国家自然科学基金(31171952)
- 作品数：6 被引量：18H指数：3
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- 番茄miRNA的茎环qRT-PCR方法验证被引量：1
- 2015年
- 本研究采用SYBR Green染料的茎环q RT-PCR方法,以mi R159和mi R172为例,利用番茄叶片的总RNA作为模板,设计mi RNA的茎环引物、特异上游引物、通用下游引物,使用茎环荧光定量PCR法定量检测mi RNA表达量在番茄中的可行性。通过分析扩增曲线、熔解曲线,制作标准曲线,以及对PCR产物的克隆测序,结果表明该方法可以用于番茄mi RNA的定量检测,并且具敏感性高、特异性好、操作简单、节约成本、模板用量少的优点。Trizol法和试剂盒法提取的总RNA在后续实验中几乎没有差异,但Trizol法更为经济,有效率。Mi RNAs在植物的生长发育过程中起着重要的作用,本研究为番茄mi RNA的深入研究奠定了基础。
- 祁心杨瑞赵福宽王建立王绍辉程继鸿
- 关键词：MIRNA番茄
- 番茄叶片小RNA提取方法的优化被引量：3
- 2012年
- 以番茄叶片为材料提取小RNA,比较分析UNlQ-10柱式Trizol总RNA抽提试剂盒+LiCl法,常规Tr-izol+LiCl法和改进的Trizol法+LiCl法的提取效果。结果表明,改进的Trizol+LiCl法能从番茄叶片中提取高质量的小RNA,总RNA琼脂糖凝胶电泳条带完整清晰,核酸蛋白测定仪显示RNA的浓度为1 026.8ng/μL,A260/A280比值为2.00;A260/A230比值为2.31。15%聚丙烯酰胺-7mol/L尿素凝胶电泳显示小RNA带型区域清晰。用该方法提取的高质量的番茄叶片小RNA符合RT-PCR,Northern blot等分子生物学试验的标准。
- 陈华昌伟杨瑞王绍辉
- 关键词：番茄叶片
- 低温诱导的番茄NAC1基因表达特征分析（英文）被引量：1
- 2015年
- [目的]该研究旨在探索番茄NAC转录因子与抗低温的关系。[方法]以番茄幼苗为试材,采用RT-PCR方法克隆NAC1基因N端保守域,并利用RT-q PCR技术检测该基因在4℃低温l处理下的表达情况。[结果]在番茄根、茎、叶中NAC1基因均能表达,表达量随低温处理时间的变化而发生相应的变化。在番茄的不同器官中NAC1表达水平也有所不同,根中的表达水平整体高于茎和叶片中。[结论]该研究为进一步研究番茄NAC1基因的生物学功能奠定理论基础。
- 鲁广宁杨瑞姜荣王绍辉赵福宽
- 关键词：番茄NAC
- MiR319a对番茄生长发育的影响
- 2015年
- 利用过表达miR319a及过表达其靶基因LANCOELATE(LA)的转基因番茄株系来探明miR319a对番茄生长发育产生的影响。研究发现过表达miR319a番茄株系生长缓慢、植株矮小、叶片呈现出高度褶皱的表型且叶片表皮毛密度远大于野生型番茄(WT)的。此外,过表达miR319a番茄株系的叶肉细胞内叶绿体中淀粉粒的数量显著少于WT中的。不仅如此,过表达miR319a对番茄花器官的发育也产生了显著的影响。过表达miR319a番茄株系的花器官较小,花瓣呈现高度螺旋的表型且花粉粒也呈现干瘪皱缩状。这些结果表明miR319a在番茄生长发育过程中起着重要作用。
- 李子龙范敬伟杨瑞王绍辉
- 关键词：番茄花粉粒淀粉粒
- 茄子SmNAC1基因的克隆与表达分析被引量：7
- 2014年
- 以茄子幼苗为试材,利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得SmNAC1基因全长,并利用RT-qPCR技术检测该基因在GA、4℃低温、NaCl处理下的时空表达。结果显示:SmNAC1全长序列1 279 bp,开放阅读框为909 bp,编码302个氨基酸,推测其蛋白质分子量约35.04 kD;SmNAC1含有NAC家族的N端保守域,与番茄、马铃薯同源性高达90%。SmNAC1受GA、低温和高盐诱导,表达上调,但在根、茎、叶中的表达量有差异,在根中表达水平整体高于茎和叶中,显示SmNAC1在根中优势表达,且短时间(0.5～1 h)相对表达量较高,而在茎和叶中应答相对迟缓,且叶中表达水平趋于稳定。可见SmNAC1可能参与了茄子对外源GA诱导的响应及对低温、高盐胁迫的耐受调节过程。
- 邵帅徐岭贤王绍辉赵福宽
- 关键词：茄子NAC克隆基因表达高盐赤霉素
- 内质网钙池操控钙内流研究进展被引量：6
- 2017年
- 细胞内的内质网钙库清空所引发的钙内流是细胞钙信号的重要组成,介导胞外钙离子进入细胞内,并参与细胞内一系列广泛的生理过程。该过程主要由内质网上的钙离子感受器STIM蛋白和细胞膜上的Orai钙离子通道的所介导的。对钙库操控性钙内流的研究进展进行了讨论,并展望了未来的研究方向,以期为相关研究提供参考。
- 郑思思项楠赵福宽
