广西壮族自治区自然科学基金(2010GXNSFA013140)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：黄敏丽吴宁刘欣赵昆王淼更多>>
- 相关机构：广西医科大学第一附属医院重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 改良法氧诱导的早产儿视网膜病变动物模型的建立
- 2012年
- 目的改良法建立氧诱导的早产儿视网膜病变动物模型,并检测视网膜组织中血管内皮生长因子受体2(Vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)基因mRNA的表达。方法将54只7日龄Wistar幼鼠随机分为空气对照组和高氧实验组,高氧实验组饲养环境维持氧气流量为0.5～0.75 L/min,氧浓度为(80±2)%,空气对照组一直处于空气中饲养。每组分别取12、14、17日龄幼鼠,经心腔灌注后,剥离视网膜,行ADP酶染色,观察幼鼠视网膜血管形态;每组分别取17日龄幼鼠,取眼杯,经HE染色计数突破视网膜内界膜的内皮细胞核数目;每组分别取12、14、17日龄幼鼠视网膜组织,经RT-PCR检测VEGFR2基因mRNA的表达。结果 ADP酶染色镜下观察可见,视网膜血管在高氧环境中收缩闭塞,在相对缺氧环境中迂曲扩张并生成大量病理性新生血管;空白对照组和高氧实验组突破视网膜内界膜的内皮细胞核数分别为2.650±0.875和31.450±0.686,两组间差异有统计学意义(P<0.05);高氧实验组VEGFR2基因mRNA的表达先显著下降(12日龄),后显著增加(14日、17日龄),对照组VEGFR2基因mRNA一直维持在较低水平,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论已成功建立了氧诱导的早产儿视网膜病变动物模型,为进一步研究下调或阻断VEGFR2的药物对ROP等新生血管疾病的疗效奠定了基础。
- 吴宁黄敏丽
- 关键词：血管内皮生长因子受体2高氧症
- Sunitinib对视网膜微血管内皮细胞增殖和迁移的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨苹果酸舒尼替尼(Sunitinib)对体外培养的恒河猴视网膜微血管内皮细胞(RF/6A)增殖和迁移及KDR mRNA表达的影响。方法选取不同浓度的Sunitinib作用于RF/6A,分别于培养24h和48h后采用SRB染色法观察不同浓度的Sunitinib对RF/6A增殖的影响;采用细胞划痕修复实验观察不同浓度的Sunitinib对RF/6A迁移的影响;同时利用RT-PCR法检测不同浓度的Sunitinib处理前后RF/6AKD RmRNA表达水平的变化。结果 Sunitinib对RF/6A的增殖有抑制作用且呈时间-剂量依赖性,0.00125mg·L-1、0.0025mg·L-1、0.005mg·L-1、0.01mg·L-1、0.02mg·L-1和0.04mg·L-1浓度的Sunitinib作用24h,对RF/6A增殖的抑制率分别为(12.009±0.038)%、(21.440±0.007)%、(35.434±0.015)%、(43.125±0.002)%、(53.700±0.001)%、(60.971±0.003)%,各组两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.01);而48h后,其抑制率则分别为(36.872±0.006)%、(40.673±0.013)%、(47.313±0.004)%、(55.910±0.003)%、(63.120±0.003)%、(69.975±0.014)%,各组两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.01)。培养基中加入0mg·L-1、0.0025mg·L-1、0.005mg·L-1、0.01mg·L-1、0.02mg·L-1浓度的Sunitinib24h后RF/6A的迁移距离分别为(203.3±2.2)μm、(145.4±4.4)μm、(123.9±2.6)μm、(96.1±3.1)μm、(46.6±2.9)μm。而48h后则为(313.1±4.1)μm、(213.9±2.8)μm、(193.9±4.2)μm、(134.5±3.2)μm、(109.9±5.7)μm。在同一时段,各组两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.01)。0mg·L-1、0.0025mg·L-1、0.005mg·L-1、0.01mg·L-1、0.02mg·L-1浓度的Sunitinib作用24h后,RF/6AKDR mRNA的相对表达量分别为0.583±0.004、0.570±0.008、0.553±0.007、0.531±0.003、0.513±0.005。而48h后则分别为0.628±0.005、0.610±0.002、0.588±0.002、0.564±0.005、0.525±0.004。在同一时段,各组两两比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Sunitinib能够抑制视网膜微血管内皮细胞的增殖和迁移,其机制可能是通过下调VEGFR mRNA的表达来实现的。
