陕西省自然科学基金(2005C245)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：费舟张越林刘晓斌黄卫东王继军更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院陕西省人民医院更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 机械划割至体外培养神经元创伤性损伤模型的建立被引量：4
- 2012年
- 目的:探讨在细胞水平建立可靠、简便易行的神经元机械性损伤模型及神经系统损伤的分子病理学。方法:将大鼠脑皮层神经元体外培养7d,通过光镜、电镜和免疫组织化学法鉴定培养的神经元。以微量移液器塑料枪头划割细胞,造成神经元机械性损伤。研究神经元机械性损伤后细胞形态学变化。检测细胞存活率和培养液乳酸脱氢酶活性变化,从病理生理学角度阐明神经元机械性损伤的效果。结果:神经元体外培养7d,光镜及电镜检测符合神经元特点。NF200免疫组织化学染色细胞阳性率达90%;机械性划割后可见神经元立即坏死和伤后6h的细胞凋亡,以及伤后72h神经元损伤修复现象。神经元机械性损伤后细胞存活率下降,伤后30min起,各损伤组较对照组细胞存活率均明显下降;伤后1～24h,中﹑重型损伤组细胞存活率较轻型损伤组明显下降(P<0.05)。伤后30min起,各损伤组较对照组乳酸脱氢酶活性明显升高;伤后12～24h重型损伤组乳酸脱氢酶活性高于轻型损伤组(P<0.05)。结论:胎鼠脑皮层体外原代培养生成的神经元纯化率较高;划割损伤对神经元有确切的致伤作用,依据划割范围不同,可造成不同程度的神经元损伤。
- 黄卫东刘晓斌张越林费舟
- 抑制Homer-1b/c基因表达对创伤性神经元损害的保护作用
- 2011年
- 目的研究抑制Homer-1b/c基因表达对神经元的保护作用。方法采用RNA干涉技术,通过逆转录聚合酶链式反应和Western blotting分析抑制Homer-1b/c表达效果。免疫组化检测代谢性谷氨酸受体1a(mGluR1a)表达变化。共聚焦显微镜观察神经元细胞内钙含量变化。通过乳酸脱氢酶(LDH)活性测定,研究抑制Homer-1b/c表达对神经元损伤的保护作用。结果转染神经元后36 h,Homer-1b/c表达明显被抑制,mGluR1a仅出现在胞浆部分。转染组较对照组细胞内钙荧光强度单位明显下降(23.4±2.8 vs 51.8±7.5),两组间差异有显著的统计学意义(P<0.05)。各组神经元损伤前培养液LDH活性差异无统计学意义(P>0.05),损伤后24 h,对照组和空载体组LDH活性分别为(158±23.0)U/L和(145±25.1)U/L,而转染组为(93±20.1)U/L,与对照组及空载体组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Homer-1b/c对于mGluR1a从胞体向树突部位转运以及受体在突触后膜锚定都具有重要作用。Homer-1b/c参与了细胞内钙释放,降低Homer-1b/c表达对神经元具有保护作用。
- 黄卫东费舟张越林王继军刘晓斌杨军
- 关键词：神经元代谢性谷氨酸受体细胞转染
