国家林业局948项目(2003-Q08) 作品数:6 被引量:64 H指数:4 相关作者: 杨曙明 于洪侠 朱宇 王迪 刘潇威 更多>> 相关机构: 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 四川省农业科学院 中华人民共和国农业部环境保护科研监测所 更多>> 发文基金: 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 理学 医药卫生 更多>>
碘化酪蛋白多克隆抗体的制备 被引量:2 2006年 Four kinds of Iodinatedcasein was separated from industrial Iodinatedcasein with gel-chromatogram methods.these Iodinatedcaseins were used to immunize New Zealand rabbit.The anti-Iodinatedcasein-serum was obtained after three times injecting and the titers of antiserum was 32000.The special sensitivity of anti-serum was very good in the indirect ELISA motheds. 朱宇 杨曙明 于洪侠关键词:碘化酪蛋白 多克隆抗体 甲状腺素 动物饮用水 生理作用 固相萃取-高效液相色谱法测定饲料中5种磺胺类药物的研究 被引量:4 2008年 建立了固相萃取-高效液相色谱(SPE-HPLC)测定饲料中磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉5种磺胺类药物的方法。考察了碱性氧化铝小柱的最大饱和容量及洗脱条件,优化了色谱条件:流动相为乙腈和水(257∶5,v/v),流速为1.0 mL/min,检测波长为270 nm。在优化条件下,方法的最低定量限分别为磺胺嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶5 mg/kg;磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺喹恶啉2 mg/kg。方法的线性范围在0.2~200μg/mL之间,线性相关系数高于0.9996。将该方法用于鸡配合饲料、猪配合饲料和浓缩饲料中磺胺类药物残留的测定,不同添加浓度的回收率均高于80%,相对标准偏差≤10%,能够满足实际样品的分析要求。 李兰 索德成 王培龙 杨曙明关键词:固相萃取 高效液相色谱法 磺胺类药物 莱克多巴胺人工抗原的合成与鉴定 被引量:26 2005年 用戊二酸酐将盐酸莱克多巴胺活化成莱克多巴胺-戊二酸酐半醛,用混合酸酐法将莱克多巴胺-戊二酸酐半醛与KLH和BSA偶联,合成免疫原和包被抗原,经核磁共振法和紫外吸收法鉴定,偶联成功。用紫外吸收法测定免疫原和包被抗原的偶联比分别为24∶1和2.5∶1。用免疫原免疫新西兰白兔,采用间接ELISA法检测抗体效价,采用间接竞争ELISA法检测IC50值,获得了效价为1∶6 000以上I、C50值为10 ng/mL的多克隆抗体,证明合成的人工免疫原具有免疫原性。 于洪侠 杨曙明关键词:莱克多巴胺 半抗原 ELISA 偶联 尿样中克仑特罗免疫亲和色谱-气/质联用检测方法的研究 被引量:7 2007年 以单抗为配基制备克仑特罗免疫亲和柱,建立了简单、快速、特异的样品净化技术,柱容量达到100 ng。偶联抗体量与柱容量呈线性关系,线性方程为:y=236.36x+6.6214,R2=0.9461。测定尿样中的克仑特罗,不需前处理直接用亲和柱提纯后以气质联用(GC/MS)方法检测。空白猪尿添加浓度为205、01、00 ng时,回收率分别为85%±1.3,85.9%±1.3,81.5%±2.7。同时以NY/XQ421-2003标准中净化方法为对照,回收率分别为113%±5.6,94.5%±10,78.6%±1.7,偶联非特异抗体的对照组亲和柱对样品保留值为7.03%。数据显示:免疫亲和柱作为提纯方法,与传统固相萃取提纯方法相比平行性好,提纯后样本杂质少。因此免疫亲和柱是净化样品的一个有效方法。 王迪 杨曙明 张波 宋荣 熊勇华 于洪侠 杨晓慧关键词:克仑特罗 Β-兴奋剂 莱克多巴胺多克隆抗体的制备 被引量:18 2006年 采用多元酸酐法活化盐酸莱克多巴胺,用混合酸酐法将活化的莱克多巴胺与载体蛋白(KLH,BSA)偶联,制备了莱克多巴胺免疫原KLH-Rac和包被抗原BSA-Rac。以KLH-Rac免疫新西兰白兔获得了莱克多巴胺多克隆抗体,以BSA-Rac为包被抗原,采用间接ELISA检测抗血清,其效价达到1∶6 000,间接竞争ELISA测得抗血清的IC50值约为5 ng/mL,其与克伦特罗、沙丁胺醇、特布它林的交叉反应性小于0.01%。 于洪侠 杨曙明 朱宇关键词:莱克多巴胺 半抗原 ELISA 抗体 莱克多巴胺免疫亲和柱的制备与应用研究 被引量:11 2010年 用多元酸酐与混合酸酐相结合的方法合成了莱克多巴胺(Rac)抗原,免疫动物获得特异性抗体,并以蛋白A柱纯化得到IgG抗体。琼脂糖凝胶(Sepharose4B)经溴化氰(CNBr)活化后与IgG抗体偶联,制备莱克多巴胺免疫吸附剂。据此建立了尿液中莱克多巴胺的免疫亲和柱净化/液相色谱-荧光法(HPLC-FL)测定的分析方法。免疫制备特异抗体50%抑制浓度(IC50)为5μg/L。Sepharose4B经CNBr活化后与2mg抗体的偶联率达87.4%。1mL吸附剂的柱容量为67.57ng。尿液中莱克多巴胺的回收率为76%~90%。 王迪 杨曙明 刘潇威 于洪侠关键词:免疫亲和柱 莱克多巴胺