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排序方式：

利用RNA干扰抑制p21^(WAF1/CIP1)基因的表达及周期阻滞效应被引量：1: 2008年; 目的:构建p21WAF1/CIP1基因小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,观察其对p21WAF1/CIP1表达的影响和细胞周期的变化。方法:合成了针对p21WAF1/CIP1基因的siRNA,将其克隆到siRNA表达载体pSliencer2.1-U6neo上,将重组质粒和带FLAG标签的p21WAF1/CIP1共转染293T人胚肾细胞,通过Westernblot检验RNA干扰(RNAi)敲低外源p21WAF1/CIP1的效果;将重组质粒单独转染293T人胚肾细胞,利用p21WAF1/CIP1抗体检测RNAi敲低内源p21WAF1/CIP1的效果;利用流式细胞仪检测敲低后细胞周期的变化。结果:测序证明构建了p21WAF1/CIP1siRNA真核表达载体;Westernblot和流式细胞分析证明,构建的siRNA能有效降低p21WAF1/CIP1基因的表达,并且使G1期细胞数减少14.03%,S期细胞增多13.45%。结论:构建了p21WAF1/CIP1siRNA的真核表达载体,该siRNA能有效抑制p21WAF1/CIP1基因的表达并部分解除了G1期阻滞。; 王朝云丁丽华叶棋浓; 关键词：RNA干扰基因表达

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国家科技重大专项(2007CB914603)