广西壮族自治区卫生厅重点科研课题(200925)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：刘志明张超程乐吴非厉成杰更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院广西医科大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区卫生厅重点科研课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- survivin ASODN对人胰腺癌PANC细胞移植瘤生长的影响及机制探讨被引量：1
- 2012年
- 目的观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)转染对人胰腺癌PANC细胞裸鼠移植瘤生长及瘤组织中survivin、PTEN、CEACAM-1表达的影响,并探讨其作用机制。方法构建28只人胰腺癌PANC细胞裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组、正义寡核苷酸(SODN)组、ASODN组、脂质体组,各7只,分别于瘤周及瘤体注射50μL的PBS、SODN、ASODN、脂质体+无血清DMEM。注射结束后2 d,切取瘤体,测算肿瘤生长抑制率和生长指数,免疫组化法检测瘤组织中的survivin、PTEN、CEACAM-1蛋白,TUNEL染色镜下观察细胞凋亡情况,半定量RT-PCR检测瘤组织中的survivin mRNA、PTEN mRNA、CEACAM-1 mRNA。结果与其他三组相比,ASODN组肿瘤生长抑制率高、生长指数低、细胞凋亡指数高(P均<0.05),其瘤组织中survivin和CEACAM-1表达下降、PTEN表达上升(P均<0.05)。结论 survivin ASODN可有效抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长并诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与抑制survivin和CEACAM-1的表达、促进PTEN的表达有关。
- 张超刘志明
- 关键词：生存素癌胚抗原相关细胞黏附分子1反义寡核苷酸
- 胰腺癌反义寡核苷酸技术治疗的新靶点-survivin
- 2012年
- survivin对维持肿瘤细胞恶性增殖具有重要功能,是目前发现IAP家族中唯一与细胞凋亡和周期调控都相关的成员,其机理是与caspase-3、caspase-7结合而阻止细胞凋亡的发生。反义寡核苷酸具有高特异性、靶向性、无毒性等特点。以互补的形式与DNA或RNA的特异靶序列结合,抑制其转录和翻译上特定基因的表达,干扰致病蛋白质的产生,从而使肿瘤基因无法表达。存活素在胰腺癌中的表达具有一定的肿瘤特异性,可能是胰腺癌治疗的一个理想靶目标。下面就着重以survivin作为治疗靶点在肿瘤发生中的作用机制、表达和Survivin ASODN在临床应用中的应用前景作一简要综述。
- 张超刘志明
- 关键词：SURVIVIN反义寡核苷酸胰腺癌凋亡
- 脂质体转染survivin反义寡核苷酸对人胰腺癌细胞凋亡的影响被引量：5
- 2010年
- 目的探讨survivin反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASODN)对人胰腺癌细胞PANC-1增殖的影响。方法设计并合成特异性靶向ASODN及正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,SODN)。ASODN经FAM标记,以阳离子脂质体为载体转染至体外培养的PANC-1细胞中(ASODN组),另设空白对照组(正常培养的细胞)、脂质体空转染组(脂质体转染的为正常的培养基)及SODN组作为对照组。采用流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测转染率,依次筛选最佳细胞接种数量、ASODN浓度和脂质体的量;荧光显微镜观察转染后的细胞;MTT法测定转染后细胞的抑制率;透射电镜观察转染后细胞的超微结构变化;吖叮橙(AO)与溴化乙啶(EB)染色观察转染后细胞凋亡的形态学改变;DNA凝胶电泳观察转染后细胞凋亡情况;FCM测转染后细胞凋亡率及细胞周期;免疫组织化学技术检测转染后survivin蛋白的表达。结果①ASODN浓度为50、100、150、200、250、400、600及800 nmol/L时,转染率分别为31.9%、37.4%、41.4%、52.6%、24.2%、11.4%、16.1%和15.5%;接种细胞数量为2×104、2×105及2×106个/孔时,转染率分别为12.0%、50.8%和11.2%;转染所用的脂质体量为2、3及4μl时,转染率分别为58.8%、34.0%和23.6%。②转染ASODN后荧光显微镜发现转染后细胞之间空隙加大,形态变圆,贴壁细胞生长较少,部分漂浮于培养液中。③ASODN组24、36及48 h后细胞抑制率明显高于各对照组(P<0.05),随着时间延长,细胞抑制率增高(P<0.05)。④ASODN组电泳图上凋亡细胞呈明显的"梯状"条带。⑤AO与EB染色观察ASODN组细胞出现凋亡的形态学改变,其核染色质均高度聚集或核染色呈新月形聚集于核膜一边,核仁消失。⑥ASODN组细胞凋亡率为(38.10±3.4)%,明显高于SODN组的(4.16±1.7)%(P<0.05)。⑦ASODN组细胞周期阻滞于G2/M期。⑧转染后ASODN组survivin蛋白表达明显低于各对照组(P<0.05)。结论 survivin ASODN转染至胰腺癌细胞最佳转染条
- 刘海威程乐吴非厉成杰陈维平刘志明
- 关键词：胰腺癌反义寡核苷酸细胞凋亡
