贵州省科学技术基金(J[2008]2188)
- 作品数：9 被引量：53H指数：4
- 相关作者：罗军敏秦欢徐林朱杰华陈松林更多>>
- 相关机构：遵义医学院遵义医学院附属医院贵阳医学院第二附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 单核细胞趋化蛋白-1及其受体在结核性胸膜炎患者中的表达被引量：4
- 2009年
- 目的探讨单核细胞趋化蛋白-1（MCP—1）及其受体（CCR2）在结核性胸膜炎患者外周血和胸水中的表达情况。方法采用流式细胞术检测结核性胸膜炎患者外周血单个核细胞及胸水细胞中的CCR2；用ELISA法检测结核性胸膜炎患者血清及胸水中的MCP-1。结果结核性胸膜炎患者外周血中MCP．1和CCR2表达明显高于正常对照组[MCP-1：（340．8±220．8）与（9．0±3．8）ng／L，P〈0．01；CCR2：（18．2±10．1）％与（6．9±3．5）％，P〈0．05]；外周血中MCP-1与CCR2两者呈正相关（r=0．227，P〈0．05），胸水中检测到MCP—1和CCR2表达。结论MCP-1和CCR2在结核性胸膜炎患者外周血和胸水中的表达明显增加，是参与结核性胸膜炎发生发展的重要免疫分子。
- 汤贤英陈松林罗军敏方宁姚新生
- 关键词：单核细胞趋化蛋白-1CCR2结核性胸膜炎
- 结核病T细胞亚群的研究进展被引量：10
- 2011年
- T淋巴细胞亚群的数量和功能变化与结核病的病情进展和转归密切相关,探讨结核杆菌感染机体时T淋巴细胞亚群免疫应答及其影响因素,对结核病预防、诊治有重要意义。
- 叶军罗军敏
- 关键词：结核病T淋巴细胞亚群免疫应答
- Toll样受体信号介导细胞凋亡的研究进展被引量：11
- 2014年
- 细胞凋亡在病毒、细菌等感染的过程中和肿瘤等疾病的发生发展中起至关重要的作用。Toll样受体(TLR)存在于巨噬细胞、肿瘤细胞等细胞表面,能直接识别并结合病原微生物和宿主细胞表面的病原相关分子模式,然后通过髓样分化因子88/Fas相关死亡结构域/caspase-8、TIR结构域接头蛋白/蛋白激酶/干扰素调节因子和核因子κB路径等信号途径对巨噬细胞、肿瘤细胞等细胞的凋亡起调节作用。随着对TLR介导的细胞凋亡中Fas相关死亡结构域、TIR结构域接头蛋白等多种信号分子的深入研究,有助于了解它们在细胞凋亡中的作用,并为感染和肿瘤等疾病的分子靶向治疗提供新的目标。
- 高绍莹罗军敏秦欢
- 关键词：TOLL样受体细胞凋亡信号转导
- Th17/IL-17在结核感染中的研究进展被引量：3
- 2013年
- 特异性免疫细胞在各种病原体感染中发挥重要作用,CD8^＋T细胞发挥直接杀伤靶细胞功能,而CD4^＋辅助性T细胞,主要是通过分泌多种细胞因子,发挥特异性免疫功能。经典的CD4^＋T细胞主要分为Th1和Th2细胞,新近发现了CD4^＋T细胞的新亚群Th17细胞。
- 朱杰华罗军敏
- 关键词：结核感染CD4^+T细胞特异性免疫功能CD8^+T细胞辅助性T细胞TH2细胞
- 结核性胸膜炎患者外周血和胸水γδT和Th17细胞的频率变化及其意义被引量：3
- 2013年
- 目的通过检测结核性胸膜炎患者抗结核治疗前后胸水和外周血中γδT细胞和Th17细胞的比例,探讨2群细胞在该病的发生及治疗过程中的变化及意义。方法选取结核性胸膜炎患者30例,分别采集患者抗结核治疗前和治疗后(7～10 d)的胸水及外周血,分离单个核细胞,采用流式细胞术检测γδT和Th17细胞的比例,同时设立健康对照组。结果与健康对照组相比,抗结核治疗前结核性胸膜炎患者外周血中CD3+T细胞比例显著降低(P<0.05),而γδT细胞的比例显著升高(P<0.05),表达IFN-γ的CD3+T和γδT细胞比例均显著升高(P<0.01);患者胸水中的CD3+T和γδT细胞比例显著高于患者外周血(P<0.05),胞内IFN-γ水平与2群细胞变化一致。抗结核治疗后患者外周血和胸水中CD3+T细胞比例较治疗前升高而γδT细胞比例下降,胞内IFN-γ的水平较治疗前显著降低(P<0.05)。抗结核治疗前结核性胸膜炎患者外周血中CD4+T细胞比例较健康对照组显著降低(P<0.01)而Th17细胞比例显著升高(P<0.01);患者胸水中CD4+T细胞显著高于外周血(P<0.05)而Th17细胞比例显著降低(P<0.05)。抗结核治疗后患者胸水中CD4+T和Th17细胞比例较治疗前升高但无显著性差异;IL-17+T与Th17细胞之间无显著相关性,而CD4+RORγt+T与Th17细胞之间存在显著相关性(r=0.564,P<0.05)。结论γδT和Th17细胞在抗结核治疗前后具有显著差异提示2群细胞可能在结核性胸膜炎的发病和治疗中发挥重要作用。
- 朱杰华罗军敏徐林秦娜琳秦欢江娟邵云浩
- 关键词：单个核细胞TH17细胞ΓΔT细胞结核性胸膜炎
- 热休克蛋白16.3多克隆抗体的制备
- 2014年
