广东省自然科学基金(S2011010004065)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：刘天助郭洪波汪鑫孟伟刘彦廷更多>>
- 相关机构：南方医科大学南昌大学第一附属医院中山市人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- P57对U87胶质母细胞瘤细胞系增殖的抑制作用及对替莫唑胺化疗损伤的抵抗作用被引量：1
- 2013年
- 目的探讨替莫唑胺（TMz）短期化疗下P57在胶质母细胞瘤细胞增殖抑制中的作用和机制。方法通过Western blotting检测P57和核增殖抗原（Ki-67）在TMZ短期化疗后U87细胞中的表达情况：通过Western blotting和免疫组化染色比较原发性和复发性（经TMZ治疗）胶质母细胞瘤临床标本中P57的表达差异；通过干扰P57的表达，检测TMZ短期化疗下和撤药后U87细胞凋亡、细胞周期和细胞活力的变化。结果TMZ短期化疗后，U87细胞中P57蛋白表达量明显升高．而Ki-67表达量明显下降；胶质母细胞瘤临床标本中复发性肿瘤的P57表达量高于原发性肿瘤；干扰P57表达后周期素依赖性激酶2（Cdk2）的表达量增加，表现为TMZ对U87细胞的增殖抑制作用减弱．但细胞凋亡率明显升高f未干扰细胞凋亡率为12．83％±1．40％，干扰组细胞凋亡率为31．00％±3．48％1；此外，撤药后，与对照组相比，P57干扰组U87细胞发生明显细胞周期阻滞和细胞活力下降。结论TMZ短期化疗下，U87细胞通过上调P57表达及下调Cdk2表达抑制肿瘤细胞增殖．同时通过抑制细胞周期进程以降低化疗损伤。
- 罗海洋刘天助孟伟尹明芳汪鑫郭洪波
- 关键词：胶质母细胞瘤替莫唑胺P57
- 一种功能性分离和纯化胶质瘤干细胞的方法
- 2014年
- 目的 探索一种简单、高效、稳定、可靠、经济的胶质瘤干细胞分离和纯化方法. 方法 取对数生长期U87细胞,应用无血清干细胞培养基,置含1％O2的缺氧培养箱中培养,10d后传代培养并离心收集第一代肿瘤球（G1）,连续传代培养获得第5代肿瘤球（G5）.免疫组化染色检测G5肿瘤球中巢蛋白（nestin）、CD133和缺氧诱导因子2α （HIF2α）的表达;Western blotting检测G1～G5肿瘤球中HIF2α蛋白的表达;免疫细胞化学染色检测G5分化细胞中胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、O1及βⅢ微管蛋白（βⅢ-Tublin）的表达.6只裸鼠按随机数字表法均分为实验组和对照组（每组3只）,于左侧背部皮下分别注射105个/5 μL G5、U87细胞,25 d后处死裸鼠,取出肿瘤,免疫组织化学染色检测肿瘤中nestin的表达. 结果 G5肿瘤球中nestin、CD133、HIF2α阳性细胞率分别为91％±5％、95％±4％和98％±2％; Western blotting检测显示G1～G5肿瘤球中HIF2α蛋白的表达逐渐增加;G5细胞能分化为表达βⅢ-Tublin、GFAP、O1的子细胞;6只裸鼠均长出肿瘤,实验组的肿瘤体积较大,且肿瘤组织nestin阳性细胞率（47％±11％）明显高于对照组（5％±2％）. 结论 使用功能性分离和纯化方法获得的G5肿瘤球细胞,表达胶质瘤干细胞的特异性标记物、具有三系分化能力和较强的体内成瘤能力,符合胶质瘤干细胞的特征.
- 刘天助宁瑜廖红展汪鑫邱胜聪刘彦廷徐宁波钟文宏廖奕宏黄洁棱郭洪波
- 关键词：胶质瘤干细胞缺氧纯化