- 侯培黄敏丽
- 关键词：苹果酸舒尼替尼视网膜微血管内皮细胞迁移
- 雷帕霉素对视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨雷帕霉素对视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion iniury,RIRI)的保护作用和机制。方法75只SPF级健康雄性Wistar大鼠随机分为3组:空白对照组、实验对照组、实验组,每组25只。实验对照组和实验组行前房灌注建立RIRI模型。实验组在前房灌注前2 h按2 mg·kg-1剂量腹腔注射雷帕霉素,实验对照组大鼠腹腔注射等量的生理盐水和DMSO。分别在再灌注后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h取3组视网膜标本,HE染色法观察视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)形态及测量视网膜内层厚度;TUNEL法检测视网膜组织中凋亡细胞的表达;Real-time PCR检测缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)mRNA在视网膜组织的表达水平。结果再灌注后0 h,实验组视网膜内层厚度为(137.55±7.76)μm,视网膜水肿较实验对照组轻,实验对照组视网膜内层厚度为(162.26±6.41)μm,且实验组RGC空泡化现象较少;再灌注6 h以后实验组视网膜内层厚度均较实验对照组厚(均为P<0.05)。实验组再灌注后12 h、24 h、48 h的细胞凋亡情况明显低于实验对照组(均为P<0.05)。再灌注后0 h、6 h、12 h、24 h、48 h实验组视网膜组织中HIF-1αmRNA表达水平较实验对照组降低(均为P<0.05)。结论雷帕霉素对RIRI具有保护作用,HIF-1α表达水平的下调可能与该作用有关。
- 赵昆黄敏丽王淼刘欣
- 关键词：雷帕霉素WISTAR大鼠缺氧诱导因子1Α视网膜缺血-再灌注损伤
- 舒尼替尼治疗早产儿视网膜病变动物模型的研究被引量：2
- 2011年
- 目的观察玻璃体腔内注射不同剂量舒尼替尼(Sunitinib)对视网膜新生血管是否具有抑制作用,及其抑制效果是否呈剂量依赖性。方法 高浓度氧气诱导Wistar鼠仔建立早产儿视网膜病变动物模型。鼠龄7d的鼠仔108只,随机分为6组(A:空气对照组、B:高氧对照组、C:高氧+PBS组、D:高氧+5μg舒尼替尼组、E:高氧+25μg舒尼替尼组、F:高氧+125μg舒尼替尼组)。当鼠仔脱氧时,C、D、E、F组分别玻璃体腔内注射单纯无菌PBS缓冲液和相应剂量的舒尼替尼。视网膜铺片(ADP酶法)观察视网膜血管形态、病理切片计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数目及RT-PCR检测VEGFR2mRNA的含量。结果 视网膜铺片结果显示:A组视网膜血管从视盘发出向四周放射状均匀分布,周边血管形态正常。B组视网膜血管在持续高氧环境中收缩闭塞,在相对缺氧环境中迂曲扩张并形成大量新生血管。舒尼替尼治疗后新生血管有不同程度的减少,抑制效果随着剂量增加而明显。视网膜新生血管内皮细胞核计数:A组为2.650±0.875,B组31.450±0.686,C组31.600±0.681,D组26.450±1.099,E组21.250±1.070,F组12.550±0.999,A与B组间差异有统计学意义(P<0.05),B与C组间差异无统计学意义(P>0.05),C、D、E、F各组间比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RT-PCR结果示:A组VEGFR2mRNA的表达维持在一个较低水平。持续高氧环境下VEGFR2mRNA表达显著下降,而相对缺氧环境下其表达显著增加。舒尼替尼治疗组其表达不同程度降低,降低效果随剂量的增加而明显。A、B组17d时VEGFR2mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),B、C2组于17d时VEGFR2mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),C、D、E、F组于17d时VEGFR2mRNA的表达各组间比较差异均具有统计学意义(均为P<0.05)。结论 舒尼替尼能抑制视网膜新生血管的生成,且抑制效果呈剂量依赖性。
- 吴宁黄敏丽
- 关键词：舒尼替尼早产儿视网膜病变视网膜新生血管
