国家自然科学基金(30070374)
- 作品数：10 被引量：74H指数：6
- 相关作者：窦忠英徐小明华进联葛秀国李勇更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技攻关计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 牛胎儿成纤维细胞分离与体外培养被引量：3
- 2004年
- 本研究以 4 5d牛胎儿为材料 ,使用 0 .2 5 %胰酶 + 0 .0 4 %EDTA消化液 ,分离得到牛胎儿成纤维细胞 ,体外培养传代至第 2 8代。本实验描绘出牛胎儿成纤维细胞生长曲线 ,并发现α MEM是一种适合牛胎儿成纤维细胞生长的培养基。分离得到的牛胎儿成纤维细胞传至第 1 8代时核型仍然正常 ,冷冻。
- 徐小明窦忠英华进联葛秀国
- 关键词：畜牧兽医科学基础学科胎儿成纤维细胞体外培养
- 小鼠原始生殖细胞的迁移(英文)
- 原始生殖细胞是动物功能性配子的祖细胞,起源与胚外外胚层,在早期的器官发生期迁移到原始性腺处并参与其形成。关于指导脊椎动物原始生殖细胞迁移的信号还不十分清越,但是像干细胞因子、基质细胞源因子和转移生长因子对原始生殖细胞的发...
- 葛秀国杨继建窦忠英
- 关键词：原始生殖细胞迁移细胞外基质干细胞因子
- 文献传递
- 免疫外科法分离克隆BALB/c小鼠胚胎干细胞
- 用免疫外科法从45枚BALB/c小鼠囊胚中分离得到20枚去除滋养层细胞的ICM,接种在MEF饲养层上,使用DMEM(高糖)+15% FBS+0.1mmol/L β-巯基乙醇+0.o1 mmol/L非必需氨基酸+1000 ...
- 徐小明窦忠英华进联葛秀国
- 关键词：BALB/C小鼠内细胞团胚胎干细胞
- 文献传递
- 白血病抑制因子与胚胎干细胞被引量：7
- 2003年
- 白血病抑制因子对细胞的生长和分化有多种作用 ,通过与其受体结合传导信号 ,gp1 30与LIF受体 β链的结合激活JAK激酶 (JAK1和JAK2 ) ,JAK激酶磷酸化STAT信号转录子 ,STAT3的磷酸化对于阻止体外培养的干细胞的分化具有十分重要的作用。
- 葛秀国徐小明李勇窦忠英
- 关键词：白血病抑制因子胚胎干细胞STAT受体
- 胚胎工程技术及其在畜牧业中的应用被引量：10
- 2004年
- 胚胎工程技术研究的目的,是对哺乳动物的胚胎在体外进行人为控制操作,让其继续发育,进而获得优良或珍稀动物个体,并应用这类技术进行基础研究和应用开发性研究。文章主要叙述了胚胎移植、胚胎冷冻保存、胚胎分割、体外受精、性别鉴定及控制、转基因动物、细胞核移植、胚胎干细胞和胚胎嵌合等胚胎工程技术及其在畜牧业中的应用前景。
- 李勇窦忠英杨炜峰
- 关键词：胚胎工程技术畜牧业胚胎移植胚胎冷冻胚胎分割
- PCR法进行胚胎性别鉴定的研究进展被引量：6
- 2005年
- 通过胚胎性别鉴定,可控制家畜后代性别比例,获得巨大经济效益。早期胚胎性别鉴定的方法有,核型分析法,H-Y抗原法,X-连接酶检测法和PCR扩增法等。PCR法因其简单、快速、准确等优点,成为目前比较理想的胚胎性别鉴定方法。笔者对性别决定基因、PCR法胚胎性别鉴定的几个关键环节进行了综述,并对其前景进行了展望。
- 王晗窦忠英
- 关键词：胚胎性别鉴定性别决定基因性别比例检测法连接酶后代
- 优化成年家兔皮肤上皮细胞核移植有关参数被引量：2
- 2006年
- 以成年家兔上皮细胞为核供体,对兔体细胞核移植中孤雌激活、去核、融合、激活及重构胚发育等环节中的有关参数进行筛选和研究.证实160、200和240 V/mm电场强度时的孤雌激活率（77.78%、95.12%、97.30%）无显著差异;200和240 V/mm电场强度时的孤雌激活胚囊胚率（52.94%、48.64%）显著高于160 V/mm时（16.67%）;200和240 V/mm电场强度时的重构胚融合率（82.85%、79.78%）无显著差异;200 V/mm电场强度时的重构胚分裂率（71.69%）显著高于240 V/mm时（56.56%）,裂解率（6.82%）显著低于240 V/mm时（17.92%）.在纺锤体观测仪下,第一极体与纺锤体在一起或相距较近的占60%左右.原核明显的重构胚的分裂率（91.75%）极显著的高于观察不到原核的重构胚（42.86%）.重构胚体外培养发育囊胚率（24.39%）低于受精卵原核胚的体外培养的发育率（86.05%）,但两者同自然交配体内发育的囊胚的细胞数（81±17）差异不显著.将646枚2～4细胞重构胚移植到38只同期化或非同期化的受体后没有幼仔出生.
