAO治疗方面开创新的研究方向。
- 刘红霞罗琳吴中耀
- 关键词：甲状腺相关眼病前脂肪细胞抵抗素
- 甲状腺相关眼病患者血清中抵抗素水平的测定
- 2010年
- 目的检测甲状腺相关眼病(TAO)患者血清中抵抗素的表达水平。方法 TAO患者血清样本来自有典型临床症状且近3个月内未服用糖皮质激素和免疫抑制剂的TAO患者35例,按CAS临床活动度评分标准将其分为2组:非活动期(CAS<4)18例和活动期(CAS≥4)17例,另外选取正常对照组15例。使用ELISA法检测血清中抵抗素蛋白的表达情况。结果活动期与非活动期TAO患者血清中抵抗素水平分别为(12.103±5.042)mg/L和(13.470±3.749)mg/L,差异无统计学意义(t=0.906,P=0.371);正常对照组血清抵抗素水平为(21.894±10.589)mg/L,非活动期、活动期TAO组血清抵抗素水平分别为(12.103±5.042)mg/L和(13.470±3.749)mg/L,均较正常对照组明显下降(t=3.074,P=0.004;t=3.485,P=0.001)。男女患者血清中抵抗素水平分别为(13.175±4.483)mg/L和(12.335±4.511)mg/L,差异无统计学意义(t=0.552,P=0.585)。随着年龄的增加,血清中抵抗素水平逐渐升高,各年龄组间比较差异有统计学意义(F=24.978,P=0.000)。结论 TAO患者血清中抵抗素水平低于正常人,说明影响血清中抵抗素水平的仍是甲状腺激素,并且血清中抵抗素水平随年龄的增加而升高。
- 刘红霞吴中耀
- 关键词：甲状腺相关眼病血清抵抗素
- 重组人抵抗素对甲状腺相关眼病患者眼眶前脂肪细胞增殖的影响被引量：2
- 2009年
- 目的探讨重组人抵抗素对甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)患者眼眶前脂肪细胞增殖的影响,阐明抵抗素在TAO发病中可能的作用。方法体外培养TAO患者眼眶前脂肪细胞,鉴定并传代,用0μg.L-1、10μg.L-1、25μg.L-1、50μg.L-1、100μg.L-1的重组人抵抗素处理,采用MTT比色法检测细胞增殖情况。结果初步验证所培养脂肪来源的细胞为前脂肪细胞。重组人抵抗素对TAO患者眼眶前脂肪细胞的增殖有促进作用,呈剂量依赖形式,其中50μg.L-1组的A490值为0.1017±0.0011,100μg.L-1组的A490值为0.1041±0.0017,均高于阴性对照组(即0μg.L-1组,A490值为0.0874±0.0048),差异均有统计学意义(P均<0.05)。随抵抗素浓度(10μg.L-1、25μg.L-1、50μg.L-1、100μg.L-1)的增加,增殖率逐渐升高,分别为2.52%、9.84%、16.36%、19.11%。结论重组人抵抗素能够促进眼眶前脂肪细胞的增殖,眼眶内脂肪细胞合成分泌的抵抗素可能通过旁分泌影响眼眶内前脂肪细胞的增殖,从而参与TAO的发病过程。
- 刘红霞罗琳吴中耀
- 关键词：甲状腺相关眼病前脂肪细胞抵抗素
