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铁皮石斛居群差异的研究ⅡISSR指纹标记方法的建立与优化被引量：49: 2006年; 目的：针对铁皮石斛ISSR的反应特点，建立稳定可靠的ISSR分子指纹标记反应体系，为进一步研究铁皮石斛的居群差异奠定基础。方法：通过筛选引物并设定影响铁皮石斛ISSR反应的诸因子的不同浓度，检测ISSR不同反应体系的扩增效果；通过分析非特异性条带的产生原因并进行条件优化，建立铁皮石斛ISSR稳定可靠的反应体系。结果与结论：首次建立了可用于铁皮石斛ISSR-PCR分析的最适宜的反应体系：25μL．PCR反应体系中，10×Taq酶配套缓冲液，1．5UTaq DNA聚合酶，1．2—1．8mmol·L^-1 MgCl2，80μmol·L^-1 dNTP，0．2μmol·L^-1引物，DNA模板约20ng，退火温度52-60℃；实验表明：Taq酶质量、DNA模板品质、退火温度等对ISSR反应结果具有较大影响。所建立的铁皮石斛ISSR反应体系具有标记位点清晰、反应系统稳定、检测多态性能力较强、重复性好等特点，可以较好地应用于铁皮石斛的居群鉴别及居群分子生态的研究。; 沈洁丁小余丁鸽刘冬扬唐凤贺佳; 关键词：ISSR反应体系

铁皮石斛野生居群遗传多样性的RAPD分析与鉴别被引量：85: 2005年; 目的采用RAPD分子标记技术,对铁皮石斛8个野生居群的遗传多样性、亲缘关系以及分子鉴别等进行研究.方法筛选随机引物进行RAPD分析,通过UPGMA聚类,研究铁皮石斛各居群间的遗传关系,构建居群亲缘关系的分子系统树;利用特异性条带对铁皮石斛野生居群进行指纹分析鉴别.结果共筛选出10个有效引物,在8个野生居群材料的RAPD扩增中共得到439个位点,平均每个引物扩增出43.9个位点,每个居群扩增出54.9个位点;在所获得的104条可重现谱带中,9条是单态的,95条是多态的,多态性程度达91.35%,遗传距离在0.590～0.727之间,平均为0.686.结论铁皮石斛居群间遗传差异明显,具有较丰富的遗传多样性;RAPD可以作为铁皮石斛野生居群遗传多态性、居群亲缘关系和分子鉴别研究的有效手段;引物S412可以有效鉴别铁皮石斛的8个野生居群.; 丁鸽丁小余沈洁唐凤刘冬扬贺佳李雪霞褚必海; 关键词：铁皮石斛居群 RAPD

硒对铁皮石斛拟原球茎生长及抗氧化系统的影响被引量：8: 2008年; 通过在培养基中添加Na2SeO3,研究不同浓度硒对铁皮石斛组织培养拟原球茎的生长及抗氧化系统的影响.结果表明:适量加硒(≤0.2 mg/L)促进了拟原球茎的增殖生长,而高浓度硒(>0.2 mg/L)则抑制了增殖,并且发现拟原球茎生长的最佳硒浓度为0.05 mg/L.低浓度硒(≤0.05 mg/L)显著增强了拟原球茎SOD、CAT、GSH-PX活性,而使POD活性降低、O2.-产生速率变小,MDA含量明显下降;硒浓度过高(>0.1 mg/L),SOD、CAT、GSH-PX活性被抑制,POD活性升高,O.2-产生速率变大,MDA含量大幅上升.总之,适量加硒可增加产量,提高机体抗氧化能力.; 徐国华常俊毛善国罗玉明丁小余; 关键词：铁皮石斛硒抗氧化系统

铁皮石斛野生居群研究(Ⅳ):RAPD反应体系的构建与优化被引量：7: 2006年; 为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系,本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化.通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是:25μLPCR反应体积,10×Buffer 2.5μL,2.5 mmol/L MgC l2,dNTP 2.5μL(各2.5mmol/L),模板DNA为30 ng,Taq聚合酶1.5 U,随机引物12 pmol,ddH2O 14.2μL.最佳扩增程序:94℃预变性3m in,94℃变性50 s,38℃复性1 m in,72℃延伸2 m in,循环40次;最后72℃延伸5 m in.4℃保存.; 丁鸽丁小余沈洁刘冬扬贺佳唐凤; 关键词：铁皮石斛

锗对铁皮石斛原球茎的生长及抗氧化酶系的影响被引量：14: 2005年; 研究了不同浓度的锗(GeO2)对组培铁皮石斛原球茎的鲜重、可溶性蛋白质、叶绿素含量以及保护酶系统(SOD,CAT,POD)活性的影响.结果表明:适宜浓度的GeO2(5.00 mg/L)能够显著增加铁皮石斛原球茎的鲜重,提高可溶性蛋白质和叶绿素含量,使SOD、CAT活性明显升高,而POD的活性则呈现缓慢的下降趋势.由此可见,培养基中添加5.00 mg/L的锗时,对铁皮石斛原球茎的生长是有明显促进作用的.; 唐凤丁小余丁鸽刘冬扬贺佳沈洁褚必海; 关键词：锗铁皮石斛原球茎抗氧化酶系统

铁皮石斛野生居群遗传多样性的RAPD分析与保护策略: 目的采用RAPD分子标记技术,对中国特有濒危植物铁皮石斛的遗传多样性进行了研究。方法筛选随机引物进行RAPD分析,通过UPGMA聚类,研究了铁皮石斛各居群及个体间的遗传关系,构建了亲缘关系的分子系统树。结果从 350个引...; 丁鸽丁小余沈洁唐凤刘冬扬贺佳李雪霞褚必海; 关键词：铁皮石斛居群居群遗传结构; 文献传递

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国家自然科学基金(30370144)