- 杨春荣冯秀亮雷安民华进联高志敏窦忠英
- 关键词：上皮细胞卵母细胞孤雌激活核移植
- 免疫外科法分离克隆BALB/c小鼠胚胎干细胞被引量：10
- 2004年
- 目的 使用免疫外科法分离克隆BALB c小鼠胚胎干细胞 (embryonicstemcells,ES细胞 ) ,为进一步建立BALB c小鼠ES细胞系打下基础。方法 用免疫外科法从 4 5枚BALB c小鼠囊胚中分离得到 2 0枚去除滋养层细胞的ICM ,接种在MEF饲养层上 ,使用DMEM(高糖 ) +15 %FBS +0 1mmol Lβ 巯基乙醇 +0 0 1mmol L非必需氨基酸 +10 0 0IU mlLIF +10 0IU mL青霉素 +10 0IU ml链霉素培养液 ,17枚形成典型的ICM集落 (85 0 % ) ,有一枚胚胎传至第 10代。用于全胚培养的BALB c小鼠胚胎共 10 2枚 ,使用与免疫外科相同的培养方法 ,6 6枚形成典型的ICM集落 (6 4 7% ) ,其中一枚胚胎传至第 8代。结果 免疫外科法较全胚培养法有利于小鼠ES细胞的分离与克隆 ;添加LIF(10 0 0IU ml)有利于小鼠ES细胞的分离与传代 (P <0 0 5 ) ;0 0 5 %胰酶 +0 0 0 8%EDTA是较好的ES细胞消化液 ,对细胞综合损伤力小 ,且传代后ES细胞集落形成能力也较高 (P <0 0 5 )。结论 分离得到的ES细胞经形态学观察 ,AKP染色 ,体外分化实验 ,核型分析等证明其具有胚胎干细胞的诸多特性。
- 徐小明窦忠英华进联葛秀国
- 关键词：BALB/C小鼠胚胎干细胞克隆
- 牛胚胎生殖细胞的分离与培养被引量：4
- 2004年
- 胚胎生殖细胞 (Embryonicgermcells,EG)是由生殖嵴原始生殖细胞 (Primordialgermcells,PGCs)中分离得到的一种未分化而多潜能的干细胞。牛EG细胞的研究在EG细胞核移植、转基因及建立生物反应器方面具有广阔的应用前景。本研究从 2 9- 70日龄牛胎儿PGCs分离得到EG细胞 ,经过抑制分化培养 ,其中一个细胞系传至 6代。所分离得到的EG细胞具有典型的EG细胞形态 ,AP及PAS染色呈阳性 ,核型正常 ,同时观察到这些细胞在体外进行自发性分化 ,可形成类胚体。
- 徐小明华进联葛秀国窦忠英
- 关键词：成纤维样细胞神经样细胞生殖细胞牛胚胎分化培养日龄
- 牛原始生殖细胞的分离与培养被引量：23
- 2004年
- 从4～15周龄的牛胎儿生殖嵴中分离得到牛原始生殖细胞,以STO(一种建系的小鼠胎儿成纤维细胞)及MEF(小鼠胎儿成纤维细胞)为饲养层抑制分化培养,其中1个细胞系传至4代。研究发现,STO较MEF更有利于牛类EG细胞的分离与培养,体长小于5cm的胎儿适合牛EG细胞分离与克隆。同时观察到这些细胞在体外进行自发性分化,可形成上皮样细胞、神经样细胞和成纤维样细胞。
- 徐小明华进联冯秀亮窦忠英
- 关键词：原始生殖细胞胚胎干细胞胚胎生殖细胞
