教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-06-0488)
- 作品数：6 被引量：111H指数：5
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- 相关机构：江南大学河南工业大学临沂师范学院更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 米糠谷氨酸脱羧酶的分离纯化方法研究
- 在对粗提物进行（NH4）2SO4分级沉淀后,分别采用色谱方法（包括:DEAE-Sephrose FF离子交换色谱、HW-55F体积排阻色谱和Superdex200凝胶过滤色谱）和Native-PAGE法分离纯化得到了米糠...
- 吕莹果张晖王立郭晓娜
- 关键词：米糠谷氨酸脱羧酶纯化色谱
- 文献传递
- 牡丹花不同发育时期脂质过氧化代谢的相关性研究被引量：4
- 2008年
- 【目的】分离纯化米胚芽谷氨酸脱羧酶（Glutamate decarboxylase,GAD）,并对其酶学性质进行研究。【方法】通过（NH4）2SO4分级沉淀、DEAE-Sephrose FF离子交换色谱、Superdex 200凝胶过滤色谱和Glu SephroseCL 4B亲和色谱等分离纯化技术,对米胚芽GAD进行分离纯化。用体积排阻高效液相色谱测定米胚GAD的相对分子质量,SDS-PAGE测定其亚基的相对分子质量。测定米胚GAD的最适温度和pH,通过酶动力学试验测定其动力学常数（Km）和最大反应速度（Vmax）,并测定KCl和MgSO4等化学物质对酶活性的影响。【结果】分离纯化得到了米胚GAD,其纯化倍数为65.7,比活达223.4 U/mg,酶活回收率为10.8%。米胚GAD的相对分子质量为78 ku,亚基相对分子质量为40 ku,说明米胚GAD是由2个相同亚基构成的二聚体。米胚GAD的最适反应温度为40℃,最适反应pH为5.6;米胚GAD的热稳定较差,80℃时酶几乎完全失活;米胚GAD在pH 4.5-8.0较为稳定,能保持88%以上的酶活。米胚GAD对谷氨酸Glu的Km为32.3 mmol/L,Vmax为1.159 mg/min;对磷酸吡哆醛（PLP）的Km为1.7μmol/L,Vmax为1.171 mg/min。K＋和Ag2＋对米胚GAD的活力有较大抑制,Mg^2＋、Mn^2＋、Al^3＋和Li^2＋等对活性影响不大,500μmol/L Ca^2＋对米胚GAD有较强的激活作用。【结论】米胚GAD的性质与其他植物GAD存在差异。
- 吕莹果张晖马晓博姚惠源
- 关键词：米胚芽谷氨酸脱羧酶酶学性质分析
- 氨基酸分析测定及衍生化方法被引量：29
- 2009年
- 该文综述氨基酸分析方法进展和分类,并对柱前衍生化RP-HPLC分析氨基酸方法及常用衍生化方法进行比较和探讨。
- 吕莹果张晖孟祥勇陈能飞
- 关键词：氨基酸衍生化
- 2,4-二硝基氟苯柱前衍生法测定植物中谷氨酸脱羧酶的活力被引量：12
- 2009年
- 建立了2,4-二硝基氟苯(FDNB)柱前衍生反相高效液相色谱紫外检测法测定植物中谷氨酸脱羧酶(GAD)活力的方法。利用GAD催化L-谷氨酸脱羧转变成γ-氨基丁酸(CABA)的性质,用FDNB柱前衍生GABA,HPLC Lichrospher C18色谱柱分离,在360nm下检测衍生物,从而得到生成GABA的含量,及不同植物组织中的GAD活力。本方法的线性范围0.2～5g/LGABA(r=0.9954),精密度RSD为0.21%、回收率高,且衍生化产物在一个月内都能保持稳定。用本方法测定得出稻米和茶叶中均有一定的GAD活力。在稻米组织中,GAD主要分布在米胚芽中,米糠也具有相对较高的GAD活性,为开发富含GABA的糙米食品提供了依据。
- 吕莹果张晖孟祥勇王立郭晓娜陶冠军
- 关键词：柱前衍生化高效液相色谱谷氨酸脱羧酶Γ-氨基丁酸
- 米糠谷氨酸脱羧酶的酶学性质研究被引量：11
- 2008年
- 研究了米糠谷氨酸脱羧酶(GAD)的酶学性质。结果表明:米糠GAD的最适温度为40℃,最适pH5.6,米糠GAD耐热性较差,60℃下保温0.5 h后,酶活下降至65%,保温1 h,酶活下降至48%,而70℃时酶就完全失活,而此酶在pH5.5～9都可以保持84%以上的酶活力。米糠GAD对底物和辅酶PLP的Km分别为0.028 45 mol/L和1.13μmol/L。KI、Ag^(2+)、SDS、乙酸对米糠GAD的活力有较大的抑制作用,而Ca^(2+)对米糠GAD的活性有较强的激活作用,提高了底物与米糠GAD的亲和力。
- 吕莹果张晖徐冬霞范立英姚惠源
- 关键词：米糠谷氨酸脱羧酶Γ-氨基丁酸酶学性质
- 植物中γ-氨基丁酸的代谢和功能被引量：16
- 2010年
- γ-氨基丁酸(GABA)是一种四碳非蛋白质氨基酸,存在于大部分真核和原核生物组织中。它在植物体中开启了一个信号传递途径,由于其重要的生理功能而备受重视。GABA的累积主要是受谷氨酸脱羧酶(GAD)的调控,也需要其他酶(GABA转氨酶和琥珀酸半醛脱氢酶)的作用以及胞内和胞外GABA的运输。数据表明,应激条件可引起植物中GABA的积累,因为应激条件可激活信号转换通道,在此通道内,逐渐增加的胞液Ca2+会激活受CaM调控的GAD和进而催化GABA的合成,同时H+也能激活植物中的GAD。生物体中GABA的合成涉及到pH的调节、N的贮藏、植物的生长发育和免疫、兼容性渗透以及谷氨酸盐的选择性利用。本文综述了GABA的代谢途径及代谢中的关键酶,并讨论了GABA在pH调节、储存氮源、植物生长和保护以及谷氨酸的转换利用中的发挥的功能。
- 吕莹果张晖王立郭晓娜孟祥勇
- 关键词：Γ-氨基丁酸代谢谷氨酸脱羧酶
- 米糠谷氨酸脱羧酶的分离纯化方法研究
- 在对粗提物进行(NH
- 吕莹果张晖王立郭晓娜
- 关键词：米糠谷氨酸脱羧酶纯化色谱
- 米糠资源的综合利用被引量：41
- 2009年
- 米糠作为稻谷加工主要的副产品,是一种量广面大的可再生资源,是一类具有广泛开发潜力的高附加值资源。目前在我国其营养价值和资源效益没有得到充分的发挥。综述了米糠的营养价值、综合开发利用途径及国内外的应用现状,旨在为米糠资源的综合利用提供帮助,实现米糠的多次增值和利用。
- 吕莹果季慧张晖王立郭晓娜姚惠源
- 关键词：米糠营养成分综合利用