- 目的大肠杆菌表达Hsp16.3,制备其多克隆抗体。方法设计引物,从H37Rv基因组中扩增出目的片段Hsp16.3,pET28a-Hsp16.3质粒的构建、克隆和表达。对His-Hsp16.3进行诱导、表达和纯化。用纯化好的蛋白免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,用ELISA检测抗血清中多抗的效价,用Western blot法检测多克隆抗体的生物活性。结果重组质粒pET28aHsp16.3在E.coli BL21(DE3)中成功表达,SDS-PAGE结果显示在His-Hsp16.3的相对分子质量(Mr)约为20 000。制备的多克隆抗体效价为1∶800,且特异性较好。结论成功的克隆、表达、纯化出His-Hsp16.3,并且成功制备了抗Hsp16.3多克隆抗体。
- 高绍莹秦欢徐林秦娜琳于伟娜丁陈波袁建波宋丹罗军敏
- 关键词：抗体基因表达结核分枝杆菌
- 结核分枝杆菌小分子热休克蛋白16．3蛋白的原核表达及功能检测被引量：9
- 2014年
- 目的进行结核分枝杆菌小分子热休克蛋白MTB Hsp16.3原核表达载体的构建、表达、纯化并初步观察其生物学效应。方法提取临床H37Rv分离株基因组DNA,PCR扩增Hsp16.3基因,将其重组到原核表达载体Pet28a中,构建原核表达载体Pet28a-Hsp16.3,进行双酶切及测序鉴定。将测序正确的重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,对表达产物进行SDS-PAGE检测,同时通过镍柱纯化试剂盒纯化Hsp16.3,测定纯化后蛋白浓度,并进行Western blot法检测。将不同浓度纯化后蛋白作用小鼠腹腔巨噬细胞,实时定量PCR(qRT-PCR)检测巨噬细胞IL-10和IFN-γ的表达,同时设定空白对照组及阳性对照组。结果成功构建重组质粒Pet28a-Hsp16.3,并在E.coli BL21(DE3)中获得成功表达,通过镍柱纯化系统得到纯化Hsp16.3融合蛋白。qRT-PCR检测结果显示,不同浓度纯化后Hsp16.3蛋白作用小鼠腹腔巨噬细胞,可促进IFN-γ的产生而抑制IL-10的产生。结论成功克隆、表达和纯化了MTB Hsp16.3蛋白,Hsp16.3能促进小鼠腹腔巨噬细胞产生IFN-γ,抑制IL-10的产生。
- 秦欢高绍莹袁建波徐林罗军敏
- 关键词：蛋白纯化巨噬细胞
- 结核性胸膜炎患者外周血及胸腔积液中CD4^+和CD8^+ T细胞的活化分析被引量：2
- 2013年
- 结核性胸膜炎的发病机制目前仍不清楚。研究表明,免疫缺陷是结核性胸膜炎的重要发病因素。本研究主要通过检测结核性胸膜炎患者外周血和胸腔积液中CD4+和CD8+T细胞的比例变化及其活化程度,分析并探讨结核性胸膜炎患者机体免疫状况。在筛选病例后收集患者的外周血和胸腔积液,分离出单核细胞,采用流式细胞仪检测CD4+和CD8+T细胞的比例以及人白细胞抗原DR(HLA-DR)表面活化标记和颗粒酶B在CD8+T细胞中的表达水平。结果显示,结核性胸膜炎患者外周血中CD3+、CD4+和CD8+T细胞的比例均低于健康对照组。患者胸腔积液中CD3+和CD4+T细胞的比例均显著高于外周血,而CD8+T细胞无显著差异。患者外周血中CD4+HLA+和CD8+HLA+T细胞显著高于健康对照组,而CD8+颗粒酶B+T细胞显著低于健康对照组。患者胸腔积液中CD4+HLA+、CD8+HLA+和CD8+颗粒酶B+T细胞均显著低于外周血,仅外周血中CD8+T细胞比例与颗粒酶B水平呈正相关。以上结果表明,结核性胸膜炎患者外周血与胸腔积液中的免疫应答存在差异,提示患者可能存在免疫缺陷。
- 朱杰华罗军敏叶军秦欢江娟邵云浩
- 关键词：结核性胸膜炎CD4+T细胞CD8+T细胞颗粒酶B
- 结核性胸膜炎患者胸水和外周血Treg细胞及DC细胞亚群的检测被引量：13
- 2013年
- 目的:探讨CD4+CD25+CD127-调节性T细胞及DC细胞亚群在结核性胸膜炎患者外周血及胸腔积液中的表达变化及其临床意义。方法:采集30例健康正常者的外周血以及30例结核性胸膜炎患者的外周血和胸水,应用流式细胞术检测各标本中DC1、DC2亚群、CD4+CD25+CD127-调节性T细胞数量的变化。结果:患者外周血的DC1/PBMC、DC2/PBMC明显低于健康正常外周血(P<0.05);患者胸水中检测到DC细胞,与患者外周血间具有正相关(r=0.503及0.437,P<0.05);患者PBMC中的Treg细胞值明显高于健康正常PBMC(P<0.05);患者胸水中检测到Treg细胞,与患者外周血间具有正相关(r=0.672,P<0.05)。结论:结核性胸膜炎患者外周血中树突状细胞数量比正常对照组低,而Treg的数量较正常对照组高,与正常对照组相比存在显著性差异,表明CD4+CD25+CD127-调节性T细胞和DC细胞亚群可能在结核性胸膜炎中发挥着重要的作用。
- 陈松林罗军敏汤贤英姚新生孙万邦
- 关键词：树突状细胞结核性胸膜炎
